Genética Molecular e Biotecnologia

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FACULDADE CIÊNCIAS DA VIDA 
DISCIPLINA: Genética aplicada a processos moleculares 
PROFESSORA: Dra. Aline Martins 
SEMESTRE: 2021/2 
VALOR: 30,0 pontos 
 
 ANGÉLICA FERNANDES SOARES 
Observações importantes: 
 A avaliação consta de 10 questões. 
 A linguagem utilizada, sequência lógica e estilo claro fazem parte das respostas. 
 Cabe apenas ao aluno a interpretação das questões. Dessa forma, em caso de 
plágio a avaliação será anulada! 
 Concentre-se em sua prova e, com tranquilidade, faça-a da melhor maneira possível 
como um comprovante de seus esforços. 
Desejo a todos ótima prova!!!!! 
1. (3,0 pontos) 
São exemplos de marcadores moleculares: 
a) SNPs 
b) Inserção 
c) Deleção 
d) Duplicação 
e) Todas as alternativas estão corretas 
Resposta A: Os polimorfismos de sequência nucleotídeo (SNP) são marcadores 
moleculares que podem distinguir dois indivíduos diferentes. Inserção, deleção, 
duplicação são os mecanismos de variabilidade genética que podem dar origem 
a um novo SNP. 
2. (3,0 pontos) 
Sobre os plasmídeos, assinale a alternativa incorreta: 
a) São moléculas de DNA circular 
b) Possuem diversos sítios de Clivagem 
c) São moléculas incapazes de duplicar-se 
d) São usados na técnica de DNA recombinante 
e) Muitas vezes, relacionam-se com funções de sobrevivência 
 
Resposta C : Para duplicar um plasmídeo é necessário uma maquinaria proteica 
de replicação, compostas por diferentes famílias de enzimas, atuantes em 
diferentes etapas no processo de replicação. O plasmídeo em si é uma molécula 
de DNA circular. 
 
 
3. (3,0 pontos) 
Em relação às Enzimas de Restrição assinale a alternativa incorreta: 
a) Geram pontas de DNA adesivas 
b) São denominadas exonucleases de restrição 
c) Sua nomenclatura é definida de acordo com sua bactéria de origem 
d) Geram moléculas com extremidades abruptas 
e) Reconhecem sequências de 4, 6 e 8 bases 
Resposta D: Enzimas de restrição são caracterizadas por gerar extremidades 
(sequências conhecidas) , tanto no reconhecimento do sítio de clivagem como no 
fragmentos consequentemente gerado pela clivagem. 
4. (3,0 pontos) 
A construção de um OGM é composta de várias etapas. Assinale a alternativa 
correta em relação à ordem das etapas da construção de um OGM. 
(4) Clonagem de DNA 
(2) Formação de moléculas de DNA recombinante 
(3) Moléculas de DNA são inseridas em células vivas 
(5) Expressão da proteína recombinante 
(1) DNA doador e do vetor são clivados pela mesma enzima de 
restrição 
 
a) 4, 2, 3, 5, 1 
b) 1, 3, 5, 2, 4 
c) 4, 5, 1, 3, 2 
d) 5, 2, 4, 1, 3 
e) 5, 4, 3, 1 ,2 
Resposta A; 
5. (3,0 pontos) 
Descreva a importância da Biologia Molecular e Biotecnologia, com exemplos de 
aplicação, para a formação do profissional da saúde. Por que essa área é 
considerada multidisciplinar? 
Resposta: A área de conhecimento que abrange a biologia molecular e 
biotecnologia estuda os elementos e mecanismo mais básicos das interações 
moleculares que deram origem à vida. A compreensão dos mecanismos de 
replicação, transcrição, tradução e regulação gênica fundamentaram nos últimos 
50 anos a base de muitas ferramentas moleculares para desenvolvimento da 
biotecnologia e seus produtos, no que diz respeito a ciências aplicadas a 
compreensão dos mecanismos moleculares permitiram os desenvolvimentos de 
muitos testes genéticos, assim como testes de detecção de agentes patológicos, 
dentre outros. É dita como multidisciplinar pois o segmento requer uma 
compreensão em Biologia, Física e Química. Uma vez que a Biotecnologia atua 
na interface destas áreas de conhecimento. 
6. (3,0 pontos) Sobre as vacinas de subunidades, responda: 
a) Como são produzidas? 
Resposta: Uma vez identificado o organismo causador da patologia, são 
selecionadas regiões do genoma do organismo que podem estimular o sistema 
imune a produzir anticorpos para combater o agente infeccioso. Essas regiões 
(sequências) são clonadas em um vetor de expressão, expressas de forma 
recombinante em um organismo hospedeiro e purificadas, essas subunidades 
(sequências de proteínas) são um fragmento do agente infeccioso que tem o 
objetivo de estimular o sistema imunológico, frente a uma possível contaminação 
futura. 
 
b) Por que esse tipo de vacina é considerada uma tecnologia do DNA 
recombinante? 
Resposta: A clonagem gênica permite transferir uma sequência de um 
organismo para outros visando a produção de proteínas recombinantes ou 
mesmo desenhar novas proteínas que não existem no ambiente natural (biologia 
sintética), as vacinas de subunidades podem ser produzidas por meio dessa 
tecnologia. 
 
