Tics CRISPR

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CENTRO UNIVERSITÁRIO TOCANTINENSE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS
Tecnologia da Informação e comunicação (TICs) – semana n° 3
Professor: Lilian Cristhian Santos Rocha 
Aluno(a): 4º Período
Sistema CRISPR/Cas9
1. Encaminhe uma resenha com o funcionamento do Sistema CRISPR-Cas9, incluindo os tipos possíveis de reparo no DNA?
 O CRISPR/Cas9 é um sistema de defesa bacteriano contra o vírus invasores, que detecta um DNA viral já conhecido, produz duas fitas de RNAs curtos, onde uma delas terá a sequência correspondente a do vírus invasor. Ele funciona por agentes endógenos de reparo e recombinação para completar o processo de clivagem, como introns de auto-emenda, nucleases de dedo de zinco e nucleases efetoras. 
 Ele atua quando um vírus invade a bactéria e parte de seu DNA é inserido no genoma do hospedeiro, sendo intercalado com sequências repetidas. As endonucleases Cas1 e Cas2 formam um complexo que promove a clivagem de uma porção do DNAviral, e estes fragmentos são direcionados e introduzidos no genoma bacteriano. Durante a transcrição o DNA dá origem a um RNA mensageiro ao qual várias moléculas de tracRNA se ligam. Essa ligação auxilia a clivagem do RNA mensageiro originando fragmento de crRNA, este complexo tracRNA e crRNA se associa a endonuclease Cas9 a qual é responsável por promover a clivagem de um DNA invasor. Eles se ligam ao DNA viral e reconhecem o domínio PAM, a endonuclease Cas9, clivam a dupla fita e desta forma impossibilita a progressão da infecção. 
 As alterações na sequência guia do sgRNA podem ser usadas para programar o sistema para atingir sequência do DNA de interesse, desde que seja adjacente a um PAM. Na ausência da PAM o DNA alvo não é reconhecido pela Cas9 mesmo que a sequência de nucleotídeosdo sgRNA seja totalmente complementar. 
 A inativação de um gene fica ainda mais simples dispensando a necessidade de um DNA doador, mas envolvendo apenas a atuação do sistema CRISPR/Cas9, que realiza a clivagem em um sítio específico ou em mais regiões contando que haja complementaridade com RNA guia. A inserção aleatória de mutações no DNA em decorrência da sistema de reparação após a clivagem da CRISPR/Cas9 alterando a matriz de leitura do gene e consequentemente sua transcrição.
RELAÇÃO TEÓRICO PRÁTICA
 O m CRISPR-Cas9 é um sistema de edição de DNA. Ele vem crescendo devido a possibilidade de desativar genes que estejam prejudicando toda a funcionalidade de um organismo.
REFERÊNCIAS 
al. TÉCNICA CRISPR-CAS9 E SUA UTILIZAÇÃO NA ÁREA LABORATORIAL .Brazilian Journal ofSurgery and Clinical Research - BJSCR / V. 25,n2,pp.96-99 (Dez 2018 - Fev 2019). (ISSN online : 2317-4 4 04).