PLATAFORMAS MOLECULARES simulado

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1. 
 
 
Define-se genoma como o conjunto de todo o 
material genético de uma espécie, que, na maioria 
dos casos, são as moléculas de DNA. Durante muito 
tempo, especulou-se sobre a possível relação entre o 
tamanho do genoma ¿ medido pelo número de pares 
de bases (pb) ¿, o número de proteínas produzidas e 
a complexidade do organismo. As primeiras 
respostas começam a aparecer e já deixam claro que 
essa relação não existe, como mostra a tabela 
abaixo. 
 
 
 
o conjunto de genes de um organismo define o seu DNA. 
 
 
a produção de proteínas não está vinculada à molécula de DNA. 
 
 
genomas com mais de um bilhão de pares de bases são encontrados 
apenas nos seres vertebrados. 
 
 
quanto mais complexo o organismo, maior o tamanho de seu 
genoma. 
 
 
o tamanho do genoma não é diretamente proporcional ao número 
de proteínas produzidas pelo organismo. 
 
 
 
Explicação: 
Não existe relação direta entre o tamanho do genoma e quantidade de proteína, uma vez que um 
organismo pode apresentar um longo genoma e poucas proteínas codificadas (ex: Rattus novergicus) 
devido a grande quantidade de sequencias de DNA que não são genes. 
 
 
 
 
2. 
 
 
Com relação às proteínas regulatórias é correto afirmar que: 
 
 
 
incluem ativadores transcricionais que se ligam em sítios ativadores 
quando combinados com uma molécula indutora não protéica. 
 
 
excluem as proteínas repressoras. 
 
 
atuam para substituir a RNA polimerase na ativação da expressão 
gênica. 
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apenas se ligam aos sítios regulatórios de um promotor quando 
combinados com moléculas indutoras de origem proteica. 
 
 
sempre se ligam aos sítios regulatórios de um promotor para ativar 
ou reprimir diretamente a tradução de um gene ou óperon. 
 
 
 
Explicação: 
O mecanismo de expressão gênica pode necessitar de moléculas ativadores 
que se ligam aos sítios ativadores dos genes, permitindo assim sua 
transcrição. 
 
 
 
 
3. 
 
 
(IDECAN, 2016) Sobre os dois tipos de cromatina, um dos componentes 
encontrados no núcleo, analise as afirmativas a seguir. 
I. A eucromatina é elétron‐densa, aparece como grânulos grosseiros e é 
bem visível no microscópio óptico. 
II. A heterocromatina é inativa porque nela a hélice dupla de DNA está 
muito compactada, o que impede a transcrição dos genes. 
III. A heterocromatina aparece granulosa e clara entre os grumos de 
eucromatina. 
IV. Na eucromatina, o filamento de DNA não está condensado e tem 
condições de transcrever genes. 
A eucromatina significa cromatina ativa, sendo mais abundante nas células 
que estão produzindo muitas proteínas. Estão corretas apenas as 
afirmativas: 
 
 
I e II 
 
 
I, II e IV. 
 
 
II, IV e V. 
 
 
I, III e V. 
 
 
II, III e IV. 
 
 
 
Explicação: 
A heterocromática é conhecida como a cromatina densa, pois ela apresenta-se de forma densa e 
granulosa e desta forma encontra-se inativa, não permitindo a transcrição dos genes. Já a eucromatina é 
conhecida como frouxa e desta forma os seus genes não estão condensados sendo acessíveis a 
transcrição. 
 
 
 
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4. 
 
 
(2013 - VUNESP) Análise a figura. 
 
 
Pode-se afirmar corretamente que a figura representa 
o mecanismo de 
 
 
metilação do DNA. 
 
 
translocação cromossômica. 
 
 
recombinação homóloga. 
 
 
tradução. 
 
 
splicing alternativo. 
 
 
 
Explicação: 
O splicing alternativo é um mecanismo de regulação gênica pós 
transcricional em que durante o splicing os genes podem ser ¿emendados¿ 
de maneiras diferentes codificando diferentes produtos. 
 
 
ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS 
 
 
5. 
 
 
Qual das características a seguir é correta em relação à enzima DNA polimerase usada durante a reação 
de PCR? 
 
 
Capacidade de degradar cadeias de oligonucleotídeos 
 
 
Aceitação apenas de nucleotídeos difosfatos 
 
 
Resistência ao calor 
 
 
Baixa fidelidade 
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Desnaturação a 37 ºC 
 
 
 
Explicação: 
Assim como a replicação de DNA em um organismo, a PCR requer uma enzima DNA polimerase que faça 
novas fitas de DNA usando as existentes como moldes. A DNA polimerase tipicamente usada na PCR é 
chamada de Taq polimerase, em homenagem à bactéria resistente ao calor da qual ela foi isolada 
(Thermus aquaticus). 
T. aquaticus vive em fontes termais e de água quente. Sua DNA polimerase é bastante estável ao calor e 
é mais ativa à 70 °C (temperatura em que as DNA polimerases humanas ou de E. coli seriam 
disfuncionais). Essa estabilidade ao calor torna a Taq polimerase ideal para PCRs. Como estudado, a alta 
temperatura é usada repetidamente na PCR para desnaturar o DNA molde, isto é, separar suas fitas. 
 
 
 
 
6. 
 
 
Gabriela irá realizar a técnica de eletroforese para avaliar qualitativamente 
e quantitativa o RNA extraído de células bucais que será utilizado no seu 
projeto de mestrado. Porém, Gabriela tem dúvidas quanto ao princípio e 
aplicação das técnicas. Marque a alternativa da melhor explicação que você 
daria a Gabriela. 
 