7. (3,0 pontos) "Há um poder enorme nessa ferramenta genética, que afeta a todos 
nós", afirmou Claes Gustafsson, presidente do Comitê Nobel de Química, em 
declaração. "[O método] não só revolucionou a ciência básica, mas também 
resultou em colheitas inovadoras e levará a novos tratamentos médicos 
inovadores." 
Sobre o método de Crisp-Cas9, justifique a afirmativa acima, descrevendo como 
é realizada a técnica e seu potencial de aplicação. Exemplifique pelo menos três 
áreas de aplicação. 
Resposta: O sistema CRISPR possibilita a edição do genoma através de 
clivagem do DNA por uma endonuclease (Cas9), guiada a partir de uma 
sequência de RNA (ou RNA guia), que é capaz de se parear com as bases de 
uma sequência-alvo com alto grau de especificidade. A grande revolução 
causada por esta técnica consiste no fato de poder ser feitas edições diretamente 
no genoma. Desta forma, o sistema pode ser utilizado tanto para reparar 
mutações (restaurando a função gênica) quanto para introduzir mutações novas 
(causando o "nocaute" gênico). Atualmente também existem trabalhos para o 
desenvolvimento de testes de diagnóstico molecular (detecção de sequências 
conhecidas) no qual se faz uso da maquinaria Cas9 combinada com PCR 
isotérmico, por exemplo. 
 
8. (3,0 pontos) Explique os resultados apresentados na imagem e descreva a 
metodologia empregada no diagnóstico. 
 Resposta: O RFLP (Polimorfismo no Comprimento de Fragmentos de Restrição), a 
partir de um sítio de clivagem (sequência conhecida) uma enzima de restrição cliva 
a molécula de DNA, formando fragmentos de diferentes tamanhos. Esses fragmentos 
podem formar um padrão de bandas expressas em um gel, na corrida eletroforética, 
fazendo uma analogia, esse padrão de bandas pode ser comparado como uma 
identidade de cada indivíduo ou condição patológica conhecida. No caso 
apresentado na questão foi realizado uma reação de PCR com primers flanqueando 
as extremidades da região em análise o produto de PCR foi tratado com a enzima 
BsmFI. O paciente que não apresenta mutações vai demonstrar no gel duas bandas 
de 90 pb e 126 pb no caso na coluna 5. Os pacientes correspondentes às colunas 2 
e 4 apresentaram pelo menos uma cópia do gene mutado e uma não mutada. Os 
pacientes correspondentes às colunas 1 e 3 apresentaram mutações em todas as 
cópias do gene analisado. 
9. (3,0 pontos) 
a) Qual o significado da sigla PCR? 
Resposta: Reação em cadeia da polimerase do inglês Polymerase Chain Reaction 
(PCR) 
b) Qual o principal objetivo dessa técnica? 
Resposta: Basicamente Amplificar uma sequência de nucleotídeos, mas a técnica 
tem muitas aplicações na pesquisa e na clínica médica, visando a detecção 
sequências de interesse clínico, dentre outras aplicações. 
10. (3,0 pontos) 
Algumas técnicas de biologia molecular permitem separar fragmentos de DNA e seus 
tamanhos podem ser determinados com o uso de gel de eletroforese. Esses 
fragmentos podem ser visualizados empregando corantes específicos para ácidos 
nucléicos, ou pela marcação dos fragmentos com marcadores radioativos ou 
químicos. Os fragmentos de DNA que têm 500, 550 1.000 e 2.000 pb de tamanho 
são separados por gel de eletroforese. Qual fragmento migrará mais longe no gel?a) Fragmento de 2.000 pb 
b) Fragmento de 500 pb. 
c) Fragmento de 1.000 pb 
d) Fragmento de 550 pb. 
e) Todos migram a distâncias iguais. 
 
Resposta B: O menor fragmento apresenta menor resistência para migrar pelo 
gel. Logo percorre o caminho mais rápido, “vai mais longe”, sob a mesma energia 
(Voltz) pelo caminho percorrido (em Tempo). 
 
Olá Luciana, 
Conforme conversamos pelo whats app, não esquece de olhar por favor sobre a questão 
do Inter que eu não faço para fazer regra de 3 na nota da prova por favor. 
 
Desde já agradeço.