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Citação: Borges, F.S. , Meyer, P. , Jahara, R. , de Morais Carreiro, E. , Antonuzzo, P. , Picariello, F. and Di Palma, C. (2021) Fundamentals of the Use of Ozone Therapy in the Treatment of Aesthetic Disorders: A Review. Journal of Biosciences and Medicines, 9, 40-70. doi: 10.4236/jbm.2021.912005. VERSÃO TRADUZIDA: Fundamentos do uso da ozonioterapia no tratamento de distúrbios estéticos: Uma revisão Fábio dos Santos Borges 1 * , Patricia Froes Meyer 2 , Rodrigo Soliva Jahara 3 , Eneida de Morais Carreiro 2 , Pietro Antônio Antonuzzo 4 , Felice Picariello 5 , Cesare Di Palma 6 1Estácio de Sá University, Rio de Janeiro, Brazil. 2University Center of Rio Grande do Norte (UNIRN), Natal, Brazil. 3Gama Filho University (UGF), Rio de Janeiro, Brazil. 4Smart Clinic, Policlinico San Donato E Wellness Clinic Palazzo Della Salute— Gruppo San Donato, Milan, Italy. 5Università degli Studi di Napoli Federico II, Napoli, Italy. 6Ospedale A. Cardarelli di Napoli, Napoli, Italy. DOI: 10.4236 / jbm.2021.912005 Resumo Considerando o grande interesse de muitos profissionais pelo fundamento que norteia o uso efetivo da ozonioterapia no tratamento dos distúrbios estéticos, este estudo tem como objetivo definir os aspectos fisiológicos e práticos do uso da mistura oxigênio-ozônio na solução de problemas estéticos. Foi realizada uma pesquisa exploratória, apresentada em uma revisão narrativa, para evidenciar a ação da ozonioterapia no tratamento das afecções estéticas. A revisão explorou artigos científicos, livros, teses e dissertações publicadas e disponíveis nas seguintes bases de dados: MEDLINE (Medical Literature Analysis and Retrieval System Online), PubMed (National Library of Medicine), SCIELO (Scientific Electronic Library Online) e LILACS ( Literatura Latino Americana e do Caribe em Ciências da Saúde). Além disso, foram acrescentados elementos que caracterizam a experiência clínica dos autores com a ozonioterapia em diversos protocolos de tratamento estético. Encontramos diversos relatos na literatura que justificam o uso do ozônio e suas diferentes modalidades terapêuticas em diversas afecções estéticas, principalmente no tratamento de gordura localizada, celulite, rejuvenescimento, reparação de tecidos cutâneos, acne, discromia, entre outros. Por meio de suas diversas modalidades terapêuticas, concluímos que a ozonioterapia tem agregado muito aos procedimentos estéticos, principalmente por sua efetiva ação coadjuvante ou como principal agente de alterações fisiológicas críticas para potencializar os resultados clínicos no tratamento de condições estéticas. Palavras-chave Ozônio , ozônio Therapy , Celulite , rejuvenescimento , acne 1. Introdução Segundo Rubin [ 1 ], em 13 de março de 1839, Christian Schönbein chamava atenção para o fato de que a eletrólise da água provoca um odor característico desenvolvido na região do eletrodo positivo da corrente polarizada. Esse odor existia, é claro, desde a ocorrência de um raio na presença de uma atmosfera de oxigênio na Terra, e isso era conhecido como o "odor de eletricidade". Schönbein propôs o nome de ozônio para a nova substância, já que a palavra ozônio vem do grego script para odor, ozein [ 1 ]. Em 1848, Hunt pesquisou as propriedades oxidantes do ozônio e definiu que sua estrutura molecular era formada por um triângulo triatômico de oxigênio, uma forma alotrópica do O 2 . Em 1950, dois médicos alemães, Joachim Hänsler e Hans Wolff, fabricaram o primeiro gerador médico de ozônio, com o qual foi possível dosar e graduar as concentrações da mistura oxigênio-ozônio [ 2 ] [ 3 ]. A terapia com ozônio tem sido usada e amplamente estudada por muitas décadas; sua ação terapêutica é comprovada, consistente e com efeitos colaterais mínimos, visto que o ozônio é considerado uma biomolécula, pois é produzido naturalmente pelos neutrófilos ativados quando participam da defesa do organismo [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ]. Sua eficácia na promoção da saúde em geral é notória em todo o mundo. Porém, além de promover a saúde, o uso da ozonioterapia no tratamento das disfunções estéticas já é uma realidade, com bons resultados clínicos, desde o início da década de 2000, principalmente na Rússia [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ]. Atualmente, encontramos respaldo na literatura para o uso da mistura de oxigênio-ozônio no tratamento de diversas disfunções estéticas, como gordura localizada, celulite, rugas e flacidez, acne, hipercromia, estrias, telangiectasias etc. [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] [ 14 ] [ 15 ]. As principais vias de administração utilizadas para o tratamento das afecções estéticas são as transcutâneas, como bolsas, compressas, copos, óleo ozonizado, água ozonizada, e as invasivas, como insuflação retal, e injeção de gás, intradérmica e subcutânea [ 16 ] [ 17 ] [ 18 ] [ 19 ] [ 20 ]. Dado o grande interesse de muitos profissionais pelo fundamento que norteia o uso efetivo da ozonioterapia no tratamento dos distúrbios estéticos, este estudo tem como objetivo descrever, por meio de uma revisão da literatura, os aspectos fisiológicos e práticos do uso da mistura de oxigênio-ozônio no tratamento. problemas estéticos. 2. Materiais e métodos Este estudo caracteriza-se por uma pesquisa exploratória, apresentada por meio de uma revisão narrativa, para evidenciar a ação da ozonioterapia no tratamento das afecções estéticas. A revisão explorou artigos científicos, livros, teses e dissertações publicadas e disponíveis nas seguintes bases de dados: MEDLINE (Medical Literature Analysis and Retrieval System Online), PubMed (National Library of Medicine), SCIELO (Scientific Electronic Library Online) e LILACS ( Literatura da América Latina e Caribe em Ciências da Saúde). Como critérios de inclusão, foram selecionadas fontes que mencionassem a condição estética ou descrevessem a fisiologia da ozonioterapia relacionada à condição tratada. As fontes que não apresentavam o resumo, não foram alocadas em periódicos científicos e não abordavam a temática do estudo, bem como aquelas que não permitiam uma coleta de dados confiável e aquelas que não permitiam uma coleta de dados confiável foram descartadas. O levantamento bibliográfico foi realizado nas línguas portuguesa, inglesa, espanhola e russa / ucraniana, com os seguintes descritores: ozone, ozone therapy, esthetic affections, celulite, localized fat, estrategas, rugas e acne. 3. Resultado e discussão A busca nas bases de dados revelou 31 estudos relacionados à ozonioterapia como recurso eficaz para o tratamento dos distúrbios estéticos, publicados no período de 2004 a 2021. A seguir, descreveremos os aspectos fisiológicos que orientam a ação do ozônio direta ou indiretamente para o tratamento das diversas condições estéticas e os protocolos de tratamento descritos na literatura e comumente encontrados no mercado de estética brasileiro. 4. Fisiologia do ozônio aplicada a disfunções estéticas Começamos descrevendo alguns aspectos fisiológicos importantes que estão diretamente ligados à ação do ozônio em diversas condições estéticas para entender seu mecanismo de ação e como podemos utilizá-lo no tratamento. 