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PROTEÍNA BRUTA Proteína: polímero de aminoácidos. 1. FUNÇÕES NO ORGANISMO Estrutural (músculos) Fornecimento de energia Síntese de enzimas, hormônios Regulação de processos metabólitos Transporte de oxigênio 2. MÉTODO KJELDAHL Determina teor de proteínas indiretamente Determina o N total do alimento, que vem do grupo amino das proteínas A denominação PROTEÍNA BRUTA vem do fato de estar determinando o N total e não apenas o N protéico. Fundamenta-se em 3 etapas básicas. 2.1 DIGESTÃO DA MATÉRIA ORGÂNICA O nitrogênio orgânico é capturado na forma de sulfato de amônio - (NH4)2SO4. MO+ H2SO4 CuSO4+K2SO4 → (NH4)2 SO4 +⋯ M.O.= Matéria orgânica contendo N. H2SO4 = faz digestão até que C e H sejam oxidados K2SO4 = aumenta P.E. do H2SO4 e torna digestão mais rápida. CuSO4 = catalisador. 2.2 DESTILAÇÃO DO NITROGÊNIO (NH4)2SO4 da etapa anterior reage com NaOH, dando origem a NH4OH (hidróxido de amônio) (NH4)2SO4 + 2NaOH ∆ →2NH4OH+ Na2SO4 NH4OH se transforma espontaneamente em NH3. 2NH4OH ∆ → 2NH3 + 2H2O NH3 é condensada sobre H3BO3 (ácido bórico), dando origem a NH4H2BO3 (borato ácido de amônio) 2NH3 + 2H3BO3 → NH4H2BO3 2.3 TITULAÇÃO O NH4H2BO3 é titulado com HCl, produzindo NH4Cl (cloreto de amônio) e H3BO3 (ácido bórico). NH4H2BO3 + HCl → NH4Cl + H3BO3 3. MATERIAIS Tubos de digestão Bloco digestor Aparelho de Kjeldahl Balança Papel Manteiga Erlenmeyer de 250mL Reagente → K2SO4 → CuSO4 → H2SO4 P.A. → Solução HCl 0,02N → Solução de NaOH 50% → Solução saturada de H3BO3 → Verde de bromocresol → Vermelho de metila TOMADA DE ENSAIO: 100mg M.S.D. 4. CÁLCULO %N = (V × N × 14 × 100) T. E. N = normalidade da solução de HCl = 0,02N. V = volume gasto de HCl na titulação T.E. = amostra pesada em mg, normalmente 100mg. %Proteína = %N × 6,25 Fator 6,25 = considera-se que toda proteína tem 16% de nitrogênio. → Transformação para matéria seca (adicionar gordura) g proteína M.S.D _______ 100g M.S.D. x _______ g de M.S.D (100 – E.E.) → Transformação para matéria integral (adicionar água) g proteína M.S. ________ 100g M.S. x ________ g de M.S. (100 – U) FIBRA BRUTA Resíduo da digestão ácida Componentes da P.C. dos vegetais que não são digeridas pelo organismo (celulose, pectina) Papel importante no estímulo de movimentos do intestino, determina velocidade de passagem do bolo alimentar. 1. TIPOS SOLÚVEIS INSOLÚVEIS Formada por pectina, gomas e mucilagens. Dissolve em água Presente no farelo dos cereais. Formada por celulose, hemicelulose e lignina. Não digere ao passar pelo aparelho digestivo 2. FUNÇÕES Controla níveis de glicose no sangue Reduz níveis de colesterol Melhora função intestinal 3. MÉTODO WEENDE Determina fração de celulose e lignina insolúveis em ácido. Simula in vitro a digestão que ocorre in vivo. Método gravimétrico (diferença de peso). 