Relatório de aula pratica: Titulação de Aminoácido

Prévia do material em texto

Universidade Federal do Vale do São Francisco 
Campus - Centro de Ciências Agrarias 
Curso: Bacharelado em Zootecnia 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TITULAÇÃO DE AMINOÁCIDOS 
5° Relatório De Laboratório 
 
 
 
 
 
 
 
 
ZOOT0049 – Bioquímica básica 
Discente: Josué de Sousa Rodrigues 
 
 
 
 
 
 
Petrolina PE 
28 de agosto de 2021 
INTRODUÇÃO: 
As proteínas são macromoléculas orgânicas formadas pela junção de muitos aminoácidos. 
os aminoácidos são os monômeros e constitui as proteínas (polímeros). qualquer 
aminoácido contém um grupo carboxílico (-COOH), que é ácido, e um grupo Amina (-
NH2) na qual é básico. 
Quando um aminoácido é titulado sua curva de circulação indica a reação de cada grupo 
funcional com o íon de hidrogênio. Tomamos como exemplo, o aminoácido alanina. Se 
partimos de pH bem ácida (em torno de 1). As moléculas de aminoácidos se apresentaram 
sob a forma catiônica. dessa forma biônica todos os grupos que podem receber 
hidrogênios estão ligados ao átomo. 
Se adicionarmos gradativamente quantidades de Pequenas de NaOH sobre a solução da 
alanina, medindo a cada adição pH, e se construímos um gráfico relacionando o pH da 
solução em função do número que equivalente adicionado, obtemos uma curva com três 
regiões definidas: AB, BC e CD. Essas regiões representam as transformações iônicas 
que a molécula de alanina pode sofrer pela alteração do pH a que são submetidas a partir 
da adição de equivalentes em OH- adicionados a um meio extremamente ácido. 
A titulação de um aminoácido permite encontrar os PKAs e o seu ponto isoelétrico, o que 
é característico de cada molécula. a determinação da forma iônica dos aminoácidos é 
importante em processos técnicos de separação e Purificação dessas moléculas. Além 
disso, a forma iônica de um aminoácido é fundamental para a estrutura biológica das 
proteínas (polímeros de aminoácidos), principalmente aqueles aminoácidos que possuem 
grupo de cadeia lateral ionizável, além do grupamento Amino e carboxila descritas acima 
O ácido fraco e a base forte reagem completamente, pois a constante de equilíbrio 
envolvida na reação é grande, nesse caso haverá a formação de um sistema tampão 
envolvendo um par de ácido e base conjugado. 
A curva de titulação pode ser dividida em três regiões e o cálculo da curva de titulação 
pode ser dividido em quatro etapas. 
Primeira etapa: Antes de iniciar a titulação a solução contém apenas ácido fraco e água, 
ou seja, uma solução aquosa de ácido fraco. O pH da solução será determinado pela 
dissociação do ácido fraco. 
A segunda etapa antes de atingir o ponto de equivalência a solução é composta por uma 
mistura de ácido fraco que ainda não reage e o sal formado pela reação do ácido fraco 
com a base forte que foi adicionada. O pH será determinado pelo sistema tampão 
formado. 
Terceira etapa no ponto de equivalência: a quantidade de Base Forte adicionada foi 
suficiente para reagir com todo o ácido fraco presente na solução, produzindo um sal de 
ácido fraco e base forte, e água. o pH se era determinado pela Hidrólise do Sal. 
Quarta etapa após o ponto de equivalência: excesso de base forte é adicionado à solução 
de sal de ácido fraco e base forte. geralmente, o pH entre determinado pelo excesso de 
base forte. A contribuição da Hidrólise do sal é pequena, pois a base forte suprime esta 
reação. 
a maioria dos microrganismos pode expulsar aminoácidos a partir do seu ambiente e 
utilizados como combustível, quando exigido pelas condições metabólicas. Plantas, no 
entanto, raramente ou nunca oxidam aminoácidos para fornecer energia, os hidratos de 
carbono produzidos a partir de CO2 e H2O na fotossíntese, são geralmente sua única fonte 
de energia 
Nos animais aminoácidos sofrem degradação oxidativa de diferentes circunstâncias 
metabólicas 
1- Durante o procedimento normal de síntese de degradação de proteínas celulares alguns 
aminoácidos que são liberadas a partir de proteína de degradação e não são necessários 
para Nova síntese proteica sofrem degradação oxidativa. 
2- Quando uma dieta é rica em proteínas e aminoácidos e a injeção ultrapassa as 
necessidades do organismo para a síntese proteica, o excedente catalisado, sendo que os 
aminoácidos não podem ser armazenados. 