4.1. Estímulo circulatório e aumento da oxigenação dos tecidos Diversas afecções estéticas necessitam de incremento circulatório para sua recuperação, como celulite, deiscência cirúrgica, ruptura de pontos de sutura, áreas necróticas, etc. Portanto, o uso de ozônio aplicado de forma sistêmica ou local pode ser um poderoso aliado no tratamento dessas situações clínicas. O uso do ozônio terapêutico pode aumentar a produção de óxido nítrico (NO), aumentando a microcirculação local, podendo gerar efeitos benéficos nas doenças crônico-degenerativas, principalmente nas doenças vasculares crônicas. Além disso, embora o NO tenha meia-vida de menos de 1 segundo quando ligado às proteínas, ele pode exercer vasodilatação em sítios vasculares isquêmicos distantes, produzindo efeitos terapêuticosrelevantes [ 4] Na auto- hemoterapia, por exemplo, as células endoteliais podem ser ativadas pela albumina-LOP e pelos S-nitrosotióis e S-nitrosohemoglobina (precursores do NO) plasmáticos, aumentando assim a produção de óxido nítrico. Além disso, além de melhorar a circulação sanguínea, há também maior entrega de oxigênio aos tecidos por meio do aumento dos níveis de 2,3-difosfoglicerato (DPG) (efeito combinado de NO e monóxido de carbono), diminuindo assim a afinidade da hemoglobina pelo oxigênio, o que leva a um aumento na quantidade de oxigênio liberado para os tecidos. Assim, aumenta-se a quantidade de oxigênio que vai para a célula, o que pode reduzir as zonas hipóxicas, efeito especialmente indicado para casos de celulite, necrose tecidual pós-operatória etc. [ 4 ] [ 20 ] [ 21 ] [22 ]. 4.2. Anti-inflamatório Os processos inflamatórios podem estar presentes em diversas afecções na área estética, sendo o uso do ozônio nos tecidos inflamados uma das ações mais marcantes desse recurso terapêutico na estética. O uso de ozônio pode reduzir a produção de citocinas pró-inflamatórias, como Interleucina-2 (IL-2), Interleucina-4 (IL-4), Interferon-Gama (IFN- γ ), Fator de Necrose Tumoral-Alfa (TNF) - α ), Interleucina 17a (IL-17a), Transforming Growth Factor- β (TGF- β ), Interleucina-1 β (IL-1 β ) e Interleucina-6 (IL-6) que estão aumentados em processos inflamatórios, incluindo as crônicas e, ao diminuir esses mediadores pró-inflamatórios, também pode reduzir a dor inflamatória [ 23 ] [ 24 ] [ 25 ]. Segundo alguns autores, outras ações bioquímicas do ozônio no combate à inflamação são: aumento da lipoproteína de alta densidade (tem ação antiinflamatória); e reduzir alguns compostos inflamatórios, como proteína C reativa, colesterol total, lipoproteína de baixa densidade, triglicerídeos e homocisteína [ 14 ]. O ozônio também pode oxidar compostos com ligações duplas de carbono, como o ácido araquidônico e seus derivados (prostaglandinas e leucotrienos), que são substâncias biologicamente ativas que participam da manutenção de processos inflamatórios [ 26 ]. Existe também outro fator de transcrição essencial associado ao processo inflamatório, o Fator Nuclear Kappa-B (NF- κ B), que é um complexo proteico que ativa diversas respostas celulares e é estimulado por algumas citocinas (IL- 1 e TNF- α ) e por espécies reativas de oxigênio (ROS), associadas ao estresse oxidativo [ 27 ]. No entanto, uma das ações mais enfatizadas na literatura sobre a ação antiinflamatória do ozônio baseia-se em seu efeito sobre o Fator Nuclear Eritróide 2 Relacionado ao Fator 2 (Nrf2), que é uma proteína poderosa localizada dentro de cada célula do corpo. (Ligado à proteína Keap-1). Quando ativada, induz a síntese de enzimas antioxidantes, como Superóxido Dismutase (SOD), Catalase (CAT), Heme Oxigenase 1 (HO1), entre outras [ 28 ]. A função primária do Nrf2 é responder ao estresse oxidativo ativando genes antioxidantes [ 29 ]. É o principal regulador da resposta antioxidante do corpo [ 30 ]. O uso do ozônio é capaz de estimular o Nrf2, gerando um ótimo efeito antioxidante. Com isso, é possível obter a inibição do NF- κ B, conseqüentemente, diminuição do processo inflamatório. Nrf2 pode modular a inflamação por meio da supressão de genes pró-inflamatórios diretamente ou por meio da inibição de NF- κ B [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ]. O tratamento sistêmico com ozônio aumentou os níveis de Nrf2 nas células mononucleares do sangue periférico, com consequente melhora da atividade da superóxido dismutase e da catalase. O ozônio sistêmico em ratos ativou o Nrf2 e inibiu a via do NF κ B; assim, foi capaz de ativar enzimas antioxidantes e diminuir citocinas inflamatórias em rins de animais, diminuindo a insuficiência renal e o dano tubulointersticial [ 34 ]. A insuflação retal com ozônio em pacientes com esclerose múltipla aumentou a expressão de Nrf2 em células mononucleares, melhorando a atividade de enzimas antioxidantes e reduzindo os níveis de citocinas pró- inflamatórias [ 35 ]. O efeito protetor da terapia com ozônio na infecção grave por SARS-CoV-2 foi alcançado por meio de sua propriedade antiinflamatória por meio do aumento da atividade antioxidante do Nrf2 [ 31 ]. Na clínica estética nos deparamos com diversas situações que requerem ação antiinflamatória, como celulite, envelhecimento cutâneo, acne, pós- operatório, rosácea, dermatites, hematomas, psoríase, etc. Nestes casos, a ozonioterapia terá um papel importante. papel significativo na remissão ou controle dessas afecções por meio de um potente efeito antiinflamatório. 4.3. Antibacteriano Os lipídios insaturados são os principais componentes da membrana citoplasmática presente nas bactérias. O ozônio ataca as ligações olefínicas (hidrocarbonetos) das membranas, destruindo a capacidade funcional da célula, que pode até ser suficiente para causar sua morte. Portanto, a membrana bacteriana é o primeiro local de ataque do ozônio, e a morte da bactéria ocorre principalmente com o rompimento da membrana celular bacteriana [ 6 ] [ 25 ] [ 35 ]. Autores também relataram que, durante a ação do ozônio, os fosfolipídios e lipoproteínas da membrana celular bacteriana são oxidados. Isso perturba a integridade da membrana citoplasmática, fazendo com que o ozônio se infiltre nos microrganismos e oxide glicoproteínas e glicolipídios, bloqueando sua função enzimática [ 4 ] [ 36 ]. Os microrganismos suscetíveis ao ozônio incluem os aeróbios e anaeróbios, como Campylobacter , Clostridium , E. coli , Klebsiella , Mycobacterium , Pseudomonas , Salmonella , Staphylococcus e Streptococcus . Os autores descobriram que o ozônio reduziu a contagem de pseudomonas aeruginosa (uma bactéria muito resistente aos antibióticos devido à sua membrana bacteriana dupla) de 100.000 / UFC para 350 / UFC [ 37 ] [ 38 ]. Muitas pessoas questionam se o ozônio também não seria capaz de danificar a membrana celular do corpo ao atacar a estrutura lipídica da membrana da bactéria. A resposta é não porque, segundo alguns autores, o ozônio é seguro para as células humanas porque sua ação germicida é baseada no estresse oxidativo transitório (produzido pelo ozônio), letal para os microrganismos, por apresentarem defesas antioxidantes precárias. Alguns microrganismos carecem de algumas enzimas antioxidantes (catalase e glutationa peroxidase) - presentes nas células humanas - essas enzimas seriam capazes de neutralizar