4. MATERIAL Cadinhos de fundo poroso Lã de vidro Tubo para digestão Bloco digestor Balança analítica Estufa à 105°C Dessecador Reagentes → 17mL de ácido acético 70% → 0,5g de ácido tricloroacético → 1,2mL de ácido nítrico TOMADA DE ENSAIO: 0,5g M.S.D. 5. CÁLCULO %FB = (cadinho + fibra) − tara do cadinho tomada de ensaio × 100 FB = Fibra bruta Tomada de ensaio = 0,5g M.S.D. → Transformação para matéria seca (adicionar gordura) g fibra M.S.D _______ 100g M.S.D. x _______ g de M.S.D (100 – E.E.) → Transformação para matéria integral (adicionar água) g fibra M.S. ________ 100g M.S. x ________ g de M.S. (100 – U) CINZAS Resíduo mineral fixo Fração inorgânica ou mineral Resíduo obtido através da incineração à 550- 570°C. São brancas ou acinzentadas Significado nutricional quase nulo. Não nos informa QUAIS minerais presentes. Cuidados especiais em alguns alimentos → Ricos em fósforo: após carbonização, forma- se uma massa quase vítrea que envolve o carvão. Deve-se desintegrar o bloco formado adicionando, no material frio, uma gota de água destilada ou ácido nítrico. → Muito gordurosos: utilizar a amostra seca e desengordurada. Caso contrário, fazer ignição lentamente devido a formação de espuma (= calor hidrolisa as gorduras/ácidos graxos que formam sabão). 1. MATERIAL Forno mufla regulado entre 500 e 550°C Cadinhos de porcelana de fundo íntegro Bico de Bunsen Dessecador Balança analítica ou semi analítica TOMADA DE ENSAIO: 2g M.S.D 2. CÁLCULO %C = (cadinho + cinza) − tara do cadinho tomada de ensaio × 100 C = cinzas Tomada de ensaio = 2g M.S.D. → Transformação para matéria seca (adicionar gordura) g cinzas M.S.D _______ 100g M.S.D. x _______ g de M.S.D (100 – E.E.) → Transformação para matéria integral (adicionar água) g cinzas M.S. ________ 100g M.S. x ________ g de M.S. (100 – U) FRAÇÃO GLICÍDICA Extrato não nitrogenado Porção carboidrática do alimento passível de ser digerida e utilizada como fonte de energia. Fonte de energia mais disponível prontamente dos alimentos → Amido: cereais e farinhas; → Açucares: frutos; → Lactose: leite. 1. CÁLCULO %FG = 100 − (U + EE + proteina + fibra + cinza) Dados com base na matéria integral. AÇÚCARES TOTAIS 1. ANÁLISES COLORIMÉTRICAS Identificação de componentes da solução através de espectrofotometria Quando feixe de luz monocromática atravessa uma solução, parte da luz é absorvida pela solução e o restante é transmitido. 2. MÉTODO DE ANTRONA Método para hexoses Baseado na reação hidrolítica e desidratante do H2SO4 sobre os carboidratos. 2.1 ANTRONA (C4H100) Produto da redução da antroquinona Reage com H2SO4, produzindo cor azul- esverdeado, lida no espectro a 620nm. Cor atribuída a reação do furfural com antrona. 2.2 MATERIAL Balão volumétrico Bureta Banho fervente Banho de gelo Espectrofotometro Reagentes → Solução de Antrona (2g/1L de H2SO4) → Solução padrão de glicose (100mg/1L) Diluições: feitas para verificar se leituras estão dentro do intervalo de absorbância encontrado na curva-padrão. 3. CÁLCULOS 3.1 TOMADA DE ENSAIO g ou mL amostra _____ mL balão 1 x ______ alíquota retirada 1 mL alíquota encontrado _______ mL balão 2 x _______ alíquota 2 3.2 CÁLCULO DO KM Km = ∑[glicose] ∑ absorbância 3.3 TEOR DE GLICOSE PELO KM %glicose = Km × absorbância OBS: absorbância dada pelo exercício 3.4 TEOR DE GLICOSE PELA EQUAÇÃO y = 0,016x + 5 Substituir y pela absorbância, x é a glicose. CONVERTENDO PARA g/100mL valor µg ______ tomada de ensaio x ______ 100mL Dividir valor encontrado por 1 000 000.
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