UNIDADE II - Fundamentos de Citogenética Clínica

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Profa. Dra. Luciana Marques da Silva
Cariótipo
Cariótipo
Cariótipo – BANDA G
BANDA C
CENTROMÉRICA
BANDA TELOMÉRICA
METACÊNTRICO
Cromossomo 1
SUBMETACÊNTRICO
Cromossomo 9
ACROCÊNTRICO cromossomo 14
ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS
ESTRUTURAIS
# DELEÇÃO
# DUPLICAÇÃO
# INVERSÃO
# ISOCROMOSSOMOS
# ANEL
# TRANSLOCAÇÃO
ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS ESTRUTURAIS
DELEÇÃO
♦ Ocorre perda de fragmentos do cromossomo, que podem 
constituir um ou muitos genes;
♦ Podem se originar por simples quebra ou eliminação 
cromossômicas. 
 
17
INTERSTICIAL
TERMINAL
TIPOS DE DELEÇÃO
18
SÍNDROME DE CRI DU CHAT – MIADO DO GATO
DELEÇÃO DO BRAÇO CURTO DO CROMOSSOMO 5 (5p-)
20
# Mesma alteração genética;
# Braço longo do 
cromossomo 15;
# 70% dos casos de Prader Willi 
- deleção proveniente do pai
# 60% dos casos de Angelman 
a deleção proveniente da mãe.
Síndrome de Prader-Willi e 
Síndrome Angelman
Síndrome de Prader-Willi e Síndrome de Angelman
Prader-Willi
# Hipotonia severa, choro fraco, obesidade, baixa estatura, mãos e pés pequenos e atraso geral do desenvolvimento. 
# A Síndrome de Angelman: severo atraso do desenvolvimento físico e mental, ausência de fala, ataxia, tremores, macrostomia e braquicefalia. 
Angelman
Síndrome de Prader-Willi e 
Síndrome Angelman
DELEÇÃO
DUPLICAÇÃO
♦ Um segmento cromossômico aparece mais de duas vezes 
em uma célula diplóide normal; 
♦ Pode estar ligado a um cromossomo ou um 
fragmento separado;
♦ Segregação destes cromossomos nos gametas 
 
 Transmissão para às próximas gerações 
27
IMPORTÂNCIA
VANTAGEM EVOLUTIVA
Duplicação no cromossomo 5q
46, XX ou XY, 5q ;
(duplicação de cerca de 10% do braço longo do cromossomo 5). 
Características: Retardamento Físico e Mental, 
Boca pequena, Testa protusa 
 
 
Duplicação no cromossomo 10q
	                                      	Duplicação -  10q24  a qter 
Deficiência de crescimento pré-natal 
Peso médio ao nascimento 2,7 kg 
Deficiência Mental Severa 
Microcefalia  
Face achatada /região frontal alta 
Fissuras palpebrais pequenas 
Sindactilia 
Malformações Cardíacas e Renais em 50% 
50% morre no 1º ano de vida 
  
Síndrome do Olho de Gato
	                                        	Duplicação - 22pter a q11 
Crescimento normal 
Deficiência Mental Leve (ou Normal com retardo emocional) 
Coloboma inferior da Íris 
Defeitos Cardíacos (mais de 1/3) 
Retorno venoso pulmonar anômalo  
Atresia Anal 
Hipertelorismo leve 
  
  
Duplicação no cromossomo 22
INVERSÃO
♦ Partes dos cromossomos tornam-se destacadas 
(quebra cromossômica);
♦ Giram 180o e são reinseridas de modo que os genes
ficam em ordem inversa;
32
♦ Com o centrômero PERICÊNTRICA 
♦ Sem o centrômero PARACÊNTRICA 
TIPOS
INVERSÃO
INVERSÃO PARACÊNTRICA
INVERSÃO PERICÊNTRICA
DICÊNTRICO
TRANSLOCAÇÃO
♦ Parte de um cromossomo torna-se separada e se liga a 
uma parte de um cromossomo não homólogo;
♦ Simples fragmento quebrado de um cromossomo se 
insere em outro não homólogo;
♦ Recíproca os segmentos são trocados 
entre dois cromossomos não homólogos;
41
Translocação Robertsoniana e Síndrome de Down
# A síndrome de Down por translocação 
#Fusão robertsoniana entre os cromossomos 21 e 14, 
# Pode ser o 21 com qualquer outro do grupo D (13, 14 e 15) 
# ou do próprio grupo G (21 e 22).
Única forma que pode reincidir na família.