a ação oxidativa do ozônio, o que não ocorre com as bactérias [ 39 ] [ 40 ]. As ações antibacterianas do ozônio na estética ocorrem principalmente no tratamento de acne e feridas abertas, principalmente ulcerações, e aquelas associadas ao pós-operatório de cirurgia plástica, como deiscência cirúrgica, necrose cicatricial, infecção nos pontos de sutura, etc. 4,4. Redução do estresse oxidativo O estresse oxidativo é caracterizado pelo acúmulo de espécies reativas de oxigênio (ROS), geradas como subprodutos de fatores de estresse fisiológicos ou exógenos (como a ionização por radiação) [ 33 ]. As espécies reativas de oxigênio (ROS) e de nitrogênio (RNS) (constantemente produzidas em organismos aeróbios) são subprodutos do metabolismo normal do oxigênio e incluem radicais livres, como ânion superóxido (O 2− ), radical hidroxila (OH), oxigênio singlete, e peróxido de hidrogénio (H 2 O 2 ) [ 41 ]. Em pequenas concentrações, as ROS atuam como sinalizadores celulares, contribuindo para funções celulares importantes, como proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. Altas concentrações podem levar à morte celular ao danificar macromoléculas celulares, como DNA, proteínas e lipídios. As células possuem um sistema de defesa antioxidante; entretanto, a produção excessiva de ROS pode levar ao desequilíbrio redox celular (desequilíbrio entre a ação das ROS e a capacidade antioxidante celular). Assim, o aumento da geração de ROS e / ou disfunção do sistema antioxidante pode levarao quadro de estresse oxidativo [ 42 ]. A eficácia terapêutica da ozonioterapia se deve à geração de estresse oxidativo controlado e moderado produzido pelas reações do ozônio com diversos componentes biológicos. Portanto, a eficácia ou toxicidade do ozônio pode depender da força do estresse oxidativo. O estresse oxidativo severo ativa o NF κ B, resultando em resposta inflamatória e dano tecidual pela produção de diversas substâncias (Ciclooxigenase-2, Prostaglandina-2 e citocinas). Em contraste, o estresse oxidativo moderado ativa outro fator de transcrição nuclear, Nrf2, que induz uma resposta antioxidante benéfica para o corpo [ 43 ]. Recomendamos a manutenção do equilíbrio redox, pois segundo alguns autores [ 29 ] [ 43 ], o aumento do estresse oxidativo pode gerar importantes respostas biológicas, incluindo repercussões na estética clínica. Aqui estão alguns deles: 1) O estresse oxidativo modula diretamente a diferenciação das células adiposas (pré-adipócitos 3T3L1), o que pode aumentar a adipogênese dos adipócitos resistentes à insulina e, consequentemente, gerar sobrepeso (obesidade). 2) Combatendo os efeitos do estresse oxidativo, o antioxidante NQO1 preveniu e diminuiu a massa de tecido adiposo abdominal (em ratos). 3) O aumento do estresse oxidativo está associado ao envelhecimento, tanto funcional quanto estético. 4) Pode haver inflamação (modulada por NFkB) levando a danos nos tecidos. Com base no exposto, identificamos que o ozônio, com sua capacidade oxidante natural, pode gerar estresse oxidativo leve ou moderado. Isso faz com que o corpo responda aumentando a ação do Nrf2, e assim, gerar alguns efeitos benéficos, como Níveis aumentados de antioxidantes diretos, como glutationa reduzida (GSH), monóxido de carbono e bilirrubina; níveis aumentados de enzimas que desintoxicam oxidantes, como catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), glutationa transferase (GSTr), NADPH-quinona oxidoredutase (NQO1), heme oxigenase-1 (HO-1) proteína de choque final 70 (HSP70), etc.; inibição da inflamação mediada por citocinas através da indução da redutase do leucotrieno B4; reconhecimento, reparo e remoção de proteínas danificadas; e proteção contra apoptose induzida por estresse oxidativo [ 43] Além disso, neste contexto, o Nrf2 pode modular a inflamação por meio da manutenção da homeostase redox e resultar em proteção contra doenças neurodegenerativas, como as doenças de Alzheimer e Parkinson (reversão do estresse oxidativo crônico) [ 33 ] [ 43 ]. O estresse oxidativo tem sido associado à incidência de diversas condições estéticas, principalmente gordura localizada (celulite, discromia), envelhecimento dermoepidérmico, acne, etc. Portanto, entendemos que o aumento do estresse oxidativo é um dos principais fatores responsáveis pela causa e manutenção de diversas disfunções estéticas. Assim, vemos a terapia com ozônio como uma grande aliada para o tratamento [ 33 ] [ 44 ] - [ 49 ]. 4.5. Reparador tecidual Uma das principais ações da terapia com ozônio é o aprimoramento da reparação de feridas teciduais. No mapa de evidências clínicas, encontramos 13 estudos confiáveis que comprovam a eficácia da terapia com ozônio para o fechamento completo da ferida [ 50 ]. Diversas ações fisiológicas justificam a potente ação do ozônio na reparação tecidual. Conforme relatado anteriormente, o ozônio é capaz de causar estresse oxidativo leve ou moderado. Para tanto, conta com a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) [ 51 ] e, segundo alguns autores, as ROS participam do processo de reparo tecidual da seguinte forma: 1) Recrutar linfócitos para o local da ferida, para atuar no reparo tecidual efetivo ; 2) Regular a formação de vasos sanguíneos (angiogênese) e a perfusão sanguínea ideal na área de cicatrização; 3) Aumentar a imunidade por meio de fagócitos que induzem dano bacteriano; 4) Produz efeito bactericida e bacteriostático [ 52 ]. Em geral, a terapia com ozônio pode trazer diversos benefícios para acelerar o reparo tecidual em diversos processos de cicatrização, incluindo a liberação de fatores de crescimento como fibroblastos, derivados de plaquetas, transformador β e endotelial vascular; ação bactericida; ação antiinflamatória; aumento do tecido de granulação e reepitelização; maior vascularização; redução da dor local; diminuição do edema; estimulação da contração do tecido e redução da extensão e profundidade das feridas [ 52 ] - [ 57 ]. A eficácia do ozônio em feridas cutâneas em ratos (após 7 e 14 dias) resultou em um aumento na diferenciação miofibroblástica e densidade microvascular, um aumento na quantidade de fator de crescimento de fibroblastos-2 (FGF2) na epiderme e derme, tecido de granulação com menos células inflamatórias e mais fibroblastos e células endoteliais e, finalmente, deposição mais significativa de colágeno Tipo 1 [ 58 ]. As culturas de células mostraram que a migração de fibroblastos induzida por ozônio, indicando que pode auxiliar na cicatrização de feridas [ 59 ]. Os autores descobriram que o peróxido de hidrogênio (H 2 O 2 ) pode induzir potentemente a expressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) em queratinócitos humanos, estimulando a cicatrização de feridas [ 60 ]. O óleo ozonizado tornou-se uma ferramenta eficaz para melhorar a reparação de tecidos em várias situações terapêuticas e pode ser usado com um procedimento com ozônio gasoso ou pode ser usado sozinho. No entanto, ainda existem divergências na literatura quanto à indicação e / ou efeito dos óleos ozonizados de acordo com seu índice de peróxidos. Para alguns autores [ 61 ], índices de peróxido baixos (abaixo de 1000 mEq) e maiores (acima de 3000 mEq) retardam a cicatrização de feridas