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Exame andrológico: ● Fundamentos/Indicações; ● Roteiro do exame: ○ Identificação; ○ Exame clínico: ■ Anamnese; ■ Inspeção geral; ■ Específico do sistema genital (Externo e Interno); ■ Comportamento sexual; ■ Espermograma (avaliação do sêmen): coleta do sêmen e realizar o exame biológico desse sêmen; ■ Provas sanitárias. ○ Diagnóstico e conclusão; Exame macroscópico do ejaculado: ➔ Volume: copo graduado (mL) ou falcon (equinos e cães) ou balança (g = mL, suíno); ➔ Aspecto: Cremoso, cremoso-leitoso, leitoso, leitoso-seroso, seroso, sero-aquoso, aquoso. ◆ Isso tem relação com concentração, quanto mais espermatozóides tem naquele ejaculado, mais denso ele é e terá um aspecto mais cremoso, quanto menos espermatozóides, possui um aspecto mais aquoso. ➔ Odor: Sui generis (clara de ovo); ➔ Cor: pode variar de acordo com o teor de riboflavina na dieta: branco a marfim ou amarelado. Exame microscópico do ejaculado: ➔ Movimento: ◆ Movimento de massa (Turbilhão): ruminantes e aves (> 3) ◆ Movimento (motilidade) individual: movimento progressivo, movimento local, imóveis > obs. sobre lâmina + lamínula aquecidas (37oC); ● 60% (B, Eq), > 70% (Bu, Sui, Av, can),3 > 80% Ov, Capr; ➔ Vigor; ➔ Concentração; ➔ Exame morfológico. Espermograma Características do ejaculado: ➔ Volume: ◆ Determinado diretamente no copo coletor ◆ Expresso em ml ◆ Varia conforme espécie, método de coleta, regime de serviços (animais em serviço produzem menos ejaculado), tempo de excitação, condição da coleta e outros… ➔ Aspecto: ◆ Avaliação visual; ◆ Cor e aparência (consistência); ◆ Cores: branca, marfim, amarelada, avermelhada, marrom, cinza escuro; ◆ Consistência: cremosa, leitosa, opalescente, serosa, aquosa: ● Dependendo da concentração espermática. Hematospermia|Aspecto cremoso ➔ Turbilhão ou movimento de massa (característica física do sêmen): ◆ Ondas de espermatozóides formando verdadeiras cristas, que aparecem como linhas mais escuras nos pontos em que se encontram com as outras relação entre concentração de espermatozoide e motilidade gota em microscópio (40X) ◆ 5 = deslocamento intenso, ondas espessas; ◆ 4 = ondas com rápidos movimentos; ◆ 3 = ondas aparentes, movimentos moderados; ◆ 2 = ondas em movimentos pouco perceptíveis; ◆ 1 = não tem ondas, células imóveis. ➔ Motilidade (característica física do sêmen): ◆ A avaliação da motilidade espermática é o parâmetro mais utilizado para a avaliação do sêmen, definida como a porcentagem de espermatozoides móveis da amostra avaliada imediatamente após a colheita ou após a criopreservação do sêmen (Seager e Fletcher, 1972); ◆ A avaliação da motilidade após a criopreservação tem como objetivo verificar a proporção de espermatozóides que mantiveram a motilidade após as injúrias causadas por esse processo de conservação (Peña, 2000); ◆ A proporção de espermatozoides exibindo motilidade progressiva é, geralmente, estimada, subjetivamente, no microscópio óptico de contraste de fase ou, de forma objetiva, utilizando-se a análise computadorizada (Peña Martinez, 2004); ◆ Motilidade progressiva: que estão indo para frente; ◆ Motilidade não progressiva: espermatozóides que ficam em círculos, são espermas não móveis, não são os ideias para o processo de fecundação. ◆ Expressa em (%), em aumento de 10- 40x; ◆ Avaliação subjetiva (total ou progressiva): contar os espermatozóides móveis; ◆ Lâmina + lamínula, ou diluído em solução de citrato de sódio; ◆ Fotomicrografia; ◆ Computadorizado; ◆ Métodos de avaliação: ● Microscopía óptica (Salisbury et al.,1978); ● Motilidade computadorizado( Amann, 1989); ● Método fotográfico (Elliott et al., 1973); ● Swin up: baixa