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Enterobactérias Monitoria de Microbiologia Clínica - UFPE Compõem a microbiota intestinal; São fermentadores de carboidratos; Anaeróbios facultativos; CARACTERÍSTICAS GERAIS CARACTERÍSTICAS GERAIS Bacilos gram negativos; Possuem motilidade variável; Citocromo-oxidase negativo para enterobactérias; Catalase positiva; IDENTIFICAÇÃO DE ESPÉCIES DE ENTEROBACTÉRIAS Amostras clínicas : Fezes Swabs (UTI semi-intensiva/UTI) Ágar MacConkey Meio seletivo para Enterobactérias é composto por lactose, sais biliares e cristal violeta. Ágar TSI (Tríplice Ferro/ Tríplice Sugar Iron) Meio composto por três açúcares: lactose, sacarose e glicose; Possui indicador de pH vermelho de fenol; Por convenção a leitura da prova é realizada do ápice para a base. Considerem o K para Alcalino e o A para Ácido Ágar Sulfeto de Hidrogênio, Indol e Motilidade Meio semi-sólido que permite avaliar se a bactéria sintetiza a enzima triptofanase; Verifica a produção de sulfeto de hidrogênio (meio fica com coloração enegrecida) e a motilidade (turbidez. Ágar Citrato Meio utilizado para identificação de bactérias que utilizam o citrato como única fonte de carbono. Ágar Uréia Avalia se a bactéria é produtora da enzima urease. Ágar Fenilalanina Meio utilizado para diferenciação de bacilos entéricos quanto à capacidade de produzir ácido fenilpirúvico a partir da desaminação da fenilalanina por ação enzimática. Àgar LIA (Lysine Iron Agar) É composto por lisina e ferro. Se ocorrer atividade da enzima lisina descarboxilase o pH aumentará, devido a transformação da lisina em uma amina primária: a cadaverina, voltando o meio a ficar roxo MIO (Motilidade, Indol, Ornitina) Se a enzima ornitina descarboxilase é degradada, vai formar a putrecina que possui odor fétido Alguma dúvida (?) Enterobactérias clinicamente importantes: Escherichia; Klebsiella; Salmonella; Serratia; Shigella; Citrobacter; Enterobacter; Yersinia; Morganella; Proteus. CLASSIFICAÇÃO ANTIGÊNICA Antígeno O: componente mais externo do lipopolissacarídeo (LPS) das bactérias gram negativas. Antígeno K: “kápsula” cobre o antígeno O. Antígeno H: compõe as subunidades do flagelo bacteriano, APENAS BACTÉRIAS MÓVEIS terão esse antígeno. (Salmonella) Escherichia coli Características gerais É um bacilo gram negativo móvel, normalmente reside no cólon sem causar doença, só começa a ser patogênica a partir do momento que adquire fatores de virulência. Escherichia coli não patogênica (microbiota normal) + Fatores de virulência = DOENÇA Doenças causadas por E. coli na presença de fatores de virulência: Diarréia. ITU; Meningite neonatal; Sépsis por Gram- Fatores de virulência 1- Interação com a mucosa: a) Aderência à mucosa por pili (fator de colonização); b) Habilidade de invadir as células epiteliais intestinais. 2- Produção de Endotoxina: a) Toxina termolábil e estável (LT e ST); b) Toxina semelhante à Shiga. 3- Endotoxina: Porção de lipídeo A e do lipopolissacarideo (LPS) 4- Sideróforo quelante de ferro: Obtém ferro da transferrina ou lactoferrinas humanas. 1. Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) Tem pili; Possui 2 toxinas: Toxina termolábel (LT) e Toxina termoestável (ST); As fezes parecem água de arroz. Fatores de virulência: Adesinas Penetração V.O > barreira gástrica > Fator de colonização-ENTEROTOXINAS > Diarréia Causa diarréia dos viajantes e infantil 2. Escherichia coli entero- hemorrágica (EHEC) ou (STEC) Produzem toxina de Shiga (ou verotoxina); Inibem a síntese proteica pela inibição do ribossomo 60S, resultando em morte de células epiteliais do intestino; Sobrevivem a acidez do estômago Diarréia sanguinolenta Fatores de virulência Baixa carga infectante Toxina de Shiga Sistema de secreção do tipo III Intimina Enteroemolisina EAST 3. Escherichia coli enteroinvasiva (EIEC) Invasão tecidual; Disenteria; Sorotipos móveis ou imóveis; EIEC autoendocitose > migração entre enterócitos (evasão) > lesão > disenteria com sangue e muco 4. Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) Fatores de virulência: Fímbrias BFP; Intimina; Aparelho de secreção tipo III Não produz toxina mas muda a conformação intestinal 5. Escherichia coli enteroagregativa (EAEC): Fatores de virulência: EAST; Adesinas; Hemolisina; Pic (Proteína envolvida na colonização); Dispersina Causa diarréia persistente 6. Escherichia coli extraintestinal (EXPEC) Fatores de virulência: Fímbria tipo 1 Fímbria P São uropatogênicas MNEC - são causadoras de meningite- principalmente em RN Klebsiella sp. Informações gerais São encapsuladas (Antígeno K); Causam sépsis, ITU. Proteus sp. e Morganela sp. Proteus são patógenos apenas quando deixam o trato intestinal. Produção de UREASE - formam amônia e alcalinizam a urina. Sugere-se participação na formação dos cálculos urinários. Quem somos nós (?) E.coli Klebsiella Enterobacter Salmonella Shigella Quem somos nós (?) E. coli Klebsiella Enterobacter Salmonella Shigella Proteus Shigella em Ágar MacConkey Shigella em ágar entérico de Hektoen
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