cutâneas; Travagli et al. [ 62 ] recomendou uma concentração "média" (cerca de 1500 mEq) para um efeito mais benéfico na aceleração do fechamento da ferida. Outros autores [ 63] descobriram que níveis mais elevados de peróxido (1800 mEq, em comparação com 600 mEq) proporcionaram maior reepitelização de feridas em ratos. No entanto, ao comparar o óleo de aloe vera ozonizado e não ozonizado com pomada de gentamicina, quanto ao aumento do número de fibroblastos e espessura do colágeno após o processo de reparação tecidual, verificou-se que o óleo de aloe vera ozonizado gerou um aumento mais significativo no número de fibroblastos e espessura do colágeno. Também aumentou a velocidade de fechamento da ferida, mas não encontrou diferenças significativas entre os índices de peróxido dos óleos testados (600, 1200 e 1800 mEq) para o aprimoramento do reparo do tecido [ 64 ]. Em nosso entendimento, tanto o ozônio gasoso (injeção e bolsas) quanto o óleo ozonizado são excelentes recursos para aumentar os processos de reparo de tecidos, e isso torna a terapia com ozônio uma arma poderosa para minimizar complicações e atrasos no reparo de tecidos após a cirurgia plástica, como deiscência cirúrgica, tecido necrose, infecções de pontos de sutura, etc., bem como feridas e lesões cutâneas decorrentes de vários procedimentos estéticos, como criolipólise, peelings, lasers epilatórios, etc. 4,6. Lipolítico A interação do ozônio com o tecido adiposo está bem descrita na literatura e, portanto, podemos esperar bons resultados no tratamento da lipodistrofia estética. Um dos principais efeitos atribuídos à ação do ozônio no tecido adiposo é a peroxidação lipídica, que se caracteriza pela degradação oxidativa dos lipídios devido à alta reatividade ou poder oxidante do ozônio [ 4 ] [ 43 ] [ 65 ]. O ozônio pode quebrar os lipídios em vários derivados, como lipoperóxidos, hidroperóxidos e produtos de oxidação de lipídios de baixo peso molecular (LOPs). Assim, o ozônio pode interagir com as ligações duplas de carbono dos ácidos graxos poliinsaturados na bicamada lipídica das membranas celulares, dividindo-as (Ozólise). Isso reduz suas cadeias de longas para curtas, tornando-as hidrofílicas; portanto, essas cadeias lipídicas são fragmentadas (fosfolipídeos e lipoproteínas) por meio da oxidação, e isso pode danificar as paredes celulares que são compostas de fosfolipídeos e lipoproteínas [ 11 ] [ 15 ] [ 66 ]. Segundo alguns autores, a peroxidação lipídica produz modificações oxidativas que causam alterações nas propriedades físico-químicas das membranas celulares, como aumento da permeabilidade da membrana e alterações na fluidez geram “expulsão” do fluido intracelular, com risco de ruptura das membranas celulares (oxidação de fosfolipídios e lipoproteínas) e lise de organelas, com conseqüente morte das células adipocitárias [ 66 ] [ 67 ]. Os adipócitos foram expostos ao ozônio por 2 h, 24 h e 48 h, com concentrações de 10 μg, 20 μg e 100 μg. Os autores constataram que na concentração de 20 μg, após 24 h, pequenas gotículas lipídicas brotavam da superfície do adipócito e, 48 h depois, identificaram adipócitos com ligeiras depressões, enrugadas e com brotamento de muitas gotículas lipídicas. Na concentração de 100 μg, os adipócitos sofreram necrose evidente, com perda lipídica acentuada e organelas pouco reconhecíveis. Os autores não verificaram a incidência de apoptose [ 68 ]. Em um de nossos experimentos, injetamos a mistura de gás oxigênio- ozônio (5 ml em cada ponto, com concentração de 15 μg) diretamente no tecido adiposo subcutâneo. Após análise imunohistoquímica (análise da expressão do marcador CD68 - macrófagos), identificamos a presença de macrófagos no tecido tratado ( Figura 1 ) que, segundo alguns autores [ 69 ], tem sido associada à degeneração de diferentes tecidos, incluindo os tecido adiposo hipodérmico. Portanto, o acúmulo de macrófagos no tecido adiposo pode ser considerado a principal justificativa para a morte dos adipócitos. Assim, nossos achados corroboram os relatos de alguns autores [ 66 ] [ 67], que descrevem o uso do ozônio como um mecanismo eficiente de dano à membrana dos adipócitos, que pode levar à morte celular devido à peroxidação lipídica pós- aplicação do ozônio local. Além disso, também identificamos a ocorrência de lipólise localizada com o uso de ozônio no tecido adiposo tratado ( Figura 1 ). Embora o efeito da lipólise por meio da ozonioterapia ainda não esteja bem descrito na literatura [ 70 ], é mencionado o efeito da lipólise com ozônio no tratamento de um lipoma. Não há dúvida de que o ozônio atua de forma eficiente como agente lipolítico. Uma vez que o ozônio se dissolva na água intersticial, os lipídios são o substrato de ação preferencial e são decompostos em uma série de derivados decorrentes da peroxidação lipídica, o que poderia justificar o efeito da lipólise local [ 13] O ozônio ativa a circulação em todos os tecidos, promovendo a liberação de oxigênio para eles, proporcionando diversos efeitos, entre eles, a indução da lipólise [ 11 ]. O gráfico da lipólise mostra o aumento desse processo na área tratada com ozonioterapia. O segundo gráfico demonstra a presença de marcadores de macrófagos CD68 + no lado tratado, o que provavelmente demonstra a lise das células adiposas e o processo de fagocitose. Entendemos que o ozônio, principalmente quando injetado localmente no tecido adiposo subcutâneo, pode oxidar os componentes lipídicos da membrana celular, levando à morte dos adipócitos e consequente redução da gordura localizada inesteticamente potencializada também pelo estímulo da lipólise local. 5. Ozonoterapia e sua aplicabilidade em disfunções estéticas Atualmente, identificamos diversas alterações estéticas com grande potencial de resolução total ou parcial com o uso da ozonioterapia. Descreveremos a seguir algumas formas de tratamento para algumas afecções, destacando alguns protocolos utilizados em dosimetria e técnicas de aplicação local, sistêmica ou associada. Figura 1 . Efeitos nas células adiposas após a aplicação da terapia com ozônio. (A) células de gordura antes do tratamento; (B) Identificação de lipólise em tecido adiposo tratado; (C) Ausência de macrófagos (D) Presença marcada de macrófagos (marcador CD68) no tecido adiposo tratado com ozonioterapia. (Fonte: Autores). 