Diagnóstico e História Natural do HIV

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DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL - HIV 
HIV - RETROVIRIDAE - retrovirus (VÍRUS RNA)
ANTÍGENOS: HIV1 E HV2
MATERIAL GENÉTICO: 2 FITAS DE RNA, POLARIDADE POSITIVA (+ssRNA)
* HIV-1 É O TIPO MAIS VIRULENTO E MAIS DISSEMINADO PELO MUNDO;
Modo de transmissão: sexual, sanguínea, vertical, ocupacional (perfuro-
cortante); seus fatores de risco são: alta viremia (durante a fase de infecção 
primaria e na imunodeficiência avançada), anal receptiva, relação sexual 
durante a menstruação, presença de outra IST (sífilis e herpes genital 
aumentam o risco da transmissão do HIV).
FLUIDOS CORPÓREOS: sangue, semen, fluido vaginal líquido amniótico e 
saliva.
GENOMA DO HIV: 
- PROTEÍNAS DO CAPSÍDEO: P17 E P24
- PROTEÍNAS DO ENVELOPE: GP120 E GP41
Partícula viral do HIV: 
• ENVELOPE VIRAL: facilmente degradada com álcool e detergente; virus 
mais sensíveis ao ambiente; formado por bicamada lipídica;
• GLICOPROTEINAS: primeiro reconhecimento GP120 - mergulhada na 
bicamada lipídica; exposta no reconhecimento de receptor - GP41; 
numero por conta do peso molecular nas proteínas (segundo 
reconhecimento);
• CAPSÍDEO: nao possui cápsula; formado por proteínas P17;
• NÚCLEO CAPSÍDEO: interior do capsídeo; formado pela proteína P24 - 
matriz;
• INTERIOR DA P24: copias de RNA do HIV - 2 copias que não são iguais 
necessariamente; esse RNA precisa ser prescrito por ser polaridade 
positiva;
• ENZIMAS: Transcriptase reversa, protease e integrase;
- Transcriptase reversa: possui atividade de DNA polimerase dependente 
de RNA;
- Integrase: participa do processo de integração do genoma do virus ao 
genoma da célula alvo.
- Protease: clivagem de proteínas para montagem viral.
- GP120: Glicoproteína do HIV que ira reconhecer o receptor CD4;
- Células que expressam CD4: linfócitos TCD4 (THELPER, auxiliar), 
macrofagos, células dendríticas, monócitos, astrocitos;
- Segundo reconhecimento GP41: reconhecer os coreceptores - CCR5 e 
CXCR4;
- CCR5 - macrofagos e células dendriticas; MTROPICO
- CXCR4 - TCD4; TTROPICO
- HIV que tem preferência pelo CCR5 - M-trópico; passando a ter afinidade 
pelo CXCR4 - T-tropicos;
- Mais danoso ao sistema imunológico: T-tropico infectado por CXCR4; 
Pois tem acesso aos linfócitos que geram resposta;
 
RESUMINDO: TROPISMO CELULAR 
- Receptor -> glicoproteína CD4 celular
Primeiro reconhecimento - gp120 do HIV; linfócitos auxiliares TCD4 (virgem 
ou de memória), monocitos, macrofagos, celulas dendriticas, celulas da 
micróglia, astrocitos.
