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Q1 Uma amostra do peptídeo A, cuja estrutura é mostrada no esquema abaixo, foi tratada com pepsina. Outra amostra do mesmo peptídeo foi tratada com...

Q1 Uma amostra do peptídeo A, cuja estrutura é mostrada no esquema abaixo, foi tratada com pepsina. Outra amostra do mesmo peptídeo foi tratada com tripsina. Após o tratamento, as enzimas foram descartadas. O material resultante de cada tratamento foi submetido à eletroforese em pH 7,4. Uma amostra do peptídeo A também foi submetida à eletroforese em pH 7,4. Na sequência do peptídeo mostrada abaixo, o NH2 inicial e o COOH terminal são mostrados na estrutura do mesmo. Peptideo A: H3N+- Glu-Leu-Phe-Arg- Gly-Pro- Lys-Leu-Tyr-Ala-Ile-COO- i) A pepsina catalisa a hidrólise de ligações peptídicas das quais participam os grupos aminos de fenilalanina, tirosina e triptofano. ii) A tripsina catalisa a hidrólise de ligações peptídicas das quais participam os grupos carboxila de arginina e lisina. iii) A estrutura dos aminoácidos e seus pKas estão no Esquema 1 na última página da prova. Com base nas informações acima: a) Escreva as sequências dos peptídeos resultantes das amostras tratadas com pepsina usando as estruturas mostradas no esquema 1. b) Escreva as sequências dos peptídeos resultantes das amostras tratadas com tripsina. c) Escreva, ao lado de cada peptídeo, a carga do mesmo em pH 7,0. d) Indique no esquema a seguir em quais posições (A até E) seria esperado encontrar os resultados das eletroforeses realizadas em pH 7,0 do: a) peptídeo A, b) peptídeo A tratado com pepsina e c) peptídeo A tratado com tripsina. Indicar a composição da mancha encontrada em cada posição.

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a) Sequência do peptídeo resultante do tratamento com pepsina: Glu-Leu-Phe + Gly-Pro-Lys-Leu-Tyr-Ala-Ile-COO-. b) Sequência do peptídeo resultante do tratamento com tripsina: H3N+- Glu-Leu-Phe-Arg- + Gly-Pro-Lys-Leu-Tyr-Ala-Ile-COO-. c) Carga dos peptídeos em pH 7,0: - Peptídeo resultante do tratamento com pepsina: carga neutra (pH 7,0 = pI). - Peptídeo resultante do tratamento com tripsina: carga +1 (arginina e lisina possuem grupos aminos com pKas maiores que 7,0). - Peptídeo A: carga +1 (grupo aminos da lisina). d) Posições em que seriam esperados os resultados das eletroforeses em pH 7,0: - Peptídeo A: posição D. - Peptídeo A tratado com pepsina: posição E. - Peptídeo A tratado com tripsina: posição C. Composição das manchas: - Peptídeo A: mancha única correspondente ao peptídeo A. - Peptídeo A tratado com pepsina: duas manchas, uma correspondente ao peptídeo Glu-Leu-Phe e outra correspondente ao peptídeo Gly-Pro-Lys-Leu-Tyr-Ala-Ile-COO-. - Peptídeo A tratado com tripsina: duas manchas, uma correspondente ao peptídeo Glu-Leu-Phe-Arg e outra correspondente ao peptídeo Gly-Pro-Lys-Leu-Tyr-Ala-Ile-COO-.

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