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Página 1 de 9 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 NOME: THIAGO FARIAS DE MELO. MATRÍCULA: 01077507. CURSO: BIOMEDICINA-EAD POLO: RECIFE/GRAÇAS – BLOCO D. PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A atividade catalítica da amilase salivar tem o objetivo de testar a presença do amido que e um polissacarídeo e avaliar a ação da enzima amilase salivar que ajuda na degradação de carboidratos. 2. Materiais utilizados. Pipetas, água destilada, beckers, tubos de ensaio, solução de ácido clorídrico (HCl), solução de amido 1% (C6H10O5) e solução de amilase salivar. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do amido? é um carboidrato (hidrato de carbono), que, por sua vez, são compostos que possuem a função mista poliálcool-aldeído ou poliálcool-cetona possuindo composição de dois polissacarídeos, amilose e amilopectina, que são constituídos de moléculas de α-glicose. Página 2 de 9 B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química do amido. Tubo 1 não houve hidrolise, onde após a reação o produto apresentou coloração verde. Tubo 2 após reação o produto final gerou uma reação ficando de cor azul. Tubo 3 após reação o produto final gerou uma reação e ficou de cor azul. C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido? O uso do HCl ajuda quando uma alta concentração de amido é tratada com ácido sob temperatura inferior aquelas de gelatinação durante uma ou mais horas de reação. D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. Amilases são enzimas que são catalisadoras da hidrólise da amilopectina, da amilose e do glicogênio em maltose e dextrinas, é um componente do amido onde na regra bioquímica ocorre a degradação da amilase pela amilase gerando moléculas de gerando o produto maltose. E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido. Tubo 1 não houve hidrolise onde após a reação o produto apresentou cor verde. Tubo 2 após reação o produto final gerou uma reação onde ficou com a coloração azul. Tubo 3 após reação o produto final gerou uma reação onde ficou com a coloração azul. Página 3 de 9 F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do amido. A amílase salivar é uma enzima que atua provocando a hidrólise do amido, um polissacarídeo muito abundante na alimentação, estando presente, sobretudo, em alimentos de origem vegetal, nos quais constitui a principal substância de armazenamento. Em termos funcionais, esta enzima é uma a (1-4) glicosídase, provocando a quebra da molécula de amido em dissacarídeos, nomeadamente, maltose, a qual, posteriormente, será simplificada a unidades de glicose, um monossacarídeo, por enzimas específicas no duodeno. A glicose é o principal substrato energético das células 4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. A observação através dos experimentações, e visto que a ação química e enzimática da amilase salivar demonstrando que sim a temperatura influência na reação da degradação do amido. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A Reação tem o objetivo de identificar aldoses que possuem carbonila de aldeído e cetoses que tem a função de cetona. 2. Materiais utilizados. Página 4 de 9 Pipetas, água destilada, beckers, tubos de ensaio, solução de ácido clorídrico (HCl), Glicose (C₆H₁₂O₆), Frutose (C₆H₁₂O₆) e água destilada. 3. Responda as Perguntas: A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. Identificar as aldoses e cetoses nos compostos. B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando com a presença ou não de aldoses e cetoses. Tubo 1 sem reação usada como controle no teste. Tubo 2 possui glicose onde confirma que a glicose não e um cetose. Tubo 3 possui frutose onde possui uma reação de cor vermelha junto com o reativo de Seliwanoff onde confirma que a frutose e uma cetose. C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. E utilizado como uma reação para controle do teste já que a água destilada como solvente não possui uma reação como o reativo de Seliwanoff. D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? O ácido que representa o ácido no estomago humano ajuda na utilização de testes como o realizado na pratica e a fervura ajuda a imitar os processos fisiológicos do corpo humano. 4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff. Página 5 de 9 A análise através dos experimentos, e visto que a glicose e a frutose trazem a representação de um produto de cetose e um de aldose onde a glicose representa uma aldose e a frutose uma cetose causando a reação pelo reativo de Seliwanoff. TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Utilizado para causar a desnaturação de proteínas em presença de ácidos fortes e metais pesados, gerando uma reação onde causa uma precipitação em produto que auxilia no descarte das proteínas. 2. Materiais utilizados. Pipetas, agua destilada, Beckers, tubos de ensaio, solução de ovoalbumina, solução de ácido tricloroacético (C2HCl3O2) e solução de acetato de chumbo (CH₃COO)₂Pb. 3. Responda as Perguntas: A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com ácido forte e metal pesado. Utilizando a ajuda da pipeta para a reação da solução no tubo 1 que contêm a solução de ovoalbumina e a solução de ácido tricloroacético gerando uma solução leitosa com precipitados brancos em toda solução Página 6 de 9 Utilizando a ajuda da pipeta para a reação da solução no tubo 2 que contém a solução de ovoalbumina e a solução de acetato de chumbo gerando uma solução leitosa com precipitados brancos em toda solução. B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas com ácidos fortes e metais pesados? Os cátions de metais pesados como acetato de chumbo dentre outros, formam precipitados insolúveis de proteínas. Essa precipitação é mais intensa quando o pH está acima do ponto isoelétrico. Isso porque, acima do pI, a carga líquida da proteína é negativa, favorecendo a interação com os cátions provenientes do sal. A precipitação abaixo do ponto isoelétrico através da adição de ácidos fortes. Comparando com o mecanismo anterior: quando a proteína está abaixo do seu pI, a carga líquida total da molécula é positiva. Isso facilita a interação da molécula com os ânions provenientes de ácidos como o ácido tricloroacético. C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. Utilizando a ajuda da pipeta para a reação da solução no tubo 1 que contêm a solução de ovoalbumina e a solução de sulfato de amônio gerando uma solução leitosa com precipitados brancos em toda solução. Utilizando a ajuda da pipeta para a reação da solução no tubo 2 que contêm a solução de ovoalbumina e a solução de apenas água destilada sem nenhuma reação. 4. Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções salinas concentradas)Conclui-se que quando adicionamos sais a uma solução, ocorre um aumento da força iônica do sistema. Assim, quando adicionamos pequenas quantidades de sal a uma solução contendo proteínas, as cargas provenientes da dissociação do sal passam a interagir com as moléculas proteicas, diminuindo a interação entre elas gerando o Salting out e Salting in. Página 7 de 9 TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Os açúcares redutores são alguns carboidratos que apresenta uma estrutura de hidroxila que reage com íons metálicos onde a carbonila reage com o reativo de Benedict que forma o óxido cuproso. 2. Materiais utilizados. Pipetas, tubos de ensaio, solução de glicose, solução sacarose, reativo de Benedict e água destilada. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do Reativo de Benedict? Solução de sulfato cúprico em meio alcalino (com muitos íons OH-); e pode ser preparado através do carbonato de sódio, citrato de sódio e sulfato cúprico. Página 8 de 9 B) O que são açúcares redutores? Um açúcar redutor é qualquer açúcar que apresenta um grupo carbonílico livre aldeído derivado de uma aldose. C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com o Reativo de Benedict. Estrutura de hidroxila que reage com íons metálicos onde a carbonila reage com o reativo de Benedict. D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de açúcares redutores. tubo 1 - glicose com reação mudança para a cor esverdeada tubo 2 - sacarose sem reação tubo 3 - controle negativo sem reação E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou quantitativo? O teste para detectar a glicose na urina, que pode ser um sinal de diabetes sendo um teste qualitativo Página 9 de 9 4. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. Conclui-se que a aplicação do teste e facilitada para o auxilio de identificação de vários fatores de açúcares redutores, confirmando que a glicose e um desses açucarem por ser uma aldose e apresentar reação junto ao reativo de Benedict.
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