5.1. Celulite Atualmente, a celulite talvez seja uma das afecções mais descritas na literatura com indicação de tratamento com ozonioterapia. O quadro clínico geral da celulite está intimamente associado às ações terapêuticas do ozônio. O tecido adiposo afetado pela celulite apresenta alto grau de estresse oxidativo [ 49 ]; Além disso, os autores relataram que também há uma correlação entre espécies reativas de oxigênio (ROS), estresse oxidativo e processos fibróticos na pele com celulite, incluindo o aumento da estimulação de fibroblastos [ 48 ] [ 49 ]. O “excesso” de gordura subcutânea (celulite subdérmica) também é comum, principalmente em graus mais avançados de celulite; também pode haver estagnação da microcirculação (paniculose), o que aumenta a passagem de albumina, fibrinogênio e imunoglobulinas pelos vasos, dando origem e / ou agravando a condição celulítica [14 ] [ 49 ]. Com base no exposto, descreveremos a seguir algumas justificativas para o uso do ozônio no tratamento da celulite. A ozonioterapia pode ativar o Nrf2 (regulador mestre da resposta antioxidante do organismo), diminuindo o estresse oxidativo local ou sistêmico, proporcionando assim um efeito retardador ou remitente da doença [ 33 ]. Além disso, o ozônio pode exercer uma ação antiinflamatória, reduzindo a produção de citocinas pró-inflamatórias, imunoglobulinas e mediadores inflamatórios que estão frequentemente associados à celulite [ 71 ] [ 72 ]. Em relação à celulite, por meio da oxidação lipídica nas ligações duplas de carbono dos ácidos graxos (Polinsaturados) da membrana dos adipócitos, o ozônio pode causar danos às paredes celulares dos adipócitos, causando lise e, portanto, reduzindo o tecido adiposo subcutâneo (celulite) [ 11 ] [ 15 ] [ 66] O efeito da lipólise pode potencializar essa diminuição, conforme verificado em nossos experimentos. Além desses efeitos, o uso do ozônio também pode ativar a microcirculação [ 4 ] e é capaz de eliminar os fluidos intersticiais estagnados (edema celulítico crônico) devido ao seu efeito hidrofóbico [ 15 ]. Por fim, a aplicação de ozônio no tecido adiposo subdérmico pode aumentar a elasticidade e o tônus da pele, além de reduzir a flacidez. Isso é importante nos casos de tratamento flácido da celulite, onde há comprometimento do tom da pele [ 47 ]. Na Tabela 1 , descrevemos os protocolos comumente sugeridos por alguns autores para o uso da ozonioterapia no tratamento da celulite. Apesar desses relatos, em nossa prática clínica usamos concentrações que podem chegar a 10 μg / ml (dependendo da dor relatada pelos clientes) ( Figura 2 ), e costumamos associar a injeção local de ozônio à insuflação retal ( Figura 3 ). Nos casos de celulite flácida, também utilizamos macroventiladores glúteos (Pump-up) com adição de ozônio em seu interior ( Figura 4) Os recursos eletroterapêuticos também podem ser associados à radiofrequência, tecarterapia, ondas de choque, ultrassom, carboxiterapia, vacoterapia, entre outros. Vale lembrar que a sequência de uso desses recursos deve obedecer a critérios biofísicos e bom senso. Não encontramos menção na literatura sobre a associação de recursos de eletrotermoterapia com ozônio no tratamento da celulite. O uso de cosméticos ozonizados ou não ozonizados em casa também pode ser um bom adjuvante para melhorar os resultados do tratamento da celulite. 5,2 Gordura localizada Algumas justificativas permitem o uso do ozônio no tratamento da gordura localizada. Conforme descrito anteriormente no tratamento da gordura subcutânea celulítica, o ozônio agirá da mesma forma na gordura mais profunda (reserva de gordura subcutânea) porque, devido à sua reatividade, o ozônio irá desencadear a peroxidação lipídica causando lise celular dos adipócitos [ 43 ] [ 66 ] [ 67 ], alémde estimular a lipólise no tecido adiposo [ 11 ] [ 13 ] [ 70 ]. Concentração Volume de O3 por pontos Volume total de gás por sessão Frequência Associações Fonte - 1 a 5 μg / ml 3 a 5 ml 200 ml 2 vezes / semana - Galoforo et al. , 2002 [15] - 5 μg / ml 10 ml para uma área de 5 cm - 1 a 2 vezes / semana - Sirito, 2006 [12] - 2 a 4 μg / ml - Celulite dura: 2 μg / ml - Celulite flácida: 1,5 a 2,6 μg / ml; - Celulite Edematosa: 3 a 4 μg / ml. 1 a 2 ml 100 ml 1 vez / semana Massagem com óleo ozonizado Bocci, 2010 [13] - 1 a 5 μg - Luz: 1,5 a 2,5 μg / ml; - Moderado: 2 a 3 μg / ml; - Forte: 4 a 5 μg / ml 5 a 7 ml 200 ml 2 a 3 vezes / semana -Insuflação retal: 10 a 20 μg / ml; 1 a 2 vezes / semana - Drenagem linfática manual com óleo ozonizado; 1 a 2 vezes / semana Cuccio & Franzini, 2016 [14] Tabela 1 . Protocolos publicados para o tratamento da terapia com ozônio na celulite. Figura 2 . Resultados do tratamento da celulite com ozonioterapia na concentração: 10 μg, injeção de 5 ml em cada ponto, duas vezes por semana, e um total de 12 sessões de tratamento. (Gentilmente cedido por Joara Defani- Marilia-SP / Brasil). Figura 3 . Tratamento da celulite com ozonioterapia na concentração de 10 μg, injeção de 5 ml em cada ponto, uma vez por semana, insuflação retal e um total de 6 sessões de tratamento. (Gentilmente cedido por Cassiane Costa (Bauru-SP / Brasil). Figura 4 . Utilização de macro ventosas (“Pump-up”) no tratamento da celulite flácida. O ozônio também teria a capacidade de interferir no peso corporal geral, proporcionando alguma perda de peso. A ativação do Nrf2 também inibiu a capacidade de diferenciação das células 3T3L1 (pré-adipócitos) e na obesidade [ 51 ]. A presença de Nrf2 pode proteger contra a obesidade [ 30] Portanto, sempre recomendamos a associação do ozônio sistêmico com a aplicação local no tratamento da gordura localizada, pois a ação antioxidante do ozônio, por meio da geração de leve estresse oxidativo, torna-se um ótimo coadjuvante para redução de grandes depósitos de gordura. A ozonioterapia associada (insuflação retal com 20 a 40 μg / ml e 150 a 300 ml de O3) a um grupo de voluntários que faziam dieta, comparou-os com outro grupo que não fazia. O ozônio potencializou a diminuição do peso e das medidas associadas à dieta, gerando uma diferença significativa no peso corporal, circunferência da cintura e IMC (Índice de Massa Corporal) [ 73 ]. Atualmente, os protocolos de ozonioterapia para o tratamento da gordura localizada variam na literatura e na prática clínica de muitos profissionais. Tratamento de um paciente com lipoma nas costas com concentração de 4 μg / ml e 10 ml de gás em cada ponto de injeção, duas vezes por semana. Em nossa prática clínica, atualmente usamos e recomendamos a injeção de gás ozônio a 15 μg / ml e 5 ml por ponto [ 11 ]. No entanto, um estudo russo [ 47] revelou outra forma de utilizar a concentração e o volume do gás, modificando a dosimetria total a cada sessão de tratamento. O protocolo consistiu em aumentar as concentrações e os volumes injetados ao longo de 10 sessões de tratamento, começando com uma concentração de 20 μg / ml e 250 ml de volume por área total de tratamento, e terminando com 50 μg / ml e 600 ml, em alguns casos. O estudo revelou que as respostas terapêuticas são melhores quando apenas variamos os volumes, mantendo a mesma concentração até o final do tratamento (Grupo 4) ( Tabela 2 ). Note que nos grupos 3 e 4, houve uma variação no volume introduzido ao longo das sessões de tratamento, e essa variação também ocorreu com a concentração de ozônio durante as sessões nos grupos 2 e 3 (Fonte: Poliychuk, 2010 [ 47 ]) . Em nossa prática clínica, encontramos no mercado, e comumente utilizamos no tratamento de concentrações de gordura localizada que variam de 10 a 15 μg / ml com 5 ml (ou mais) de ozônio em cada ponto de injeção de gás, obtendo excelentes resultados terapêuticos de associação ou aplicação não sistêmica, como insuflação retal ( Figura 5 ). Grupo Número de pacientes Programa de tratamento: 10 sessões — 2 a 3 vezes por semana. Concentração de ozônio (μg / ml) Volume da mistura (ml) 1 39 20 (sem alterações) 250 (sem alterações) 2 30 Uma concentração por sessão: 20, 25, 25, 32, 32, 32, 40, 40, 50, 50 250 (sem alterações) 3 30 Uma concentração por sessão: 20, 20, 20, 25, 32, 32, 40, 40, 50, 50 Um volume por sessão: 250, 250, 250, 