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ABO, Rh, outros sistemas. COOMBS direto e indireto, Prova cruzada Sistema ABO Antígenos do Sistema ABO são glicoproteínas Presença controlada por uma série de 3 alelos (IA – I B – i) Localizados no par do cromossomo 9 Exemplo de Polialelia Letra I vem de isoaglutinação = aglutinação do sangue entre indivíduos da mesma espécie Gene ABO está localizado no cromossomo 9q34 ⇓ Codifica enzimas glicosiltransferases que adicionam moléculas de carboidrato na cadeia percursora → Genes A1,A2, B, O (aborda a parte acima) Os antígenos ABO são sintetizados na membrana eritrocitária pela adição de carboidratos a uma cadeia precursora glicoproteica ou glicolipídica Genes A1, A2, B, O Responsa ́veis pela biossíntese dos antígenos ABO e H dos eritrócitos Indivíduos do grupo O expressam uma enzima não funcional e apresentam o antígeno H intacto Codificação e produção de enzimas denominadas glicosiltransferases, responsáveis por catalisar as reações entre o substrato e o açúcar receptor (transglicolização). Codominância: Ou seja, cada alelo fornece seu efeito igualmente IA e IB Dominantes em relação ao alelo “i” Relação de dominância: I A = IB > i Anticorpos Os anticorpos ABO estão ausentes ao nascimento e são produzidos entre 3 e 6 meses de vida. Os anticorpos são produzidos contra o antígeno que está ausente no indivíduo. Anticorpos- agutinina Antígenos-aglutinogenio Testes pré-transfusionais Antígenos eritrocitários Importância dos estudos dos antígenos: Incompatibilidade transfuncional Incompatibilidade materno fetal Transplantes Reações hemolíticas transfusionais RHT Definida como a diminuição da sobrevida da hemácia após a transfusão de sangue devido a incompatibilidade imunológica entre receptor e doador Ocorrem quando o paciente foi previamente sensibilizado por algum antígeno, não possuindo anticorpos detectáveis no seu plasma no momento da realização das provas pré-transfusionais Maior incidência em pacientes politransfundidos As reações hemoliticas transfucionais podem ser dois tipos: -imediata: acorrem durante ou algumas horas após a transfusão -tardia: ocorrem dias ou semanas após a transfusão Intravascular ou extravascular Lembrando….. Metabolismo da bilirrubina Reações hemolíticas transfusionais Reação hemolítica imediata Por ABO: - reação hemolítica grave com alto índice de mortalidade. -ac presentes no plasma do receptor hemolisam as hemácias do doador -possibiliade de desenvolvimento de CIVID pela liberação de estroma celular com ativação fator XII. Reação hemolítica tardia Provas de compatibilidade transfusionais Provas de compatibilidade transfusionais A maioria das transfusões de CH não terá reação hemolítica imune se o sangue do doador for ABO e RhD idênticos ao receptor ATENÇÃO: outros Ag’s particularmente imunogênicos: rh, kell, duffy, kidd e ss Teste de COOMBS Pesquisa de anticorpos irregulares Pesquisa de Anticorpos Irregulares (PAI) Objetivos: -detectar maioria dos anticorpos clinicamente significativos -reação hemolítica -doença hemolítica do feto e recém nascido Redução significativa sobrevida eritrocitária Existem 36 sistemas de grupos sanguíneos e mais 328 antigenos eritrocitários São dividos de acordo com suas características bioquímicas Oriundos de genes- produtos primários ou enzimas Sistema Lutheran Antígenos Lua e Lub Foram identificados pelo menos 50 antígenos Rh, e os cinco principais são o D, C, c, E, e. Sistema Kell : Um paciente com fenótipo K(-) que receba uma única transfusão com a presença do antígeno tem uma probabilidade de até 10% para a formação do anticorpo correspondente sra. Kellacher: Antígeno K o segundo mais imunogênico de todos os antígenos de grupos sanguíneos (o antígeno D é o mais imunogênico deles) COOMBS direto *não é mto usado pq é mto restrito a já ter a uma doença descrita Características importantes da técnica de antiglobulina direta (TAD) *pega o sangue da pessoa e vai ver se a pessoa ta sensibilizada com algum soro, e ai vai ter reação, ou seja simplemente pesquisa a sensibilização da hemácia *pesquisa de anticorpo fixos a membrana eritrocitária MONOESPECÍFICO : Anti-IgG POLIESPECÍFICO: Anti-IgG + Anti-C3D *o mais utilizado *no contexto dessas três doenças pode ser usado • Doença transfusional do recém-nascido • Reação transfusional hemolítica • Anemia hemolítica autoimune *Tudo isso é técnica para fazer, se fizer errado, já da alteração do exame!! Procedimento: A- Diluição de hemácias 3% B- Lavagens C- Adição do soro de coombs D- Centrifugação E- Analise macroscópica F- Analise microscópica TESTE DA ANTIGLOBULINA INDIRETO (TAI) OU COOMBS INDIRETO *presença de anticorpos livres no soro *vou pegar a hemácia reagende do laboratório e vou colocar no soro, para ver se vai ter sensibilização (antígeno), ai vai ter aglutinação, e ai vai ser positivo, é feito isso com um painel de reagente • Pesquisa de Anti-D • Pré-Natal – mãe Rh negativo • Tranfusão (doador Rh negativo e receptor Rh+ ) *tomar cuidado com os passos da técnica que é feito o teste, pq pode interferir no resultado Painel de hemácias Painel formado por 11 lotes de hemácias -10 lotes de obtidos de doadores do tipo O -1 lote obtido de sangue de cordão umbilical de recém- nascidos do grupo O *tatestando 11 tipos diferentes de doadores, para ver a reação, ai é positivo se tiver aglutinação e zero se não teve PROVA CRUZADA *pega o sangue do doador e coloca direto na amostra do receptor e ve como reage -utilizada ára transfusões sanguíneas ou transplante de órgãos -finalidade de determinar a presença de anticorpos pré- formados no sangue do receptor contra as células do possível doador *se utiliza mais a maior Prova cruzada maior e menor Maior -finalidade de testar glóbulos vermelhos do doador contra o soro do receptor Menor: -finalidade de testar os glóbulos vermelhos do receptor contra o soro do doador (desuso) Homogeneizar e submeter os tubos as todas as fases do tetse de Coombs indireto Temperatura Meio proteico 37c Coombs Verificar a presença ou não de aglutinação ff
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