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1. O que seria soro de Coombs? Qual a sua função? O soro de Coombs tem anticorpos produzidos em coelhos que auxiliam na busca por autoanticorpos, tentando reproduzir in vitro o que ocorreria in vivo. 2. Descreva o teste de Coombs direto e indireto, citando a função de cada um. O teste de Coombs Direto é usado na prova de reações hemolíticas transfusionais, doença hemolítica perinatal, anticorpos induzidos por medicamentos e AHAI. Já o Indireto funciona na detecção e identificação de anticorpos, tipagem de antígenos eritrocitários e na prova cruzada 3. Qual a diferença entre soro de Coombs monoespecífico e poliespecífico? O soro monoespecífico é usado quando precisa de confirmação de qual o anticorpo está causando a hemólise, IgG, IgM ou a proteína do complemento C3. Já o poliespecífico é usado é uma busca ampla, quando não se sabe a causa, ele identifica IgG e proteína C3. 4. O que são Anticorpos Irregulares? Como pesquisamos esses elementos? Porque realizamos o PAI? Anticorpos irregulares são formados por imunização devido a transfusões, gestação ou ingestão de material imunogênico seja ele IgG ou IgM. Encontramos esses anticorpos pelo teste de Pesquisa de Anticorpos Irregulares (PAI), realizamos o teste para detecção e identificação de anticorpos, tipagem de antígenos eritrocitários e na prova cruzada 5. Um paciente que apresente Rh negativo, não pode ser verdadeiramente chamado de Rh negativo sem realizar uma prova chamada de.... A. Diga de que prova se trata. B. Descreva a técnica. Não podemos confirmar se o Rh do paciente é negativo antes de fazermos a prova da Variante Du. É colocado duas gotas do sangue do paciente logo em seguida é colocado duas gotas de Anti-D. Coloque para centrifugar e verifique se houve aglutinação. 6. Qual a utilidade da realização da prova cruzada? Como é dividida? A prova cruzada é usada para evitar reações hemolíticas de ocorrerem devido a transfusão sanguínea. Ela pode ser dividida em Maior e Menor 7. Descreva a técnica de prova cruzada, de forma a ser mais completa possível. A prova cruzada maior usa o soro do receptor e as hemácias do doador. Prova menor usa o soro do doador e as hemacias do receptor. 8. Segundo portaria, quais os testes devem ser realizados na bolsa de doação antes da liberação da mesma para a transfusão. Devem ser realizados testes sorológicos como Sifilis, HBV, HCV, Chagas, HIV e HTLV 9. Cite em cada doença a serem pesquisadas, as metodologias por detrás, dividindo-as em provas de ligação primária e secundária. Sífilis: 1° FtaAbs 2° VDRL HBV: HBSAg; Anti-HBSAg, HbeAg, Anti HbeAg, HbcAg, Anti HbcAg HCV: Anti HCV IgM e IgG Chagas: 1° ELISA 2° Reação fixação complemento HIV e HTLV:1° ELISA 2° Imunocromatográfico 10. Explique: a. Cut off ou limiar de reatividade. b. Sensibilidade do teste. c. Especificidade do teste. d. Testes de ligação primária. e. Testes de ligação secundária. f. Efeito prozona. 11. Se dissermos que um teste sorológico para hepatite, segue a metodologia para ELISA por competição para antígenos, o que isso significa? Um anticorpo fixado à lâmina é o alvo. Coloca-se o antígeno da amostra e o do kit, os dois precisam se ligar ao anticorpo. Se tem baixa de antígeno da amostra, vai ter mais agregação do kit com o anticorpo e produz mais fluorescência 12. Quais são os marcadores para hepatite B mais importante? Cite a importância de cada um. HbsAg - indica o antígeno de superfície do virus, indica infecção do vírus HbcAg - indica o antígeno do core do virus, fase de incubação/desenvolvimento HbeAg - indica o antígeno do envelope do vírus, fase de replicação viral 13. Explique a técnica de fixação do complemento de Guerreiro e Machado. Tecnica usada para testes de Chagas. Busca a aderencia do complemento ao antígeno, indicando forte presença do indicador patológico na amostra. 14. Qual o protocolo segundo o Ministério da Saúde para a liberação do resultado de HIV? Caso realizado o teste rápido, buscar realizar testes de maior sensibilidade para comprovar a presença do vírus. Comprovar com ELISA e por último Western Blot. 15. O que é NAT? E qual a importância da sua incorporação na triagem dos testes transfusionais? Teste de detecção de ácido nucleico de alta sensibilidade que possibilita a identificação do genoma viral no plasma antes mesmo da produção de anticorpos. 