Translocação 14/21 - Síndrome de Down
CARIÓTIPO 46, XX ou XY, -14, +t (14q21q).
CROMOSSOMO PHILADELPHIA
LEUCEMIAS MIELÓIDE
 CRÔNICA (LMC)
TRANSLOCAÇÃO
Alterações Cromossômicas e Câncer
Cromosomos de um tumor de mama, mostrando anormalidade na estrutura e no número:
Na imagem colorida, podem-se observar múltiplas translocações, incluindo uma dupla, apontada pela seta branca, formada por duas partes do cromossomo 8 (verde) e um pedaço do 17 (púrpura). O cariótipo contém 48 cromossomos, ao invés do número normal, 46. 
ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS
NUMÉRICAS
Háplóide (n)
Háplóide (n)
Diplóide (2n)
NORMAL
CARIÓTIPO NORMAL
Conjunto de Cromossomos do Indivíduo;
Autossomos (Não determinantes do sexo);
Alossomos (Determinantes do sexo);
Cariótipo do Homem (46,XY);
Cariótipo da Mulher (46,XX).
CARIÓTIPOS NORMAIS
CARIÓTIPO ANORMAL
 Anormalidades cromossômicas no cariótipo.
 Tipos de anormalidades:
* Numéricas
* Estruturais 
Autossomos
Alossomos (sexuais)
FATORES PREDISPONENTES
♦ Aumento da idade materna ou paterna;
♦ Predisposição genética para não disjunção.
Idade materna avançada
♦ Principal causa ambiental das aneuploidias;
♦ Observado nas trissomias autossômicas e sexuais;
♦ Não observado na Síndrome de Turner;
♦ O mecanismo como a idade materna atua na meiose ainda não está esclarecido;
♦ Não disjunção materna – 1ª divisão meiótica – 80% dos casos.
♦ 1/3 das trissomias;
♦ Idade acima de 55 anos;
♦ Não disjunção paterna - na 1ª divisão meiótica – 60% dos casos.
Idade paterna avançada
PREDISPOSIÇÃO GENÉTICA
 – NÃO DISJUNÇÃO
♦ A ocorrência de mais de uma criança com aneuploidia;
♦ Supõem que tais famílias tenham predisposição genética para a não – disjunção;
♦ Tendência dos cromossomos acrocêntricos à associação dos seus satélites;
♦ Mais alta em genitores de pacientes aneuplóides;
♦ Tendência aumentada a essa associação eleva o risco para a não – disjunção.
 ERROS MEIÓTICOS
CONSEQÜÊNCIAS
♦ Abortos espontâneos, natimortos, mortes neonatais;
♦ Malformações congênitas;
♦ Retardo mental;
♦ Distúrbios no desenvolvimento sexual.
 ANOMALIAS CROMOSSÔMICAS NUMÉRICAS
Doenças genéticas que consistem em alterações no número dos cromossomos.
* Euploidias (poliploidia)
*Aneuploidias
 ANOMALIAS CROMOSSÔMICAS NUMÉRICAS
 
♦ Nulissomia (2n – 2)
♦ Monossomia (2n – 1)
♦ Trissomia (2n + 1)
♦ Tetrassomia (2n + 2)
♦ Pentassomia (2n + 3)
ANEUPLOIDIAS
ANEUPLOIDIAS AUTOSSÔMICAS	
TRISSOMIAS (2n + 1)
Trissomia do cromossomo 21 (Down)	
		47,XX,+21 						47,XY,+21
Trissomia do cromossomo 13 (Patau)
		 47,XX,+13 					 	 47,XY,+13
Trissomia do cromossomo 18 (Edwards)
		 47,XX,+18 						 47,XY,+18
Sindrome de Down
Marcador ultrassonográfico; 
Diagnóstico da SD na 12 semana gestacional; 
Translucência nucal - nuca do feto;
 Valores acima de 3 mm; 
 Problemas congênitos (presentes ao nascimento), entre eles, a SD. 