eficácia (Suttiyon & Thwaites, 1993). ◆ Casa: ● Velocidade curvilínea (VCL): Distância real percorrida em função do tempo (μm/s); ● Velocidade média (VAP): Distância percorrida medida do primeiro ao último ponto da sua trajetória (μm/s); ● Velocidade retilínea (VSL): Distância percorrida em uma linha média da sua trajetória (μm/s); ◆ É o teste + utilizado para estimar a capacidade fertilizante de um sêmen; ◆ Pela facilidade e rapidez; ◆ Existe certa correlação com a fertilidade (Foote, 2003). ◆ Somente a motilidade é inadequada para predizer a capacidade de fertilização do sêmen. (Pace & Sullivan, 1975; Jasko, 1992; Heitland et al., 1995); ◆ A % de móveis avaliada visualmente não apresenta uma forte correlação com a fertilidade. (Graham, 1996); ◆ Diferença significativa entre diluentes, inclusive dentro das dietas (Mohanthy, 1973); ◆ Variações estacionais na motilidade (Magistrini et al.,1987; Hoffmann et al., 1999); ◆ Espécies poliéstricas estacionais: ● Alta motilidade na estação reprodutiva; ● A qualidade do sêmen avaliada também na morfologia, potencial de membrana mitocondrial e integridade de membrana aumenta do inverno para o verão; ● Na estação reprodutiva: as características espermáticas apresentam melhores valores de integridade de acrossoma e mais espermatozóides com maior potencial de membrana mitocondrial. ➔ Vigor: ◆ Força do movimento ou velocidade com que os espermatozóides se movimentam; ◆ Estimado em (0 - 5); ◆ Utiliza mesma condição para avaliação da motilidade; ◆ Limites: ● Bovinos, Ovinos e Equinos: ○ Vigor mínimo é 3 (em uma escala de 1-5, CBRA). ◆ Vigor: velocidade (Classificação de Walton): ● Todos ou quase todos os movimentos exibem movimentos progressivos > 5; ● 75% dos espermatozóides tem movimentos progressivo > 4; ● Metade dos espermatozóides com movimento progressivo e oscilatório e metade de imóveis (intermediário) > 3; ● Só existem espermatozóides com movimentos lento e um grande número de imóveis > 2; ● Apenas movimentos oscilatórios > 1; ● Ausência de espermatozóides móveis > 0. ◆ O vigor espermático é um parâmetro, normalmente, avaliado em conjunto com a motilidade e é definido como a qualidade do movimento exibido pelos espermatozoides móveis. Para tanto, faz-se uso de uma escala compreendida numa faixa de 0 a 5, cujas classificações variam segundo os autores Platz e Seager (1977); Christiansen (1988) e Johnston et al. (2001). ➔ pH: ◆ 6,8 à 7,2 (precisa estar na neutralidade); ◆ Utiliza-se papel indicador; ◆ Fatores de variação: ● Baixa densidade espermática; ● Inflamações (alcalino); ● Substâncias estranhas. ➔ Concentração: ◆ Número de espermatozoides por mm3; ◆ Métodos para determinação: ● Câmara de contagem (Neubauer): É o hemocitômetro: ○ Diluição: ◆ 20μl / diluição 4 mL de solução formol salina = 1:200; ◆ 20μl / diluição 2 mL de solução formol salina = 1:100; ◆ Ou ◆ 50 μl / 9,95mL solução formol salina (1:200); ◆ 100 μl/9,9mL solução formol salina (1:100). ◆ Sempre de 1/20: ● Conte os dois lados da câmara e faça a média; ● “Dica” Sempre que a diluição efetuada for de 1/20, basta multiplicar o número (número médio contado nos retículos) por milhão (106)e tem-se direto a concentração por ml. ○ Amostra diluída em água destilada ou formol salina; Contagem dessa forma ou dessa. É preciso contar os espermas que estão dentro dos quadrantes, somente conta o espera que está com a cabeça dentro do quadrante. Nesta imagem existem 12 espermas dentro do quadrante. As 3 linhas contam. Realizar a contagem em formato de L. ● Espectrofotometria; ● Micro-cell-counter. ◆ Varia conforme fatores intrínsecos e extrínsecos. ➔ Morfologia.
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