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Uma variação da técnica PCR (Polymerase Chain Reaction) é a PCR Nested, mais sensível que a PCR convencional, pois a sua principal característica consiste em realizar: Só é possível amplificar o DNA em laboratório pela obtenção de uma enzima específica e pela utilização de oligonucleotídeos iniciadores sintéticos. Como é chamada a enzima e os iniciadores? Durante o preparo do tampão MIX para a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é fundamental que seja incorporado Cloreto de Magnésio (MgCl2), pois nesse caso a presença de Magnésio a possui função de: Para que a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) possa ocorrer normalmente, é necessária a preparação correta do tampão MIX, que deve conter, obrigatoriamente, os componentes representados na opção a seguir: um ciclo de amplificação contendo quatro pares de primers (iniciadores) um ciclo de amplificação contendo dois pares de primers (iniciadores) externos dois ciclos de amplificação, sendo o ultimo ciclo com dois pares de primers (iniciadores) externos um ciclo de amplificação contendo dois primers internos dois ciclos de amplificação, sendo o ultimo ciclo contendo dois pares de primers (iniciadores) internos Explicação: A técnica PCR Nested consiste em dois PCR. O primeiro PCR é realizado com a fita parental usando dois primers externos, em seguida em uma segunda PCR utiliza-se dois primers internos. 2. DNA polimerase e sonda Não há uma opção correta. Helicase e primers RNA polimerase e primers DNA polimerase e primers Explicação: DNA polimerase e primers 3. cofator da enzima Taq polimerase transportar os nucleotideos correspondentes até a fita de DNA molde. aumentar a velocidade de reação da enzima Taq polimerase impedir que a Taq polimerase seja ativada antes da temperatura ideal interromper a função enzimática quando o numero mínimo de cópias for alcançado Explicação: O cloreto de magnésio funciona como cofator da enzima DNA polimerase podendo afetar as temperaturas de denaturação das fitas de DNA e o anelamento dos primers. 4. Taq polimerase + Iniciadores + MgCl2 + DNA + tampão + dNTPs Taq polimerase + MgCl2 + DNA + tampão https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# Apesar de revolucionar o conceito de identificação de amostras de DNA, baseado na replicação in vitro, o início da técnica PCR na década de 80 apresentava um fator limitante, e muitas vezes trabalhoso, para a sua execução, pois tratava-se da: Sobre a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), fazemos as seguintes declarações: I - Possibilita a multiplicação (amplificação) de pedaços (fragmentos) específicos DNA, usando uma enzima específica denominada DNA polimerase; II - A enzima específica denominada DNA polimerase participa da duplicação do material genético (DNA) nas células; III - Revolucionou a Biologia Molecular ao permitir que o DNA (ácido desoxirribonucleico), presente em pequenas quantidades nas amostras biológicas encontradas em locais de crime, fosse multiplicado (amplificado) em milhares de cópias, com a finalidade de realizar análises mais detalhadas nesse material. Podemos afirmar que: Taq polimerase + dNTP + DNA Taq polimerase + Iniciadores + DNA + tampão Taq polimerase + dNTPs + DNA + MgCl2 + tampão Explicação: Além da presença da enzima Taq polimerase, o tampão MIX é constituido de MgCl2, iniciadores, dNTPs, tampão e a sequência de DNA a ser ampificada. 5. não dissociação das proteínas histonas ao DNA um unico par de iniciadores (primers) por ciclo de reação uma reação relativamente longa promovendo a desnaturação dos componentes necessidade de reposição da enzima DNA polimerase a cada ciclo de reação presença de oligonucleotideos iniciadores (primers) inespecíficos Explicação: A sensibilidade da enzima a temperaturas elevadas, e com isso a sua desnaturação, resultava na reposição da DNA polimerase. A identificação da enzima polimerase em Thermus aquaticus, estável em temperaturas elevadas propiciou o que definimos como ciclos de replicação in vitro sem interrupções. 6. Somente as assertivas II e III estão corretas. Somente as assertivas I e III estão corretas. Todas as assertivas estão erradas. Todas as assertivas estão corretas. Somente as assertivas I e II estão corretas. Explicação: Reação em Cadeia da Polimerase (PCR, do inglês Polymerase Chain Reaction) possibilita a multiplicação (amplificação) de pedaços (fragmentos) específicos DNA, usando uma enzima específica denominada DNA polimerase, a mesma que participa da duplicação do material genético (DNA) nas células. A técnica de Reação em cadeia da Polimerase (PCR) revolucionou a Biologia Molecular ao permitir que o DNA (ácido desoxirribonucleico), presente em pequenas quantidades nas amostras biológicas encontradas em locais de crime, fosse multiplicado (amplificado) em milhares de cópias, com a finalidade de realizar análises mais detalhadas nesse material. Para que isso fosse possível, algumas descobertas históricas foram importantes nesse processo. Vamos estudar isto a seguir. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp#
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