ANÁLISE DE PRODUTOS NÃO ESTÉREIS

Prévia do material em texto

ANÁLISE DE PRODUTOS NÃO ESTÉREIS
Professor: Yuri Barreto
Faculdade Maurício
de Nassau
Fortaleza
2020
Controle De Qualidade
Microbiológico
Produtos não estéreis Controle de Qualidade Microbiológico de 
Produtos Não Estéreis
Produtos Estéreis X Produtos Não Estéreis
➢ Comprimidos
➢ Cosméticos
➢ Injetavéis
➢ Colírios
➢ Xarope
➢ Cápsula
Produtos não estéreis 
➢ Segundo a RDC 301 que regula as BPF:
• Produtos devem ser fabricados, rotulados, embalados em locais apropriados onde
sua integridade não possa ser alterada por fatores extrínsecos
• Contaminação é proveniente de : ar , materiais de embalagem , equipamentos, 
utensílios e colaboradores
➢ Alta carga microbiana:
• Compromete segurança do paciente
• Altera estabilidade do produto
➢ Objetivos do Controle de Qualidade Microbiológico de Produtos Não Estéreis
• comprovar ausência de microrganismos patogênicos
• determinar o número de microrganismos viáveis em
função do uso do produto
Controle de Qualidade Microbiológico de 
Produtos Não Estéreis
Produtos não estéreis Controle de Qualidade Microbiológico de 
Produtos Não Estéreis
Produtos não estéreis Controle de Qualidade Microbiológico de 
Produtos Não Estéreis
Produtos não estéreis 
➢ Cosméticos e produtos farmacêuticos tópicos e orais:
• Contato com áreas portadoras de flora microbiana total, a carga microbiana
presente não deve compromete sua qualidade final e segurança do paciente
• Se admite a presença de carga microbiana, limitada: 
➢ Alta carga microbiana:
• Compromete segurança do paciente
• Altera estabilidade do produto
➢ Objetivos do Controle de Qualidade Microbiológico de Produtos Não Estéreis
• comprovar ausência de microrganismos patogênicos
• determinar o número de microrganismos viáveis em
função do uso do produto
Controle de Qualidade Microbiológico de 
Produtos Não Estéreis
Produtos não estéreis Morfologia Bacteriana
Limites microbianos para Produtos 
Não Estéreis
• Possíveis fontes de contaminação
• Diretas: aerossóis, água, matérias primas ( principalmente naturais)
• Indiretas: procedimentos de limpezas, instalações inadequadas,
colaboradores não paramentados , processos não validados
Proteinas e carboidratos em cosméticos 
PH neutro
Água ( obrigatório conservante)
Etanol, sorbitol, sacarose, propilenoglicol
PH ácido ou alcalino 
Altas temperaturas
Controle de Qualidade Microbiológico 
de Produtos Não Estéreis
Staphylococcus aureus 
• preparações tópicas em geral
Pseudomonas aeruginosa :
preparações tópicas, principalmente oftalmica
Escherichia coli e Salmonella sp :
preparações orais
Controle de Qualidade Microbiológico 
de Produtos Não Estéreis
Amostragem
Análises
Quantitativas
Semeadura em 
Profundidade e em 
Superfície
Filtração em 
Membrana
Número Mais Provável
Análises
Qualitativas
Pesquisa de Patógenos 
específicos
Sequencia para execução das etapas para pesquisa de 
patógenos em produtos não estéreis
• Amostra é diluída em tubos e adicionadas
alíquotas em uma placa de Petri esterilizada vazia
• Adicionado ágar liquefeito (fundido)
• Após solidificação, as placas serão incubadas
• Como alguns microrganismos são retidos abaixo
da superfície do ágar durante a solidificação, a
placa mostrará colônias na superfície e colônias
situadas logo abaixo da mesma.
• Esta técnica é recomendada para isolamento de
microrganismos móveis ou quando há suspeita de
microrganismos anaeróbios e também muito
utilizado para a contagem microbiana em
diferentes diluições
Pour Plate ( Semeadura em profundidade)
Semeadura da amostra em superfície
1. Aproveitar as mesmas diluições da técnica anterior 
2. Transferir 1ml de cada diluição para as placas de petri com o ágar já solidificado 
3. Com um bastão de vidro ou alça de Drigalski esterilizada 
4. cuidado para não usar a alça muito quente 
5. espalhe o analito sobre a superfície uniformemente 
com movimentos suaves começando do mais diluído para o menos diluído 
6. Incubar em estufa adequada 
 
 
 
Pour Plate x Spread Plate
Interpretação dos resultados
• Após a incubação, contar as colônias em placa
de Petri contendo de 30 a 300 colônias.
• Diluição: Nº de Colônias x Fator de Diluição
• Se não houver nenhum crescimento nas
placas inoculadas, o resultado será expresso
em menor que 10
Filtração por membrana
➢ Análise quantitativa
➢ Alíquotas do produto filtradas em membranas apropriadas (0,45micro m
ou 0,20micro m de poro e 47mm de diâmetro
➢ Coloca-se a membrana sobre a placa com meio de cultura solidificado
➢ Permite amostragem de volumes elevados
Número Mais Provavél (NMP)
➢ Análise estimativa fundamentada em probabilidade
➢ Indica valor em uma faixa que reflete número de microorganismo
➢ Permite amostras com níveis elevados de concentração , mas é indicado para
quando se espera valores baixos de contagem-caldo de dupla concentração
➢ Recomendado para amostras pouco solúveis ou translucidas
➢ Método com maior imprecisão
➢ Usa meios líquidos com diluições seriadas das amostras inoculadas nos
mesmos
➢ Número de réplicas de cada diluição pode variar (mais comum 3 a 5 réplicas)
➢ O uso de tabelas estatísticas oferecem número mais provável de m.o por mL
ou g e os limites superiores e inferiores (limite de confiança de 95%)
➢ Leitura e obtenção dos resultados se dá por comparação com padrão de
turvação de meios de cultura não seletivos
Número Mais Provavél (NMP)
➢ Microrganismos patogênicos são aqueles capazes de causar doenças.
➢ A resolução 481/99 da ANVISA estabelece quais parâmetros
microbiológicos devem ser controlados em produtos de higiene pessoal
perfumaria e cosméticos.
➢ Para os microrganismos patogênicos recomenda-se a detecção de
coliformes totais e fecais (Escherichia coli), Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa e Salmonella.
Pesquisa de patógenos específicos