TICS 2 - Sistema CRISPR-Cas9

Prévia do material em texto

Nome: Edith Coradi Bisognin 4º Período - Medicina Data: 16/08/2022 
 
TICS 2 – CRISPR-Cas9 
 
Encaminhe uma resenha com o funcionamento do Sistema CRISPR-Cas9, incluindo os 
tipos possíveis de reparo no DNA. 
O sistema CRISPR-Cas9 é formado a partir de conjuntos de repetições palindrômicas curtas, 
agrupadas e regularmente interespaçadas. Através do CRISPR-Cas9 é possível realizar a edição 
do genoma através da clivagem do DNA pela Cas9 (endonuclease), que será guiada a partir de 
uma sequência de RNA, a qual por sua vez, é capaz de se parear com as bases de uma sequência-
alvo. As repetições e os espaçadores quando são transcritos formam o RNA transativador (RNA 
guia), o qual é responsável pelo direcionamento da enzima Cas9 ao seu alvo. Após a clivagem, 
a maquinaria molecular intrínseca do organismo, responsável pela correção de erros no genoma, 
é utilizada para modificar a sequência de DNA, adotando a alteração. 
A Cas9 é uma enzima que detém dois domínios de nuclease, um deles é denominado HNH e 
possui a função de clivar a fita complementar a sequência do RNA guia; já o segundo domínio, 
chamado RuvC, é necessário para clivar a fita não complementar (a sequência não alvo). 
O sistema é ativado quando o vírus entra na bactéria, e o mesmo funciona como um sistema 
imunológico das bactérias. O CRISPR-Cas9 vai armazenar as sequências de DNA do agente 
invasor na sua “memória imunológica” e será direcionado para clivar essa determinada região 
do DNA invasor, com alta especificidade. O DNA quando clivado é adicionado a uma das 
seguintes vias: 
1. Reparo dirigido por homologia: utilizado para corrigir modificações na sequência 
genética ou inserir uma mutação especifica 
2. Via de reparo de DNA por “junções de ponta não homólogas”: nessa via a junção 
ocorre a partir das pontas geradas pelo corte, a qual terá predisposição a erros, que pode 
ocasionar deleções e inserções de nucleotídeos onde se deu o corte, resultando em uma 
sequência não funcional 
O sistema CRISPR-Cas9 tem um potencial elevado como ferramenta para o tratamento de 
doenças como neoplasias, doenças infecciosas (hepatite B e HIV) e doenças monogênicas; 
novos estudos ainda mostram o potencial desse sistema para corrigir distrofia muscular, 
hemofilia e deficiência de alfa1-antitripsina. 
 
REFERÊNCIAS: 
 
• SGANZERLA, A.; PESSINI, L. Edição de humanos por meio da técnica do Crispr -cas 9: 
entusiasmo científico e inquietações éticas. Saúde em Debate, v. 44, n. 125, p. 527–540, 
jun. 2020 
• AREND, M. C. et al. The CRISPR/Cas9 System and the Possibility of Genomic Edition 
for Cardiology. Arquivos Brasileiros de Cardiologi a, v. 108, n. 1, p. 81–83, 1 jan. 2017. 
 
Nome: Edith Coradi Bisognin 4º Período - Medicina Data: 16/08/2022