 Um individuo apresenta um autossomo a mais;
45A + XY Masculino ou 45A + XX feminino; 
Os cromossomos não separam durante a
 gametogênese (óvulo e espermatozóide);
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 21
SÍNDROME DE DOWN
Síndrome de Down - Fenótipo 
Retardo mental;
 Achatamento da parte de trás da cabeça; 
Pele na nuca em excesso; 
Ponte nasal achatada; 
Inclinação das fendas palpebrais; 
Pequenas dobras de pele no canto interno dos olhos; 
 ANOMALIAS CROMOSSÔMICAS NUMÉRICAS
Doenças genéticas que consistem em alterações no número dos cromossomos.
* Aneuploidias
* Euploidias
 
♦ Nulissomia (2n – 2)
♦ Monossomia (2n – 1)
♦ Trissomia (2n + 1)
♦ Tetrassomia (2n + 2)
♦ Pentassomia (2n + 3)
ANEUPLOIDIAS
ANEUPLOIDIAS AUTOSSÔMICAS	
TRISSOMIAS (2n + 1)
Trissomia do cromossomo 21 (Down)	
		47,XX,+21 						47,XY,+21
Trissomia do cromossomo 13 (Patau)
		 47,XX,+13 					 	 47,XY,+13
Trissomia do cromossomo 18 (Edwards)
		 47,XX,+18 						 47,XY,+18
Sindrome de Down
Marcador ultrassonográfico; 
Diagnóstico da SD na 12 semana gestacional; 
Translucência nucal - nuca do feto;
 Valores acima de 3 mm; 
 Problemas congênitos (presentes ao nascimento), entre eles, a SD. 
 Um individuo apresenta um autossomo a mais;
45A + XY Masculino ou 45A + XX feminino; 
Os cromossomos não separam durante a
 gametogênese (óvulo e espermatozóide);
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 21
SÍNDROME DE DOWN
Síndrome de Down - Fenótipo 
Retardo mental;
 Achatamento da parte de trás da cabeça; 
Pele na nuca em excesso;Ponte nasal achatada; 
Inclinação das fendas palpebrais; 
Pequenas dobras de pele no canto interno dos olhos; 
Síndrome de Down - Fenótipo 
Orelhas ligeiramente menores; 
Boca pequena; 
Língua proeminente; 
Tônus muscular diminuído; 
Ligamentos soltos; 
Mãos e pés pequenos. 
Síndrome de Down - Genótipo 
95% dos casos 3 cópias do cromossomo 21; 
5% dos casos translocação (14, 21 ou 22);
4% dos casos mosaicismo;
Freqüência 0,65% dos recém-nascidos; 
85% dos casos mães com mais de 35 anos de idade.
v
MOSAICO - DOWN
# 2 a 4% dos afetados;
# Não disjunção do cromossomo 21 
# Mitose (células somáticas) no embrião.
Mosaicismo do cromossomo 21 
Síndrome de Patau 
♦ Klaus Patau em 1960;
♦ Malformações múltiplas em um neonato;
♦ Incidência = 1 caso para 6000 nascimentos;
♦ 45% dos afetados falecem após 1 mês de vida; ♦ 70% aos 6 meses e somente menos de 5% dos casos sobrevivem mais de 3 anos;
 ♦ Maior sobrevida relatada = 10 anos de idade.
Síndrome de Patau 
Não disjunção dos cromossomos – 24 cromossomos;
Trissômico para o cromossomo 13; 
20% dos casos resultam de uma translocação não-balanceada. 
Idade da mãe é superior a 35 anos em 40% dos casos. 