 
A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz 
absorvida com a quantidade da substância na amostra. 
 
 
A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar 
moléculas de acordo com carga e peso molecular 
 
 
A eletroforese é uma técnica que utiliza corantes fluorescente como 
iodina para detectar e quantificar substâncias. 
 
 
A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar 
moléculas de acordo com o peso molecular e afinidade. 
 
 
A eletroforese é uma técnica ótica que associa a quantidade de luz 
transmitida com a quantidade da substância na amostra. 
 
 
 
Explicação: 
A eletroforese é técnica que utiliza campo elétrico para separar moléculas 
de acordo com carga e peso molecular 
 
 
AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 
 
 
7. 
 
 
(UFU, 2018 adaptada) A reação em cadeia de polimerase (PCR) é utilizada 
para a amplificação de DNA. Em relação à técnica de PCR, assinale a 
alternativa correta. 
 
 
Na etapa de anelamento, ocorre a desnaturação da dupla fita de 
DNA. 
 
 
A etapa de amplificação envolve a ação da DNA ligase 
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Ocorre a formação de fragmentos de Okasaki 
 
 
Os primers são estruturas à base de RNA. 
 
 
Mg+2 é um cofator necessário para a atividade da DNA polimerase. 
 
 
 
Explicação: 
A DNA polimerase é uma enzima que depende do cofator Magnésio para ter ação catalítica. 
 
 
 
 
8. 
 
 
(UPENET/IAUPE, 2017) Para se fazer uma reação em cadeia de polimerase 
(PCR), o gene de interesse precisa ter sido clonado e amplificado em 
bactérias, pois é necessário conhecer os primers, que serão utilizados na 
amplificação do DNA in vitro. O seu laboratório utiliza a PCR convencional e 
a em tempo real para estudar a carga amostral de vírus do tabaco. No 
entanto, você precisa validar os primers mediante PCR convencional. No seu 
primeiro experimento, houve contaminação do controle negativoe o 
aparecimento de bandas inespecíficas. No segundo experimento, você 
obteve sucesso, ao aumentar a temperatura de melting e controlar o uso de 
reagentes. Agora a PCR em tempo real poderá ser utilizada, reduzindo o 
tempo de investigação. 
Sobre isso, analise as proposições a seguir: 
I. A sequência e a concentração adequada do iniciador são primordiais para 
a especificidade e eficiência da PCR, se ele for mal concebido poderá resultar 
em pouco ou nenhum produto, por causa de amplificação inespecífica, bem 
como a formação de dímeros de iniciadores. 
II. Na PCR convencional, pode ocorrer contaminação por transferência de 
reagentes, dispositivos de pipetagem, superfícies de laboratório, material 
biológico dos próprios pesquisadores, ocasionando resultados falsos. 
III. A temperatura de melting (Tm) de uma molécula de DNA, na qual 
metade das moléculas é de cadeia simples e a outra de cadeia dupla, 
independe do seu tamanho, porém depende da composição de nucleotídeos, 
visto que produtos amplificados ricos em guanina e citosina precisam de 
menor Tm, visto terem apenas duas pontes de hidrogênio e, por isso, é mais 
fácil haver desnaturação e renaturação. 
IV. A PCR em tempo real permite a amplificação, detecção e quantificação 
do DNA em duas etapas, minimiza o risco de contaminação, contudo confere 
menor precisão e reprodutibilidade, quando comparada à PCR convencional. 
Estão CORRETAS, apenas: 
 
 
I e II. 
 
 
II, III e IV. 
 
 
I, III e IV. 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp?num_seq_aluno_turma=147573001&cod_hist_prova=220303118&num_seq_turma=3736159&cod_disc=SDE4579
 
 
II e III. 
 
 
III e IV. 
 
 
 
Explicação: 
A especificidade da PCR convencional depende diretamente dos primers 
utilizados e a contaminação pode ocorrer por pequenos descuidos de 
pipetagem e contaminação com contato superfície contaminada com 
amplicons ou amostra biológica. 
 
 
SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 
 
 
9. 
 
 
Juliana, é biomédica e ingressou no mestrado para trabalhar com biologia 
molecular. Seu projeto engloba a identificação de sequências específicas do 
genoma bacteriano correlacionado com mecanismos de virulência. Para 
detectar estas sequências ela deve recorrer a técnicas moleculares de 
hibridização. Que técnica que você sugeriria para ela? 
 
 
PCR 
 
 
Southern Blotting 
 
 
Clonagem molecular 
 
 
Nothern Blotting 
 
 
Western Blotting 
 
 
 
Explicação: 
Southern Blotting é uma técnica molecular que serve para verificar se uma 
determinada sequência de DNA está ou não presente em uma amostra 
analisada. 
 
 
 
 
10. 
 
 
(IADES - 2016) Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a 
alternativa correta. 
 
 
Os métodos de sequenciamento têm base na produção de 
fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em 
um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos 
nas respectivas extremidades. 
 
 
Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à 
eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada 
um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com 
um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio_ensineme.asp?num_seq_aluno_turma=147573001&cod_hist_prova=220303118&num_seq_turma=3736159&cod_disc=SDE4579
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Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente 
modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila 
(3¿-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA 
polimerase. 
 
 
O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela 
não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e 
ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. 
 
 
Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na 
extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA 
polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar. 
 
 
 
Explicação: 
No método de Sanger, a adição de ddNTPs a cadeia em formação leva a 
interrupção da síntese de DNA gerando fragmentos de tamanhos diversos