16. Western Blot, é uma técnica padrão ouro para qual a doença? Explique a técnica. Padrão ouro para detecção de HIV. Tecnica que busca as proteinas especificas do virus por meio de eletroforese em gel. 19. Pesquise quais as reações transfusionais mais frequentes, citando suas possíveis características sintomatológicas. Hemolise intravascular: principalmente causada por incompatibilidade de sistema ABO. Erros iatrogenicos Hemolise extravascular: caracterizada por alta sintomatologia como febre, dor lombar, angústia intensa. Geralmente de 30 a 120 minutos depois de iniciada a transfusão Reção transfusional não hemolitica febril: associado a presença de anticorpos contra os antígenos HLA do paciente. Febre pode também ser indicativo de infecção ou hemólise Reação alergica: dividida em tres etapas, da mais leve a grave, a primeira indicando prurido, urticária, placas eritematosas, moderada com edema de glote e de quincke (inchaço na boca) e grave com o choque anafilático TRALI: anticorpos anti leucocitários que causam lesão pulmonar aguda, onde esses anticorpos se ligam a antígenos de leucócitos do receptor, causando eventos imunológicos Sobrecarga volêmica: erro iatrogenico! mais bolsas que o necessa´rio ou rapida transfusão Infecção bacteriana: endotoxinas de bacterias psicrofilas 3. Como podem ser classificadas as reações transfusionais? R: Agúda ou crônica. Imune ou não imune. 4. O que é uma reação transfusional aguda? R: É a reação transfusional que ocorre durante a transfusão ou até 24 horas após. 5. O que é uma reação transfusional tardia? R: É a reação que ocorre após 24 horas, podendo ocorrer em dias ou semanas após a transfusão. 6. Explique a reação hemolítica aguda. R:É a reação mais grave , pois coloca em risco a vida do paciente devido a hemólise intravascular. Está diretamente relacionada à incompatibilidade no sistema ABO. 7. Quais fatores podem desencadear erros/falhas durante a transfusão sanguinea? R: Identificação errada na bolsa de sangue ou erro na identificação do paciente no hospital. 8. Quais os principais dados conferidos antes de iniciar o procedimento de transfusão sanguínea? R: Nome completo, legível e sem abreviações, data de nascimento, número da identificação hospitalar, rótulos do doador/receptor e dados imunohematológicos (doador/receptor). 9. Segundo exigências da ANVISA. Quais dados vitais devem ser monitorados pelo profissional durante o procedimento de transfusão de sangue? R: Pressão arterial, frequência respiratória, temperatura e frequência cardíaca. Antes, durante e depois. 10.Segundo a portaria 158/2016 (Ministério da Saúde) Quais doenças transmitidas pelo sangue são obrigatoriamente investigadas durante a triagem laboratorial do doador? R: Sífilis, doença de chagas, hepatite B, hepatite C, HIV, HTLV I e II. 11.Explique o ensaio de elisa indireto. Placa sensibilizada com Antígeno; Coloca a amostra do paciente;Lavar; Inserir anticorpo anti imunoglobulina humana conjugado a enzima; Lavar; Dar substrato a enzima. 12.Para diagnóstico de Hepatite B, podemos pesquisar: Explique cada um desses marcadores. HBs-Ag : Detecta antígenos de superfície do vírus da hepatite B Anti-HBs : Detecta anticorpo contrao antígeno de superfície dovírus da hepatite B Anti-HBc (IgG/igM) : Detecta anticorpo IgG/ IgM contra o antígeno CORE do vírus da hepatite B ALT (Alanina aminotransferase) : Detecta lesão hepática. 13.Diferencie ensaio imunoenzimático de imunofluorescência. R: Ensaio imunoenzimático é feito através de imunoabsorção enzimática e o ensaio de imunofluorescência é feito através do anticorpo ligado a substância fluorescente. 14.Explique o ensaio de hemaglutinação indireta. 15.Diferencie testetreponêmico de teste não treponêmico. R: O teste treponêmico, detecta os anticorpos contra antígenos do Tremponema Pallidum, através dos métodos de ELISA e FTA-ABS. Já o teste não treponêmico, detecta os anticorpos não específicos para Treponema Pallidum, porém presentes na sífilis (IgG e IgM). 16.Qual a importância do VDRL para o diagnóstico da Sífilis? R: É importante, pois possui alta sensibilidade, baixo custo e rápida negativação em resposta ao tratamento, sendo ideal para o rastreamento da sífilis e para o controle de cura. 17.Como funciona um teste rápido para HIV? R: Com 2 gotas (20 μl) de sangue aplicadas no teste, junto de 1 gota (40 μl), aguardando 15 minutos, aparecendo uma barra vermelha ao lado da letra C o resultado é negativo, se aparecer duas barras vermelhas ao lado da letra C e T, o resultado é positivo. 18.Sabemos que até o momento o sangue não apresenta substitutos, porém em artigos lidos e discutidos em sala falamos sobre os avanços ciêntificos que objetivam criar alternativas para recusa na doação de sangue por parte de indivíduos de algumas religiões, como por exemplo as testemunhas de Jeová. Nos artigos discutidos vimos que a ciência busca substituir o concentrado de hemácias por componentes produzidos sinteticamente. Disserte sobre o tema explicando o modelo proposto pela ciência a fim de resolver esta problemática.
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