- Correceptores celulares (receptores de quimiocinas)
Segundo reconhecimento - gp41 do HIV
CCR5 ou CXCR4
Etapas da replicação: 
1- ADSORÇÃO
2- PENETRAÇÃO
3- DESNUDAMENTO (PERDA DO CAPSÍDEO VIRAL) 3- TRANSCRIPTASE 
REVERSA
4- TRANSPORTE DO DNA VIRAL PARA O NÚCLEO 4-INTEGRAÇÃO DO 
DNA VIRAL NO CROMOSSOMO CELULAR (PROVÍRUS)
5- TRANSCRIÇÃO
6- TRADUÇÃO (SÍNTESE DAS PROTEÍNAS VIRAIS)
7- MONTAGEM DE PARTÍCULAS VIRAIS E LIBERAÇÃO VIRAL POR 
BROTAMENTO
História Natural do HIV: 
• FASE AGUDA: 10 dias de infecção detecta RNA VIRAL; é a fase 
assintomática ou sub clinica: febre, calafrio, diarreia, artralgia, mialgia, mal 
estar, letargia, anorexia, nausea, faringite, eritema, leucopenia, monocitose 
relativa e trombocitopenia;
- IgM produzida em 22 dias pós infecção;
- IgG produzida após um mês;
- Eclipse viral -> 10 dias; detenção de RNA;
- Resposta celular citotóxica; linfócitos com discreta queda;
- Resposta humoral: 22 dias - detecta IgM;
- Com 30 dias: detecta IgG;
• FASE CRÔNICA OU LATENTE: portador assintomático; perda gradativa 
de LT CD4; duração +/- 10 anos;
- Resposta humoral: detecta IgG;
- Aumento da carga viral havendo diminuição dos linfócitos TCD4;
- Há virus em todos os órgãos linfoides primários e secundarios;
RNA - primeiro marcador a ser detectado; decectando de 7 - 10 dias 
(PERÍODO DE JANELA); TESTE MOLECULAR
P24 - segundo marcador; proteína p24 que forma a estrutura que envolve 
material genético; sendo detectado entre 15 - 17 dias (2 a 3 semanas); antes 
da soroconversao; TESTE SOROLÓGICO 
IgM - inicio da resposta humoral; anticorpo IgM detectado 22 dias após a 
infecção; TESTE SOROLÓGICO 
IgG - detectado após 1 mes (30 dias); TESTE SOROLÓGICO
• AIDS: infecção sintomática (desenvolvimento da AIDS); infecções 
oportunistas - LT CD4; candidíase oral e esofágica, criptococose, 
toxoplasmose e herpes zoster;
- LTCD4 diminuído a partir de 350celmm3 - por conta das infecções 
oportunistas;
- Aumento considerável de carga viral;
Diagnóstico laboratorial pensando em HIV: IMPORTANTE 
1. O que deve ser pesquisado para saber se há infecção? 
Antígenos: material genético (RNA viral) e proteína viral (p24).
Anticorpos contra o antígeno de estresse: IgM e igG.
2. Onde pesquisar? 
Sangue (pesquisa de antígenos e anticorpo), saliva (pesquisa de anticorpos - 
IgG).
SANGUE - RNA, P24, IgM e IgG
SALIVA - IgG
3. Como monitorar o curso da infecção? 
Para monitorar: carga viral - quantificar RNA e TCD4 e TCD8.
Imunoensaios:
- Testes rápidos (fluido oral ou sangue);
- Sorologias;
- ELISA;
- Western/imunoblot (detecta anticorpos)
- Contagem de celular LTCD4 - citometria de fluxo 
- Contagem de copias virais circulantes - PCR quantitativo 
RNA - TESTE MOLECULAR
ANTÍGENOS E ANTICORPOS - IMUNOENSAIOS - TESTE SOROLÓGICO 
Diagnóstico rápido: 
• Teste rápido: fácil execução; teste de primeiro momento - mais sensível; 
presencial; amostra: saliva, sangue, soro e plasma;
• Fluido oral ou sangue;
• Teste que permite uma resposta de uma janela de 1-3 meses;
• Marcador pesquisado: IgG;
• Usa-se em situações em que o diagnóstico é essencial para a conduta 
imediata (parturientes, acidentes ocupacionais e multidões);
• >99,5 sensibilidade; >99,0 especificidade;
• Análise de resultados: analise QUALITATIVA - teste qualitativo.
ELISA: ENSYME LINKED IMMUNO SORBENT ASSAY 
- Imunoensaio marcado;
- Mais sensível; análise QUALITATIVA.