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 13
SÍNDROME DE PATAU
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 18
SÍNDROME DE EDWARDS
Síndrome de Edwards 
John H. Edwards (1960);
Trissomia livre do 18 (47, XX ou XY, +18);
Trissomia – mosaico (mais leve);
Translocação - todo ou a maior parte do cromossomo 18;
Original ou herdada de um genitor;
Síndrome de Edwards 
Trissomia parcial de todo o braço longo produz o fenótipo típico da trissomia do 18;
A incidência é de cerca de 0,3 por 1000 nascimentos;
A Trissomia do 18 está associada à idade materna, 
Mulheres com mais de 35 anos de idade. 
♦ Deficiência mental e de crescimento; 
♦ Implantação baixa das orelhas; Rim duplo
♦ Ocorrência 1/6.000 nascimentos
♦ 5% a 10% sobrevive o 1º ano
SINDROME DE TURNER (45,X)
♦ Desenvolvimento sexual retardado ;
♦ Ausência de desenvolvimento das mamas até os 13 
anos;
♦ Apresentam amenorréia primária ou secundária;
♦ Geralmente estéreis ou subférteis ♦ Baixa estatura;
♦ Tendência a obesidade ♦ Pescoço Alado
♦ Defeitos Cardíacos
 ♦ Ocorrência 1/2.500 – 1 / 10.000 nascimentos do sexo 
feminino
SINDROME DE TURNER (45,X)
Síndrome de Patau 
Não disjunção dos cromossomos – 24 cromossomos;
Trissômico para o cromossomo 13; 
20% dos casos resultam de uma translocação não-balanceada. 
Idade da mãe é superior a 35 anos em 40% dos casos. 
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 13
SÍNDROME DE PATAU
TRISSOMIA DO CROMOSSOMO 18
SÍNDROME DE EDWARDS
Síndrome de Edwards 
John H. Edwards (1960);
Trissomia livre do 18 (47, XX ou XY, +18);
Trissomia – mosaico (mais leve);
Translocação - todo ou a maior parte do cromossomo 18;
Original ou herdada de um genitor;
Síndrome de Edwards 
Trissomia parcial de todo o braço longo produz o fenótipo típico da trissomia do 18;
A incidência é de cerca de 0,3 por 1000 nascimentos;
A Trissomia do 18 está associada à idade materna, 
Mulheres com mais de 35 anos de idade. 
♦ Deficiência mental e de crescimento; 
♦ Implantação baixa das orelhas; Rim duplo
♦ Ocorrência 1/6.000 nascimentos
♦ 5% a 10% sobrevive o 1º ano
SINDROME DE TURNER (45,X)
♦ Desenvolvimento sexual retardado ;
♦ Ausência de desenvolvimento das mamas até os 13 
anos;
♦ Apresentam amenorréia primária ou secundária;
♦ Geralmente estéreis ou subférteis ♦ Baixa estatura;
♦ Tendência a obesidade ♦ Pescoço Alado
♦ Defeitos Cardíacos
 ♦ Ocorrência 1/2.500 – 1 / 10.000 nascimentos do sexo 
feminino
SINDROME DE TURNER (45,X)
SINDROME DE KLINEFELTER 
São indivíduos do sexo masculino;
Cariótipo geralmente 47,XXY, 48 XXYY, 48,XXXY, 49,XXXYY e 49,XXXXY; 
Frequência: 700 a 800 recém-nascidos; 
Estatura elevada ♦ corpo eunucóide ♦ pênis pequeno ♦ pouca pilosidade no púbis e 
♦ ginecomastia.
SINDROME DE KLINEFELTER
Possuem ereção e ejaculação;
São estéreis,
 Testículos pequenos e não produzem espermatozóides;
Devido à atrofia dos canais seminíferos;
Diminuição do nível Intelectual;
Mais profunda quanto maior for o grau da polissomia
SINDROME DE KLINEFELTER (47,XXY)
TRISSOMIA (2n+1), TETRASSOMIA (2n+2)
e PENTASSOMIA (2n+3) 
METAFÊMEA (47,XXX, 48,XXXX e 49,XXXXX)
Síndrome de Jacob (duplo Y)
Variantes: 47, XYY/ 48,XXYY/ 49,XXXYY
Altos (mais de 1,80 cm); 
Perfil psicológico - imaturidade no desenvolvimento emocional;
Menor inteligência verbal;
Dificuldade de relacionamento interpessoal;
Interesse - prisão de segurança máxima.
