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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Debora Wenceslau MATRÍCULA: 28132904 CURSO: Biomedicina POLO: UNG Centro PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A) TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR RELATÓRIO: Resumo Sobre amilase uma enzima produzida na saliva, mas especificamente nas nossas glândulas salivares. Serve para degradar o amido, que é um polissacarídeo. Ela inicia o processo de degradação dos carboidratos. Foram realizadas técnicas enzimáticas e químicas. Para enzimática foi utilizada amilase salivar e a técnica química com ácido clorídrico. 2. Materiais utilizados. Três tubos para reação química Três tubos para reação enzimática Banho de gelo Banho maria 30 ml de solução de amido a 1% Proveta Béquer 3 ml de ácido clorídrico Pera de Borracha 3ml de amilase salivar 5ml de H2O A) Qual a composição do amido? O amido é um polissacarídeo formado pela união de moléculas de a-glicose de amilase e de amilopectina, sendo armazenado em diferentes órgãos vegetais, ele é considerado um polímero natural, pois ele é um policassacarideo ou seja, é um carboidrato formado pela união sucessiva de várias moléculas de a-glicose. Na realidade ele é formado por dois polissacarídeos, amilase e amiolopectina.Fonte :Brasil Escola B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química do amido. No tubo 01 - foi somente no banho de gelo, e a reação de hidrólise utilizando a solução de Lugol a 2% com concentração de iodo que age no encontro com o amido formando uma coloração azul esverdeada, portanto não houve a degradação, não houve hidrólise nem no tubo enzimático e nem no tubo químico. No tubo 02 – 10 minutos no banho maria e mais 1 minuto no banho de gelo é possível ver a cor bem escura com aplicação de 5 gotas de Lugol é possível ver a degradação pois a cor muda para um tom de azul bem escuro. No tubo 03 – 20 minutos no banho maria e posteriormente 01 minuto no banho de gelo e com a aplicação de 5 gotas de lugol é possível ver a degradação do amido. C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido? A temperatura influencia na atividade enzimática e na reação química D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilase. Já descrito na resposta A E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido. Já descrito na resposta A F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do amido. Já descrito na resposta A 4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. A conclusão é que quando a mudança de temperatura, quente ou frio possível observar a atividade catalítica. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A prática foi feita com o reativo de Seliwanoff e ácido clorídrico que é um ácido forte, foi feita uma diferenciação de aldose e cetose, se contém ou não o grupo cetona. 2. Materiais utilizados. Tubo identificado com glicose Tubo identificado com frutose Tubo identificado com água 1 vidro com ácido clorídrico 1 vidro com o reativo de Seliwanoff 3. Responda as Perguntas: A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. O princípio químico é que quando aquecidas, as cetoses sofrem desidratação muito mais rapidamente que as aldoses. B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando com a presença ou não de aldoses e cetoses. Foi observado nos tubos a diferença da aldose e cetose e foi utilizado a glicose que uma aldose um monossacarídeo simples e a frutose se é ou não uma cetose, para observar se faz parte ou não o grupo cetona. C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. O objetivo é de controle negativo. D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? A desidratação do carboidrato e a fervura para evidenciar a cor no experimento. 4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff. A conclusão é de que o experimento mostrou que com a água que foi o controle negativo não houve reação e também o mesmo com a glicose, já com a frutose houve reação pois houve a mudança para a cor vermelha indicando a presença de aldoses e cetoses que são compostos do carboidrato. TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A técnica mostra as principais substâncias que podem reagir e precipitar com ácidos fortes que são os mais importantes. 2. Materiais utilizados. Ácido tricloroacético a 20% Acetato de chumbo a 10% Ovoalbumina a 10% 2 tubos 3. Responda as Perguntas: A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com ácido forte e metal pesado. Foram utilizadas 5 gotas de acetado de chumbo para o experimento e foi verificado a precipitação do material ele fica com aspecto leitoso indicando que houve a precipitação da proteína pelo ácido. B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas com ácidos fortes e metais pesados? A experiencia é que há uma precipitação mais intensa com o ácido forte, ele tem a capacidade de quebrar as ligações peptídicas da proteína mais que o chumbo, mas podemos observar essa reação nos dois tubos um mais evidente que o outro, mas não deixando de ter a reação. C) O que ocorreu com a ovoalbumina para que ela formasse um precipitado insolúvel neste experimento? Houve uma quebra da proteína. 4. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados. A conclusão é que além da modificação do ponto isoelétrico, de tudo que há nas proteínas conseguindo quebrar as estruturas, fazendo um processo de precipitação. TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. As proteínas são classificadas de acordo com seu ponto isoelétrico, dependendo do material ela poderá mudar essa concentração iônica, com adicionamento de sais, conseguindo precipitá-las em uma concentração tendo vários tipos de proteínas e fazendo uma separação. 2. Materiais utilizados. Solução de ovoalbumina a 10% Solução de sulfato de amônia concentrada Água 3. Responda as Perguntas: A) O que é “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? Quando adicionamos sais neutros a uma solução, ocorre um aumento da força iônica, do sistema. Assim, quando adicionamos pequenas quantidades de sal a uma solução contendo proteínas, as cargas provenientes da dissociação do sal passam a interagir com as moléculas proteicas, diminuindo a interação entre elas. Consequentemente, temos um aumento da solubilidade da proteína no meio aquoso. A esse fenômeno dá-se o nome de salting-in. Em condições de elevada força iônica, decorrente da adição de grandes quantidades de sal, temos o efeito contrário. A água, que apresenta um grande poder de solvatação de partículas menores (nesse caso íons). As moléculas de água, ocupadas em sua interação com íons, deixam a estrutura proteica com os íons, deixam a estrutura proteica, diminuição da solubilidade em meio aquoso e, consequentemente, precipitação da proteína. A esse fenômeno de insolubilizarão da proteína em de ocorrência de um considerável aumento da força iônica do meio dá-se o de salting-out. A água, que apresenta um grande poder de solvatação, passa a interagir com as duas espécies: as proteínas e os íons provenientes da dissociação do sal. Fonte: Universidade Federal da Paraíba –UFPB. B) Explique o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções salinas.Quando adicionamos sais neutros a uma solução, ocorre um aumento da força iônica (aumento da concentração de íons) do sistema. As moléculas de água, ocupadas em sua interação com íons, deixam a estrutura proteica. C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. Que não conseguimos perceber a precipitação, a água interfere na questão iônica das cargas. 4. Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções salinas concentradas) Demostra a precipitação das proteínas demostrando um aspecto leitoso e esbranquiçado. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Os açucares redutores são alguns carboidratos, que apresentam uma estrutura que é OH em um dos carbonos que é C1. Essa hidroquicila consegue reagir com diversos íons, principalmente metálicos e se baseia nessa ligação, onde a carbonila vai se ligar a um reativo, neste experimento o reativo Benedict, ele contém íons cúpricos que reage com a carbonila, formando um composto dióxido cuproso e conseguiremos identificar quais os açúcares redutores. 2. Materiais utilizados. Glicose a 1% Sacarose a 1% Reativo de Benedict Água 3 tubos 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do Reativo de Benedict? Consiste basicamente, de uma solução de sulfato cúprico em meio alcalino. B) O que são açúcares redutores? Um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um grupo carboxílico livre aldeído, sua capacidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído ou cetona livre. C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com o Reativo de Benedict. Coloque 5ml nos respectivos tubos a serem testados, após isso colocar 5ml de água, 5ml de sacarose e 5ml de glicose a reação não é observada de pronto é preciso colocar em banho maria e sempre misturando os elementos com movimentos circulares e aspirando. Coloque no banho maria por 5 minutos, retire-os e observe. No tubo da água que foi o controle negativo não houve reação e permanece com a cor do reagente azul. No tubo da sacarose podemos observar que não houve redução e nem reação entre os íons portanto não é um carboidrato redutor, na glicose houve uma redução dos íons, mas a cor ficou esverdeada indicando uma redução dos íons, houve uma reação do cobre e não formação do oxido cuproso D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de açúcares redutores. Já respondido na questão acima. E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou quantitativo? O teste é essencialmente qualitativo, ou seja, ele é usado simplesmente para verificar se um açúcar redutor está presente ou não para determinar a quantidade. Fonte: portal São Francisco 4. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. A conclusão é que o reagente para detectar excesso de açúcar na urina e detectar uma possível diabete. Fonte: Wikipédia Data do relatório 26 de Agosto de 2021.
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