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Universidade Federal de Santa Catarina Centro de Ciências Agrárias Dpto de ciência e tecnologia de alimentos Programa de pós-graduação em Ciência dos alimentos Disciplina Análise de Microestrutura de Alimentos Professora Alicia de Francisco de Casas Rhuana Donadel Formolo Marco Toledo Fernandes Dominici Florianópolis – SC 2021 MICROSCOPIA (ÓPTICA, ELETRÔNICA E FLUORESCÊNCIA) UTILIZANDO FARINHA DE TRIGO O objetivo do trabalho é de explicar como cada microscopia (óptica, eletrônica, fluorescência) pode ser utilizada para avaliar a farinha de trigo. Farinha de Trigo Estrutura do estudo dirigido Microscopia óptica Microscopia eletrônica (MEV) Microscopia fluorescência Produto não fermentado Sujidades: Contaminação biológica (Matérias estranhas, principalmente fragmentos de insetos) Contaminação adicional: Manipulação e armazenamento Outras sujidades como ácaros, pelos e excrementos de roedores, partes estragadas, ovos e larvas, aranha, terra e etc. Farinha de trigo O objetivo do uso da microscopia óptica é investigar/observar a presença de fragmentos de insetos, pelos de roedores, sujidades e possíveis fraudes. Etapas: sujidades leves Não são considerados prejudiciais à saúde; Flutuação; Analisados estereoscópico (magnitudes de aumento de 5-50 x) Microscopia óptica papel de filtro filtração extração dispersão estereoscópio Etapas: sujidades pesadas Sedimentação; Diferença de densidade específica; Análise em estereoscópico; Microscopia óptica estereoscópico agitação decantação imersão da amostra Desenvolvimento de farinha de trigo para a obtenção de massas alimentícias Realizar análise estrutural da farinha As amostras devem estar totalmente secas (Estufa 105°C/24h). Analisar os perfis de grânulos de amido e estrutura geral das farinhas fibrosa e proteico gordurosa com magnitudes de aumento de 150x, 1500x, 1700x e 2000x. Microscopia Eletrônica Identificar a morfologia da amostra (localização e quantificação) FLUOROCROMOS Azul de Nilo → Lipídios Ácido Periódico de Schiff e Primulina → Amido Fucsina ácida → proteínas Microscopia de Fluorescência Identificação e Localização • Amido; • Lipídios; • Proteínas. PREPARO DA AMOSTRA • Homogeneizar e retirar um fragmento • embutido em 1% de agarose, • fixado em 1% glutaraldeído em 0,1 tampão de fosfato mol/l • desidratado com etanol, • seccionado (4 μm) com um microtomo tingir com fluorocromes específicos • ler no microscópio Microscopia de Fluorescência Fragmentar o material e Homogeneizar Solução 1% de agarose, 1% glutaraldeído em 0,1 tampão de fosfato Desidratação (etanol) Lâmina Microscópio óptico VILLELA, M. L. R. Pesquisa de sujidades em farinha de trigo e seus derivados entre 1987 e 2002. A importância do Controle de Qualidade na higiene e segurança alimentar, sua influência na Legislação Sanitária e promoção da Saúde. Dissertação (Mestrado) – Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde da Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2004. Referências OBRIGADO!
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