Síndrome do duplo Y
Exibem uma taxa de testosterona aumentada;
Fator contribuinte para a inclinação anti-social;
Aumento de agressividade;
Genes do cromossomo Y elevam a estatura ;
Predispõem seus portadores para comportamentos inesperados.
47, XYY
TRISSOMIA (2n+1), TETRASSOMIA (2n+2)
e PENTASSOMIA (2n+3) 
METAFÊMEA (47,XXX, 48,XXXX e 49,XXXXX)
Síndrome de do duplo Y
Altos (mais de 1,80 cm); 
Perfil psicológico - imaturidade no desenvolvimento emocional;
Menor inteligência verbal;
Dificuldade de relacionamento interpessoal;
Interesse - prisão de segurança máxima.
Síndrome de Jacobs (duplo Y)
Exibem uma taxa de testosterona aumentada;
Fator contribuinte para a inclinação anti-social;
Aumento de agressividade;
Genes do cromossomo Y elevam a estatura ;
Predispõem seus portadores para comportamentos inesperados.
47, XYY
	INDICAÇÕES PARA ANÁLISE CROMOSSÔMICA
	Abortamento recorrente
	Anormalidade congênita múltiplas
	Deficiência mental sem causa conhecida
	Gestação em mulher de idade avançada
	História familiar de síndromes cromossômicas
	Malignidade e síndromes por quebra cromossômica ou neoplasias
	Natimortos ou morte neonatal por causa desconhecida ou inexplicável
	Problemas de fertilidade
	Problemas precoces de crescimento e de desenvolvimento
	Ambiguidade sexual ou anormalidade no desenvolvimento sexual
BANDA G
BANDA G
É a técnica mais utilizada;
Cromossomos com digestão pela tripsina;
Desnatura as proteínas cromossômicas;
Corados com Giemsa (origem do nome);
Bandas claras e escuras;
Escuras: DNA rico em bases AT e poucos genes ativos;
Claras: DNA rico em bases CG e muitos genes ativos;
Maioria dos pontos de quebra e rearranjos cromossômicos – bandas claras;
Padrão único para cada cromossomo humano.
FISH – Hibridização in sito com Fluorescência
Hibridização com sondas fluorescentes
Princípio: complementaridade da sequência alvo com a sonda
♣ São seqüências de fita única de DNA ;
♣ Hibridizam (pareiam) com a seqüência de interesse;
♣ Destacando-as do restante da biblioteca genômica;
♣ Marcadas com uma substância fluorescente ou outro método de detecção.
Sondas
Sondas
FISH
Detecta presença ou ausência de um cromossomo;
Número de cópias de cromossomos;
Localização cromossômica;
Fita simples de DNA – SONDA se hibridiza com um sequencia complementar desconhecida;
Estuda cromossomos na intérfase ou metáfase.
Intérfase
Metáfase
SONDA CENTROMÉRICA
Sequências de DNA repetitivo;
Situados no centrômero e na região pericentromérica;
Estudo de células interfásicas;
Diagnóstico rápido das síndromes aneuploides;
Amostras de vilosidade coriônica ou amniocentese;
Diagnóstico pré-natal.
Sonda de sequência única cromossomo - específicas
Específica para um determinado lócus único;
Úteis para deleções e duplicações submicroscópicas;
Pode ser usada em conjunto com sondas centroméricas;
Cromossomos 18, X e Y – diagnóstico das alterações numéricas mais comuns
Rápido diagnóstico pré natal; 
Das aberrações numéricas mais comuns.
SONDA TELOMÉRICA
Pequenas alterações; 
subteloméricas pouco perceptíveis;
Deleções e translocações;
Em uma pequena mas significativa proporção de crianças com deficiência mental inexplicável.
SONDA DNA SATÉLITE: Determinação do número de cópias de um cromossomo;
SONDA CROMOSSOMO INTEIRO: Um coquetel de sondas obtidas de diferentes regiões de um dadocromossomo
Pintura cromossômica;
Caracteriza rearranjos complexos;
Pequenas translocações;
Origem de material cromossômico adicional