MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA - aula 2_

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD
	
AULA ____
	
	
	DATA:
______/______/______
VERSÃO:01
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA – aula 2
DADOS DO(A) ALUNO(A):
	NOME: Caetano Alves da Silva
	MATRÍCULA: 01314157
	CURSO: Farmácia
	POLO: Caruaru
	PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Mariane Mendes
	ORIENTAÇÕES GERAIS: 
· O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e
· concisa;
· O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema;
· Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado);
· Tamanho: 12;
Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm;
· Espaçamento entre linhas: simples;
· Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). 
 
	TEMA DE AULA: CONTAGEM DE LEVEDURAS POR DILUIÇÃO SERIADA
RELATÓRIO:
1. Definir o método de contagem de leveduras em placa por diluição seriada; 
Vimos na aula apresentada pela professora Mariane que o método utilizado nessa prática foi o Método de contagem em placa. O método consiste em fazer uma diluição seriada e plaquear uma alíquota de cada diluição pelo método de espalhamento em placa. O limite de crescimento microbiológico é de 30 a 300 colônias por placa. Para se ter um resultado fidedigno, é necessário esterilizar os materiais a ser utilizados nessa técnica.
A manipulação foi feita por trás da chama do bico de bunsen, de forma a garantir o 
estabelecimento de uma zona de esterilidade. É somente nesta zona estéril que os tubos ou recipientes com meios de cultura estéreis e o material a ser inoculado, foram ser abertos ou manipulados, para ser preservada a sua esterilidade.A boca dos tubos de ensaio foi flambada imediatamente após a retirada da tampa (ou tampão de algodão).
2. Calcular a UFC/g ou mL da amostra estudada.
Inicialmente preparamos uma diluição seriada na razão 1/10 da amostra em análise. Como diluente utilizado Água Peptonada Tamponada 0,1%.
• Homogeneizar por agitação a amostra em análise; • Transferir, com auxilio de um micropipetador/ponteira estéril, um volume de 1 mL (1.000 microlitros) para um tubo com 225 mL de Água Peptonada Tamponada identificado com: 10-1 ; • Homogeneizar por agitação o conteúdo do tubo da diluição 10-1 ; • Transferir, com auxílio de um micropipetador/ponteira estéril, um volume de 1 mL (1.000 microlitros) para um tubo com 9 mL de Água Peptonada Tamponada identificado com: 10-2 ; • Homogeneizar por agitação o conteúdo do tubo da diluição 10-2 ; • Transferir, com auxílio de um micropipetador/ponteira estéril, um volume de 1 mL (1.000 microlitros) para um tubo com 9 mL de Água Peptonada Tamponada identificado com: 10-3 ; • Homogeneizar por agitação o conteúdo do tubo da diluição 10-3 ;
Com os seguintes resultados , após serem feitos os cálculos :
UFC/g = Número de colônias X Diluição (positiva)
 ____________________________________
 Alíquota semeada
Amostra = 101 -----------100 μl ou 01,ml (27 colônias )
Amostra = 102-------------100 μl ou 0,1ml ( 24 colônias )
Amostra =103--------------100 μl ou 0,1ml (7 colônias )
	TEMA DE AULA: COLORAÇÃO DE GRAM
RELATÓRIO:
1. Definir o fundamento da coloração de Gram;
É chamado de coloração de Gram o método de coloração utilizado para diferenciar espécies bacterianas em dois grupos, bactérias gram-positivas e gram-negativas. Entre os fatores que irão diferenciar gram-positivos de gram-negativos, está a coloração das bactérias, a composição e propriedades químicas e físicas das paredes celulares.Outro método de diferenciação é a detecção de quantidade de peptídeoglicano nas bactérias gram-positivas e nas bactérias gram-negativas. As bactérias gram-positivas serão azul violeta, enquanto as gram-negativas serão vermelhas. A estrutura que as bactérias irão apresentar é outro aspecto que pode ser levado em consideração para diferenciar as bactérias gram-positivas das gram-negativas. O método de coloração de Gram é considerado um dos mais importantes dentro dos laboratórios de análises clínicas e microbiologia.
2. Visualizar a morfologia e classificar as bactérias nas lâminas de acordo com o seu comportamento diante dos corantes de Gram. 
O procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com base nas diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular. De fato, o uso dos corantes permite aumentar o contraste e evidenciar a estrutura bacteriana. A coloração envolve 3 etapas principais:
· Coloração com violeta de cristal (um corante solúvel em água, roxo);
· A descoloração (utilizando etanol / acetona);
· A contra-coloração (utilizando corante Safranina, vermelho).
As bactérias Gram-positivas retêm o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa.Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptideoglicano mais fina  que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final.
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