250, 360, 360, 360, 360, 480, 600 4 42 20 (sem alterações) Um volume por sessão: 250, 360, 360, 360, 420, 420, 480, 480, 600, 600 Tabela 2 . Esquema de tratamento russo com ozonioterapia para tratamento de gordura localizada. Figura 5 . Tratamento da gordura localizada no abdômen com ozonioterapia na concentração: 10 μg / ml (volume total de 180 ml), uma vez por semana, insuflação retal com 20 μg / ml e 180 ml de volume, totalizando 10 sessões de tratamento. (Gentilmente cedido por: Juliana Tiradentes (Itaperuna-RJ / Brasil). Por considerarmos o protocolo russo [ 47 ] agressivo e bastante doloroso, mas considerando o bom resultado alcançado no estudo, atualmente também estamos orientando uma adaptação a essas doses utilizando concentrações entre 10 e 20 μg / ml (de acordo com o limiar de sensibilidade) e variando o volume injetado em cada ponto de 3 a 10 ml, ao longo de dez sessões de tratamento no tratamento de gordura localizada. Outra forma de tratar a gordura localizada e celulite, estrias, cicatrizes, alopecia, etc., é aplicar o ozônio diretamente do equipamento na área-alvo sem o uso de seringas, mas com mangueira de silicone. No Brasil, essa metodologia é chamada de Modo “Fluxo Livre” ou popularmente Modo Carboxi (por ser semelhante à forma de utilização da Carboxiterapia, sem seringas). Esta forma de injeção de ozônio é baseada nos relatórios de alguns autores [ 65 ] [ 74 ] [ 75 ] [ 76] que descreveu o uso de ozônio sem seringas, mas usando uma sonda uretral, calibre 12 a 14, para levar o gás do equipamento diretamente para a cavidade vaginal ou retal, infundindo cerca de 50 a 500 mililitros da mistura de ozônio-oxigênio por até alguns minutos (dependendo do volume desejado). No início da implantação desta metodologia, houve certa resistência de alguns profissionais por não entenderem a forma correta de uso e por pensarem que haveria riscos para o cliente e para o profissional devido a uma possível emissão acidental de ozônio no serviço ambiente, assim como, e uma possível “overdose” de ozônio injetado. Porém, assim que sugerimos a adição de equipamentos para medir e controlar a concentração de ozônio no ar ambiente para evitar que o local de atendimento tivesse a ppm de ozônio aumentada a ponto de causar danos à saúde de quem ali estava , isso não era mais um tabu. Finalmente, descrevemos como calcular a dose total de ozônio injetada durante o tratamento usando a terapia de ozônio no modo "Fluxo Livre" para o tratamento de gordura localizada, Também utilizamos muito a associação da ozonioterapia com recursos eletrotermoterapêuticos para o tratamento da adiposidade localizada. Atualmente associamos a injeção local de ozônio com diversos equipamentos, como radiofrequência ou tecarterapia, criolipólise, carboxiterapia, eletrolíase, ultracavitação, ultrassom, etc. excelentes resultados sem interferências ou efeitos adversos em nossa prática clínica ( Figura 6 e Figura 7 ). Figura 6 . Tratamento da gordura localizada no abdômen com ozonioterapia e associações: 1 sessão de criolipólise; após 4 dias, Carboxiterapia (5 sessões, 2 × semana); em seguida, terapia de ozônio local (15 μg / 3 a 5 ml por ponto) (5 sessões, 2x semana). (Gentilmente cedido por Gleicy Santos (Mirasol D'Oeste- MT). Figura 7 . Tratamento da gordura localizada no abdômen com ozonioterapia e associações: 4 sessões de insuflação retal antes da criolipólise de placa; 48 horasapós o tratamento com criolipólise, mais 6 sessões de ozonioterapia retal (2 vezes por semana; concentração de 20 a 30 μg e volume de 240 a 300 ml); totalizou 6 sessões. (Gentilmente cedido por Janaína Fantoni (Joinvile-SC). Por fim, também aplicamos a injeção de solução salina ozonizada no tecido adiposo subcutâneo para reduzi-la, com excelentes resultados ( Figura 8 ). A ozonização da solução salina é baseada na declaração de Madrid com doses baixas, ou seja , 1,1 μg para cada quilograma de peso corporal [ 77 ], porém, em nossa prática, ozonizamos 250 ml de solução salina com 60 μg por 10 minutos, e nós injetou 5 ml de solução salina ozonizada em cada ponto. Em alguns casos, utilizamos imediatamente ultrassom, ultracavitação ou ondas de choque para realizar a hidrolipoclasia não aspirativa, obtendo excelentes resultados. Figura 8 . Tratamento da gordura localizada em abdome com injeção local de solução salina ozonizada: 10 sessões (2 vezes por semana, volume de 5 ml em cada ponto de injeção; solução salina (250 ml) ozonizada com 60 μg por 10 minutos. 5.3. Rejuvenescimento e flacidez do tecido Um nível baixo, mas crônico, de inflamação (quando não há verdadeiras causas exógenas ou endógenas) é uma característica comum do envelhecimento ou de algumas doenças relacionadas com a idade [ 33 ]. Portanto, o Fator Nuclear κ B (NF- κ B) foi o fator de transcrição mais associado ao envelhecimento [ 78 ]. Como já mencionado, o Nrf2 pode modular a inflamação por meio da manutenção da homeostase redox (equilibrando as ações das ROS e a capacidade antioxidante celular) e a supressão de genes pró-inflamatórios, diretamente ou por meio da inibição do NF- κ B [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ]. Assim, a ativação do Nrf2 por meio da terapia com ozônio [ 34 ] [ 79 ] pode inibir o NF κVia B e ativam enzimas antioxidantes, diminuindo a ação das citocinas inflamatórias. Portanto, entende-se que as modalidades terapêuticas da ozonioterapia sistêmica, como insuflação retal, auto-hemoterapia e injeção intravenosa de solução salina ozonizada podem aumentar a expressão de Nrf2, diminuir o estresse oxidativo e, portanto, retardar os sinais de envelhecimento, inclusive no pele. Portanto, devido à nossa prática clínica, recomendamos a inclusão da ozonioterapia sistêmica nos tratamentos estéticos de rejuvenescimento para auxiliar no tratamento local e, assim, potencializar os resultados, principalmente em médio e longo prazo [ 17 ] [ 35 ] [ 46 ] [ 80 ]. Associado ao envelhecimento, geralmente enfrentamos alterações na estrutura dermoepidérmica da pele, especialmente rugas, flacidez e elastose. Uma grande parte desse problema reside na deficiência de produção e manutenção de colágeno e elastina na pele [ 81] A injeção subcutânea de ozônio, na concentração de 1 a 2 μg, uma vez a cada 7 a 10 dias, foi capaz de beneficiar a pele por meio de alguns efeitos: melhorou a organização estrutural da derme, diminuiu a deformação fibrótica, diminuiu o acúmulo excessivo de líquido intersticial na derme, produziu aumento significativo da espessura da derme (3,55%) (espessamento das camadas epidérmicas e dérmicas), aumentou a elasticidade geral da pele, restaurando a suavidade da pele micro-relevo, aumento da pele a microcirculação em 2,2 vezes, aumentou a umidade da pele em 20,11% (o efeito permaneceu por cerca de 2 a 6 meses), normalizou a perda de água transepidérmica e a função de barreira da pele, além de normalizar o pH da pele (próximo ao pH 5,5) [ 82 ] Ainda, sobre a ação do ozônio sobre os componentes da pele, autores [ 16 ] mencionaram que a injeção intradérmica de ozônio pode estimular a ação dos fibroblastos e assim, produz colágeno, reduzindo rugas finas. Outros autores [ 83 ] encontraram um aumento do colágeno tipo 1 (1,6 vezes) em culturas de células