3- Durante o jejum prolongado ou diabetes mellitus não controlada, quando os 
carboidratos estão indisponíveis ou não diretamente utilizados, as proteínas celulares são 
utilizadas como combustível. 
OBJETIVO(S): 
 Fazer a titulação de aminoácidos e de um ácido fraco. 
 Determinar o pKa “prático” de aminoácido. 
MATERIAL E MÉTODOS: 
Material 
Solução de glicina 0,1 (M) 
Solução de ácido clorídrico 0,5 (N) 
Água destilada 
Pipeta graduada 
Pêra 
Becker 
Agitador magnético 
Balão volumétrico 
Metodologia 
Pipetou-se 10 ml de solução de glicina à 0,1 M, em um Becker 
Adicionou-se água destilada no Becker com a glicina, até que complete o volume 
necessário para emergir o eletrodo 
Levou-se à mistura de H2O destilada e glicina ao pHmetro acompanhado de um agitador 
magnético 
Adicionou-se a solução de HCl aos poucos na solução, com isso, foi anotado os dados de 
pH obtidos ao longo da adição de quantidades de ml 
Depois de alcançar o pH desejado com HCl, partiu-se para adicionar a base de NaOH a 
solução preparada anteriormente. A cada gota adicionada de base, anotou-se a variação 
de pH. 
Por fim, com os dados em mãos, foi feito a produção de um gráfico de representação da 
curva de titulação da glicina. 
RESULTADOS EXPERIMENTAIS E DISCUSSÃO: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Ponto isoelétrico, ou pI, é o valor de pH onde uma molécula, por exemplo, um aminoácido 
ou uma proteína, apresenta carga elétrica líquida igual a zero. O pI é o pH no qual há 
equilíbrio entre as cargas negativas e positivas dos grupamentos iônicos de um 
aminoácido ou de uma proteína. A diferença entre os valores de pI de proteínas pode ser 
utilizado para separá-las, submetendo-as à migração eletroforética em um gradiente de 
pH. Os valores de pK1 e pK2 correspondem aos valores de pH onde o aminoácido 
funciona como um tampão durante uma curva de titulação. 
CONCLUSÃO(ÕES) 
Com a realização desse experimento foi possível compreender toda influência do pH e o 
procedimento de titulação de aminoácidos especificamente na titulação com glicina que 
foi o aminoácido utilizado no experimento. 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
GLICINA 
Teórico Prático 
pK1 2,34 pK1 2,34 
pK2 9,6 pK2 10 
pI 5,97 pI 6,17 
CAMP BELL, MK. Bioquímica. 3 ed. Porto alegre. ARTMED EDITORA. 
L. NELSON, David; M. COX, Michael. Princípios de bioquímica de Lehninger. 6. ed. 
rev. Porto alegre: ARTMED EDITORA, 2014. 1250 p. v. 1. ISBN 978-85-8271-073-9. 
QUESTÕES 
01) Descreva, DETALHADAMENTE, cada um dos processos de preparação das 
soluções do aminoácido glicina. 
R= Neste processo é utilizada a pipeta para tranferir 10ml de solução de glicínia à 0,1 M 
para um Becker, em seguida é adicionado água destilada no Becker com glicínia, até que 
seja completado o volume necessário para o eletrodo emergir. Logo após, a mistura de 
H20 destilada e glicínia é levada ao pHmetro juntamente com um agitador magnético. 
Adiciona-se a solução HCl aos poucos na solução, após isso, é anotado todos os dados de 
pH obtidos ao decorrer da adição de ml. Após alcançar o pH desejado com HCl, 
adicionaremos a base de NaOH a solução preparada anteriormente. A cada hora de base 
adicionada, anota-se a variação do pH. Logo após obter todos os dados, é confeccionado 
um gráfico para representar a curva de titulação da glicínia. 
02) Quais as faixas de tamponamento do aminoácido utilizado nessa prática? 
R= A faixa tamponante dos aminoácidos está entre 10% a 90% da titulação de 
aminoácidos, isso significa a variação de +1/-1 de pH. Onde o poder de tamponamento é 
possível. O aminoácido glicina tem faixa ideal de tamponamento de 2,82 e 4,82. 
03) A partir das curvasexperimentais determine, de um modo aproximado, o valor 
dos diferentes pKa para cada um dos aminoácidos. Compare os valores obtidos com 
os da literatura. 
R= GLICINA 
 Teórico Prático 
pK1 2,34 pK1 2,34 
pK2 9,6 pK2 10 
pI 5,97 pI 6,17 
04) Considerando os possíveis erros envolvidos na preparação das soluções dos 
aminoácidos na forma totalmente protonada, diga em qual dos aminoácidos é 
possível determinar com maior rigor o volume de base utilizada? 
Justifique sua escolha. 
R= A glicina, devido ser a única utilizada no experimento. Mas quando analisamos os 
resultados práticos e teóricos, temos que o experimento teve uma boa rigorosidade, não 
sofrendo grandes discrepâncias nos valores de pk1, pK2 e pI.