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Controle do crescimento de microrganismos: • Métodos químicos e físicos Desinfecção x antissepsia: - desinfecção: redução da carga microbiana no ambiente (álcool setenta em uma bancada, desinfecção em um ambiente) - antissepsia: redução da carga microbiana em tecido vivo (lavar as mãos) As populações bacterianas morrem em uma taxa logarítmica constante: Eixo y: log do numero de microrganismos que sobrevivem a um determinado tratamento Eixo x: tempo *curva de morte e de crescimento sempre na escala log *tempo de redução decimal: a cada 1min 90% vai sendo eliminado Desinfecção de baixo nível: Definição: um processo letal utilizando um agente que mata formas vegetativas de bactérias, alguns fungos e vírus lipídicos (HIV, HBV, HCV, coronavírus) Recomendações de desempenho: demonstre uma redução de 6 log de cada um dos seguintes organismos vegetativos: Pseudomonas auruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e representantes dos gêneros Klebsiella e Enterobacter Desinfecção de nível intermediário: Definição: processo letal utilizando um agente que mata vírus, micobacterias, fungos e bactérias vegetativas, exceto esporos bacterianos Recomendação de desempenho: demostre uma redução de 6 log de cada um dos organismos vegetativos e uma redução de 3 log de Mycobacterium (parede hidrofóbica mais difícil de ser ultrapassada) Desinfecção de alto nível: Definição: processo letal utilizando um “esterilizante” sob condições abaixo da esterilização; o processo mata todas as formas de vida microbiana, exceto esporos bacterianos em grande numero (não é esterilizante pois não elimina os esporos) Recomendação de desempenho: demonstre uma redução de 6 log de cada um dos organismos vegetativos e uma redução de 6log de Mycobacterium Esterilização: - morte – perda irreversível da capacidade de replicação - cobre todos os microrganismos Agentes químicos: - antissépticos e desinfetantes *peroxido de hidrogênio: antisséptico e desinfetante; pode chegar a nível máximo de desinfecção e dependendo da concentração pode ate ser um agente esterilizante; atua a nível de DNA – oxidando *iodoforos: antisséptico e desinfetante; nível máximo de desinfecção; atuam em nível de DNA, membrana e também de proteínas *oxido de etileno: desinfetante; ação esterilizante; atua em nível de DNA *álcool: desinfetante e antisséptico; pode usar em superfícies e em tecido vivo; atua em proteínas e em membranas (perda da estrutura da camada de fosfolipídio – lise da célula e coagulando proteínas) *hipoclorito de sódio: desinfetante (uso apenas em superfícies); atua a nível de proteínas Métodos físicos: - temperatura; radiação; filtração; liofilização; dessecação e pressão osmótica Métodos esterilizantes: - calor; radiação e filtração - aplicação: depende de vários fatores, como por exemplo a natureza do material Calor x tempo: - tempo de redução decimal: tempo necessário para que a população bacteriana seja reduzida em 10% do seu valor original ou 90 % da população eliminada ou redução de 1 log - quanto maior a temperatura menos tempo para reduzir a quantidade de microrganismos Calor x grupo microbiano: - variação temporal na redução do nº de bactérias de 3 espécies bacterianas distintas, quando aquecidas numa mesma temperatura Célula vegetativa x endósporo: - microrganismo que tem a capacidade de esporular tem um tempo de redução maior - o tempo de redução decimal do esporo é maior do que a bactéria vegetativa em si Esterilização pelo calor úmido: - aquecimento da água sob pressão -> T > 100ºC - material a ser esterilizado é colocado dentro do equipamento, é vedado e é gerado vapor de água (fonte de calor); pressão vai aumentando assim como a temperatura - ao chegar em 121º obtém-se a pressão de 15 libras/polegada2 (padrão das autoclaves) -> por 15min -> toda forma de vida é eliminada (ocorre a esterilização) *não é a pressão da autoclave que mata os microrganismos, mas a alta temperatura que pode ser atingida pelo vapor sob alta pressão -> equipamento que simula uma panela de pressão Esterilização pelo calor seco: - aplicado principalmente a instrumentos e materiais sólidos (vidrarias) - age pela oxidação de proteínas - requer uma temperatura e um tempo maior - obtido em fornos de esterilização (forno de Pausteur) *calor úmido é mais eficiente na coagulação de proteínas e eliminação de microrganismos (exemplo: mão sob vapor de água queima mais rápido que mão em um forno p pegar algo quente) -> úmido penetra mais nos tecidos Esterilização por radiação: - quando não se pode utilizar o calor, procura-se outros métodos, como a radiação - utiliza-se radiação ultravioleta - não ionizante (forma dímeros de timina) e gamma - ionizantes (forma radicais oxidantes livres) - ultravioleta: dímeros de timina bloqueiam processo replicativo – célula entra em lise; não penetrante; esteriliza o que estiver na superfície (tampa de vidro em cima bloquearia a passagem da luz UV) *existem processos de reparo que corrigem os dímeros de timina - exemplo: câmara de fluxo laminar – não penetra superfícies solidas; opacas e que observem luz; sua utilidade limita-se a desinfecção de superfícies expostas - gamma/ionizante: mais penetrante; mais rápido e eficiente; formação de radicais livres que reagem com DNA e proteína – coagulando (materiais descartáveis, placas de petri descartáveis – útil na indústria) - exemplo: tubo de raios catódicos – radiação eletromagnética com energia suficiente p/ produzir íons e radicais livres -> interagem com DNA e proteínas que são degradados -> morte celular Esterilização por filtração: - membranas filtrantes: polímeros que suportam altas tensões: acetato de celulose, nitrocelulose - retém bactérias mas não vírus Métodos não esterilizantes de controle de microrganismos: - pasteurização – temperatura elevada por tempo curto -> redução do número de bactérias mas sobra uma qt pequena (não suficiente para deteriorar o alimento) – laticínios – UHT (ultra alta temperatura) - refrigeração – não mata bactéria mas ela não desenvolve (temperatura de geladeira – conserva alimento por mais tempo) - congelamento – atividade metabólica *refrigeração e congelamento não matam bactérias, apenas inibem - liofilização (congelamento com nitrogênio liquido – evaporação p/ eliminar água e sobra o que não for água – se não tem água não tem atividade metabólica – mas contém microrganismos ainda - dessecação – desidrata alimento – reduz atividade metabólica - pressão osmótica – aumenta a concentração de sal extracelular – bactéria libera a agua e atividade metabólica é cessada (carne temperada na geladeira estraga mais devagar do que sem temperar) Características microbiológicas x controle microbiano: - mais resistentes aos menos resistentes: príons, endósporos, mycobacterias, cistos de protozoário, protozoários na forma vegetativa, bactérias gram negativas, fungos, vírus sem envelope, bactérias gram positivas e vírus envelopados *vírus envelopados: HIV, hepatite, corona vírus
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