gengivais, expondo-as a um gel ozonizado (0,5 ppm). A terapia com ozônio local foi mencionada como um excelente recurso para a bioestimulação do colágeno na pele [ 84] Os autores relataram um caso de bioestimulação de colágeno por meio de injeções intradérmicas de ozônio no rosto e pescoço, em que bioestimularam a pele com ozônio, uma vez por semana, na concentração de 5 μg nas duas primeiras sessões de tratamento e aumentada para 10 μg (3ª e 4ª sessões) e 15 μg (5ª e 6ª sessões) nas sessões seguintes. Ao final de cada sessão, eles usaram uma máscara compressiva umedecida com água ozonizada (60 μg) por 10 minutos. Como resultado do tratamento, os autores encontraram redução ou eliminação das rugas, melhora do turgor dérmico da face e pescoço e redução das manchas na pele da face. Em nossa prática clínica, utilizamos algumas técnicas de injeção de ozônio para o tratamento de disfunções estéticas concentradas na pele, entre as quais a intradérmica com retroinjeção, a intradérmica com pregas (o gás está mais concentrado na região subdérmica), a intradérmica tradicional e o mesoepidérmico (mais superficial), todos com bons resultados terapêuticos. De acordo com nossa prática clínica, a concentração da mistura oxigênio-ozônio, dependendo do limiar de sensibilidade, da condição não estética e do objetivo terapêutico, costumamos usar de 8 a 15 μg para a maioria das afecções. Com relação à periodicidade, apesar de alguns relatórios indicarem o uso de ozônio na pele com 7 a 10 dias de intervalo [ 82 ] [ 84], em nosso cotidiano, realizamos o tratamento com intervalos de 15 a 21 dias, para garantir uma melhor avaliação entre as sessões, aguardando um resultado mais consistente, considerando a possibilidade de maior deposição / maturação de colágeno. Além dos aspectos relacionados ao rejuvenescimento, destacamos que os efeitos da ozonioterapia na pele também influenciam os casos em que se busca reduzir apenas a flacidez da pele, inclusive corporal. Nesse caso, o ozônio é um importante aliado para o tratamento, produzindo os mesmos efeitos obtidos no rejuvenescimento. Na Figura 9 até a Figura 10 , mostramos alguns resultados do uso de ozônio em disfunções estéticas relacionadas à pele. Figura 9 . Rejuvenescimento da região periorbicular dos olhos: 8 sessões (1 vez a cada 20 dias, volume de 1 ml em cada ponto de injeção; concentração de 15 μg; técnica intradérmica com retroinjeção). (A) Antes do tratamento; (B) 4 sessões; e (C) após o tratamento. Figura 10 . Rejuvenescimento da região íntima feminina: 5 sessões (1 vez a cada 15 dias, volume de 1 a 2 ml em cada ponto de injeção; concentração de 10 μg; técnica intradérmica). A ozonioterapia para o tratamento de doenças de pele e outras condições estéticas citadas acima também pode ser associada a outros recursos terapêuticos para otimizar os resultados, sejam eles utilizados na mesma sessão ou não. Dentre os recursos articulares mais utilizados e aplicados em uma mesma sessão de tratamento, está a radiofrequência, que sugerimos utilizar antes da injeção de ozônio para evitar qualquer influência do aumento da temperatura local após a injeção do gás. Com isso, talvez para diminuir sua ação terapêutica (embora não tenhamos encontrado estudos sobre essa associação, esse é o nosso entendimento); LASER ou LED, que podem aumentar a produção de colágeno; e cosméticos, principalmente ozonizados. Além disso, entre os recursos que podem ser associados (em dias diferentes) à sessão de ozonioterapia estão Microneagling, Intradermotherapy, Plasma Jet, etc., 5,4 Cirurgias Pré e Pós-Plásticas A ozonioterapia tem proporcionado grande ajuda aos cirurgiões plásticos, tanto antes quanto após os procedimentos operatórios, principalmente na resolução de complicações em retalhos cirúrgicos. Embora não seja comum, o encaminhamento do paciente antes da cirurgia é de grande importância quando o objetivo é preparar o tecido para a recuperação pós-operatória. A ozonioterapia pode melhorar a cicatrização de feridas cirúrgicas, realizando a preparação da pele no local da incisão [ 85 ]. No pós-operatório, o ozônio pode ser utilizadopara diversas situações clínicas, principalmente para deiscências cirúrgicas ( Figura 11 ) e hematomas / equimoses residuais, retardo no reparo tecidual em cicatrizes, gordura ou flacidez residual de lipoaspiração, infecção pós-operatória, etc. [ 86 ]. Alguns autores [ 68] sugeriram que adipócitos extraídos para transplante autólogo estariam melhor preservados, com sobrevida mais prolongada, para enxerto em pacientes submetidos ao transplante de gordura autóloga se expostos ao ozônio na concentração de 10 μg / ml. Com base neste relato, esse tipo de procedimento de pré-enxertia com ozônio já é realizado por cirurgiões plásticos no Brasil, com excelente evolução clínica pós-operatória. Após um procedimento cirúrgico, a inflamação gera estresse oxidativo, e ambos foram as principais causas de aderência da cicatriz pós-operatória no peritônio de ratos. Segundo os autores, o ozônio (usado logo após a cirurgia) diminui o estresse oxidativo (estimula a superoxi dismutase endógena e a glutationa peroxidase), diminui a inflamação e, portanto, a formação de adesão peritoneal pós-operatória [ 87 ]. Além disso, nesse contexto, o pós-operatório pode gerar uma das sequelas mais desafiadoras de tratar, que traz muitos transtornos para os acometidos, a fibrose pós-lipoaspiração. Em nossa prática clínica, o ozônio tem produzido excelentes resultados para a resolução desse tipo de afecção. O entendimento é que os peróxidos produzidos pelo ozônio, incluindo aqueles contidos no óleo ozonizado, podem aumentar a produção de algumas citocinas ao estimular as células fibroblásticas a ativar uma ação fagocítica do excesso de fibras de colágeno no tecido conjuntivo, inclusive fibroso [ 88 ]. Com base nesses efeitos e em nossa prática clínica, recomendamos o uso de ozônio no pré-operatório de cirurgia plástica para reduzir o estresse oxidativo (insuflação retal) para acelerar a recuperação no período de convalescença imediata após o procedimento cirúrgico, e para preparar a pele que irá ser excisado durante a cirurgia para ter uma melhor qualidade de reparo tecidual pós-cirúrgico. Quanto ao pós-operatório, atualmente temos trabalhado muito mais com a ozonioterapia nas sequelas cicatrizantes, como deiscências ( Figura 11 ), fibrose residual, infecção e necrose, basicamente utilizando injeção local de gás (5 a 10 μg / ml), bolsa ou ventosa ( Figura 12 ), insuflação retal ou auto- hemoterapia ozonizada e óleo ozonizado. Figura 11 . Deiscência pós-cirúrgica acompanhada de infecção 12 dias após a cirurgia. Ela foi tratada com 6 sessões de bolsa de ozônio (60 μg, 20 min) (duas vezes por semana) e massagem de liberação de tecido. (Gentilmente cedido por Adriana Bastos-Belo Horizonte-MG). Figura 12 . Tratamento da deiscência pós-mastopexia com injeção local de ozônio e macrobomba (“Pump-up”) para criar um “compartimento” para conter o ozônio para desinfecção e estimulação do reparo tecidual na superfície da cicatriz lesionada. (Gentilmente cedido por Fabiana Gonçalves-Rio de Janeiro- RJ). 