- Teste padrão ouro;
- Permite a detecção de anticorpos e antígenos específicos no soro e 
plasma sanguíneo;
- Ensaio imuno enzimático;
- Dois tipos de ELISA: direito e indireto;
- ELISA -> DIREITO -> pesquisa Antígenos (antígenos do capsídeo p24) 
- ELISA -> INDIRETO -> pesquisa Anticorpos (IgM e IgG contra 
proteínas do virus); 
- Terceira geração - Indireto IgM e IgG - JANELA IMUNOLÓGICA 20 - 30 
DIAS; com esse tipo de Elisa, reduz a janela. Muda de cor - pois no 
relevador há enzima peroxidase que degrada água oxigenada. Pesquisa 
anticorpo reduzindo o tempo de janela imunológica.
- Quarta geração: ELISA (melhor utilizado); indireto IgM IgG e direto Ag p24; 
janela imunológica - 15 dias; reduz mais ainda o tempo de janela;
Western Blot / Imunoblot: 
- Ensaio imunoenzimático (marcado);
- Teste para fechar diagnóstico - aumenta a especificidade 
- Proteínas (virais) sao separadas por diferença de peso molecular e 
transferidas para membranas de nitrocelulose / PVDF;
- É a técnica empregada na confirmação de testes positivos de ALTA 
ESPECIFIDADE.
- Amostra: soro do paciente para detectar anticorpos (IgG);
Contagem CD4/CD8: citometria de fluxo 
- Feito quando sabe que a pessoa tem HIV; pesquisando a quantidade de 
CD4;
- Função: monitorar a eficácia do tratamento antiretroviral;
- Metodologia: Citometria de Fluxo;
- Imunofluorescencia 
- Imunoensaio marcado - técnica que permite a detecção de antígenos em 
celulas beads ou anticorpos do sangue, a partir de uma marcação com 
anticorpos conjugados a uma molécula fluorescente (flurocromos).
Contagem de copias virais circundantes - PCR em tempo real: 
- Contagem de quantas copias de material genético possui;
- Expresso em números de copia de RNA de HIV
- PCR quantitativo;
- QPCR - Diagnóstico molecular para HIV em Banco de Sangue;
RESUMO:
- Receptores celular que se ligam as glicoproteinas gp120 e gp140 do HIV 
sao CD4 e CCR5 ou CXCR4;
- Segundo o Protocolo Clínico e Diretrizes Terapêuticas para Manejo da 
Infecção pelo HIV em Adultos (PCDT 2013), a Genotipagemdo HIV é 
indicada nas seguintes situações, com seus respectivos critérios: 
Paciente em tratamento com falha virológica.
- A contagem de linfócitos é realizada através de citometria de fluxo, 
utilizando marcadores anti CD4 e CD8.
- Teste molecular de carga viral: trata-se de um teste quantitativo, realizado 
por qPCR (real time).
- Infecção pelo HIV: virus infecta celulas os linfócitos TCD4 auxiliares (Th). 
Resposta imune citotóxica contra o vírus destrói essas celulas, 
diminuindo a imunidade do indivíduo, ocasionando o surgimento de 
infecções oportunistas.
- A Zidovudina (AZT) é um inibidor de transcriptase reversa inibem a 
reprodução do vírus em seu estágio inicial. Como essa classe de 
antirretroviral impedirá a replicação viral: Através a inibição da transcrição 
reversa (produção de DNA a partir de RNA) que ocorre no citoplasma, 
após o desnudamento (perda do capsídeo).
- Tropismo do HIV: HIV M-trópicos apresentam tropismo pelo correceptor 
CCR5, presente nos macrófagos, monócitos e células dendríticas 
presente nas mucosas.
- Os antirretrovirais (ARV) são fármacos usados para o tratamento de 
infecções por retrovírus, principalmente o HIV. A terapia altamente eficaz 
com antirretrovirais é conhecida como TARV. Atualmente, o SUS 
disponibiliza fármacos inibidores de correceptor CCR5. Como o 
medicamento inibirá a replicação viral? Através da inibição do 
reconhecimento do correceptor CCR5 pela proteína viral gp41, impedindo a 
penetração do HIV na célula, por mecanismo de fusão.