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NUTRIÇÃO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA @larirodrigues.b 1 Caracterização de Carboidratos – parte II Testes que serão realizados nesta prática: Benedict: positivo para açúcar redutor; Barfoed: positivo para monossacarídeos; Iodo: positivo para amido. Testes de Benedict e Barfoed: Baseado nas propriedades redutoras dos carboidratos; Monossacarídeos (todos são redutores) podem ser oxidados por Fe+3 e Cu+2; Dissacarídeos – redutores se tem OH do carbono anomérico livre (ex: maltose e lactose). Açúcar redutor: é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um grupo carbonílico aldeído livre (derivado de uma aldose). Este composto reduzirá outro composto. Todo monossacarídeo, alguns dissacarídeos e oligossacarídeos são redutores. (As cetonas precisam entrar em equilíbrio dinâmico e se tornarem aldeídos para atuar como açúcar redutores). Os açúcares redutores reduzem os íons cúpricos (+2) da solução precipitando óxido curposo (+1). Os açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. Por esse motivo a extremidade que contém o -OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar, de AÇÚCAR REDUTOR. A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. Monossacarídeos, em meio ácido, sob aquecimento, reduzem os íons cúpricos (+2) da solução, precipitando óxido cuproso (+1). Dissacarídeos geram resultados positivos para tempos mais longos de aquecimento (ou seja, caso o procedimento seja feito por um período de tempo maior, pode ser que o resultado seja um falso positivo, já que ele vai passar a detectar a presença de dissacarídeos e o objetivo do teste é a diferenciação desses dois). É válido lembrar que amido (HELICOIDAL) é um polímero de glicose e é a junção de dois polissacarídeos: amilopectina (ligações α1-6, ramificada) e amilose (α 1-4, não ramificada). A proporção desses dois polissacarídeos varia no amido. Introdução Teste de Benedict – identificar açúcar redutor Açúcar redutor (Glicose) O Teste de Barfoed – identificar monossacarídeos Açúcar redutor O Teste de Iodo – identificar amido NUTRIÇÃO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA @larirodrigues.b 2 A amilopectina apresenta estrutura ramificada, sendo que os “ramos” aparecem a cada 24-30 moléculas de glicose. A ligação entre as unidades de glicose também é do tipo 1-4 na mesma cadeia. Porém, unindo duas cadeias, aparecem ligações do tipo α 1-6. Assim, o amido é formado pela combinação da amilose com a amilopectina. Também sabemos que a amilose forma um complexo azul com o iodo, enquanto a amilopectina forma um complexo vermelho. RESUMINDO: Amilose + iodo = cor azul intensa Amilopectina + iodo = cor avermelhada Aquecimento promove desespiralização das hélices do amido, soltando o iodo = reação torna-se incolor. No resfriamento a hélice é restaurada e, consequentemente, a cor da solução, já que esta é derivada da interação entre as moléculas de iodo e a hélice da amilose. Executar testes para a identificação de carboidratos desconhecidos (Amostra A a F) – mais 3 testes. Interpretar os resultados dos seis testes e identificar os compostos nas Amostras A a F. Teste de Benedict Teste de Barfoed: Objetivos Materiais Utilizados Cuidados Necessários Procedimentos NUTRIÇÃO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA @larirodrigues.b 3 Teste de iodo: Preencher a tabela com os resultados, identificar cada amostra (A a F) e concluir sobre as características dos carboidratos identificados. Teste de Benedict: Controle positivo – glicose (1ml); Controle negativo – Água destilada (1ml); Amostra A – carboidrato desconhecido; + 1,5ml do Reagente de Benedict; Banho maria por 5 minutos; Açúcar redutor apresenta cor vermelho tijolo. Teste de Barfoed: Controle positivo – glicose (1ml); Controle Negativo – água destilada (1ml); Amostra A – carboidrato desconhecido (1ml); + 1,5ml do Reagente de Barfoed; Banho maria por 5 minutos; O precipitado de cor vermelho tijolo indica a presença de monossacarídeo. Teste de Iodo: Controle positivo – amido (1ml); Controle negativo – água destilada (1ml); Amostra A – carboidrato desconhecido (1ml); + 1 gota de Lugol; Aparece uma cor azul escura para o amido. Resultados e Discussão Aula Prática NUTRIÇÃO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA @larirodrigues.b 4 O conteúdo do tubo positivo foi diluido com água destilada. Após aquecer em banho maria, a solução muda de cor. Resfriando logo em seguida em água corrente, a solução retorna à cor original. Resultados e Discussões Caracterização de Carboidratos baseada na propriedade redutora desses compostos
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