5.5. Estrias Embora não tenhamos encontrado estudos específicos sobre o uso do ozônio diretamente nas estrias, estamos obtendo excelentes resultados com o uso desse gás no tratamento desse tipo de condição. Em nosso entendimento, a ação das perfurações cutâneas com a agulha de injeção de ozônio e a própria ação local do gás em estrias proporcionam um efeito semelhante ao que ocorre no tratamento de pele flácida e / ou envelhecida [ 16 ] [ 83 ] [ 84 ], baseado principalmente na estimulação da ação dos fibroblastos para bioestimulação do colágeno na pele estriada ( Figura 13 ). Figura 13 . Tratamento de estrias com ozonioterapia (concentração: 10 μg: volume: 1 ml por ponto; frequência: uma vez a cada 20 dias; total de 5 sessões de tratamento). 5,6. Acnes A incidência de acne vulgar foi associada ao aumento do estresse oxidativo, portanto, entendemos que o tratamento da acne com terapia de ozônio deve ser associado a técnicas de efeito sistêmico para maior ação para reduzir o estresse oxidativo [ 45 ]. O ozônio é um agente capaz de atuar na pele acneica da seguinte maneira: reduz o edema inflamatório e a hiperemia, suaviza os infiltrados inflamatórios e elimina o acometimento da acne [ 74 ]. Um estudo [ 89 ] usou injeções locais de ozônio (30 e 50 μg) associadas a auto-hemoterapia menor para tratar acne em jovens de 14 a 29 anos, 3 vezes por semana durante um mês. Após o tratamento, houve diminuição das lesões inflamatórias e edema e regressão das erupções pustulares; além disso, também houve diminuição dos marcadores de estresse oxidativo no plasma (Malondialdeído). Em geral, a acne pode ser tratada com terapia de ozônio, lavando a área com água ozonizada e sabão ozonizado antes de injetar ozônio; injeção intradérmica de ozônio, usando 0,5 a 1,5 ml por ponto de injeção, 4 a 15 μg de concentração, 1 a 2 vezes por semana [ 74 ] [ 90 ]. Esses procedimentos podem ser associados ao uso de óleo ozonizado (Índice de Peróxido. 600 mEq) para aplicação local 1 a 2 vezes ao dia, insuflação retal (300 - 500 ml; 20 μg), auto- hemoterapia menor (opcional) ou infusão intravenosa de solução salina ozonizada (SSO3) (opcional) [ 74 ] [ 91 ]. Quanto ao óleo ozonizado, apesar de seu uso ser cercado de controvérsias ou tabu, visto que a pele acneica possui características oleosas, é considerado um eficaz agente antiacne. Segundo alguns autores [ 92 ], o óleo ozonizado tem efeito anti-séptico, cicatrizante, sebo-regulador e antiinflamatório no tratamento da acne. Um estudo in vitro com Cutibacterium acnes usou óleo de girassol e coco ozonizado para verificar sua eficácia na inibição da bactéria [ 93 ]. Os óleos de girassol e coco ozonizados foram eficazes como agentes antibacterianos para Cutibacterium acnes . Um estudo [ 92] avaliaram os efeitos do azeite de oliva extra virgem ozonizado e do azeite de oliva extra virgem sem ozônio (controle) no tratamento da acne em indivíduos com idade entre 10 e 30 anos. O uso de azeite ozonizado por um mês revelou que metade da amostra dos indivíduos tratados teve cura de 75%, e a outra metade teve cura de 25%. Ao comparar o azeite ozonizado com o óleo não ozonizado (controle), 65% das lesões diminuíram (inflamatórias e não inflamatórias) no grupo tratado com óleo ozonizado, enquanto no grupo controle a redução foi de apenas 14,5%. A ozonioterapia também demonstrou ser eficaz em casos de acne conglobada. Este caso é relativo a uma mulher de 34 anos com múltiplas lesões acneicas dolorosas há dez anos com 10 a 12 lesões vermelhas e inchadas por dia com secreção purulenta e um nível de dor de 10 (escala de 1 a 10). Ela também tinha depressão e pensamentos suicidas resultantes de dor crônica intensa; bebia de 12 a 18 cervejas por dia para aliviar a dor; e estava em tratamento com antibióticos, esteroides e isotretinoína, mas sem sucesso. A paciente apresentou melhora intensa após ser tratada por um ano com óleo ozonizado (índice de peróxido de 600 mEq), bolsa de corpo inteiro (10 μg por 20 min), injeções intralesionais de ozônio (10 μg - 4 a 12 ml injetados nas lesões ativas) , e auto-hemoterapia menor (5 ml de ozônio, 20 μg, misturado em 5 ml de sangue e injetado no glúteo máximo,91 ]. Em nossa prática clínica, o uso do ozônio tem produzido excelentes resultados, principalmente quando utilizamos mais de uma modalidade terapêutica, como a injeção intralesional associada ao óleo ozonizado, bem como a associamos a outros recursos terapêuticos, como LASER ou LED, carboxiterapia , microagulha ( Figura 14 ), etc. Figura 14 . O tratamento da acne com injeção local de ozônio (2 ml por ponto, 10 μg, uma vez por semana, 6 sessões de tratamento) está associado ao microagulhamento e limpeza da pele. (Fornecido por Carina Queiroz-Belo Horizonte-MG). 5,7. Cicatrizes No que diz respeito à estimulação da reparação tecidual da pele, a ozonioterapia, com suas mais variadas técnicasterapêuticas, já se mostrou um recurso comprovado de forma eficiente [ 50 ]. Porém, o uso da ozonioterapia em processos de cicatrização agudos ou cicatrizes hipertróficas ou queloides crônicos também são comuns em diversos locais de cuidados estéticos, embora faltem estudos específicos sobre o uso do ozônio em “sequelas” de tecidos fibróticos no campo da estética. No entanto, como relatado anteriormente, a terapia com ozônio na forma de óleo ozonizado poderia reduzir o tecido fibroso ao estimular a ação fagocitária das fibras de colágeno excessivas no tecido conjuntivo [ 88 ], o que nos orientou ao uso do ozônio no tecido cicatricial fibrótico da pele . Além disso, o gás ozônio também foi capaz de atuar especificamente na qualidade do tecido cicatricial na formação pós-queimadura, produzindo um efeito antioxidante (diminuição dos marcadores de estresse oxidativo e aumento da quantidade de enzimas antioxidantes). Impediu o desenvolvimento de fibrose cicatricial; junto com isso, houve melhora da circulação, proporcionando aumento da oxigenação, aumento do oxigênio e ATP nas células lesadas, o que diminuiu a fibroplasia durante a cicatrização [ 94 ]. Com base nesse contexto, nossa prática clínica preconiza o uso do ozônio em processos de cicatrização recentes e crônicos, pois, em nosso entendimento, o ozônio, além de acelerar o reparo tecidual, também garante a qualidade na cicatrização; entretanto, sua principal aplicação estética é em casos de cicatrizes hipertróficas ou quelóides de Anas. Atualmente, observamos uma intensa melhora estética do tecido cicatricial quando aplicamos o ozônio intracatricial ( Figura 15 ). Figura 15 . Tratamento de cicatriz hipertrófica em região tóraco-abdominal após acidente automobilístico. Foi tratado com 4 sessões de injeções intralesionais (concentração de 5 μg; volume de 2 ml em cada ponto). A gravação foi associada por 48 horas. (Fornecido por Milena Esmeraldo-Fortaleza-CE). 5,8. Discromia Com base na literatura, a ozonioterapia pode ser indicada não só para o tratamento da hipercromia, mas também para a hipocromia ou acromia. Os autores relataram que o aumento do estresse oxidativo está associado a discromia, como o melasma. e vitiligo [ 46 ] [ 50 ] [ 95 ] [ 96 ] [ 97 ]. Portanto, em nossa prática clínica, sempre recomendamos alguma terapia com ozônio sistêmico para reduzir o estresse oxidativo (principalmente a insuflação retal) e, assim, auxiliar no tratamento das discromias citadas acima. Nos casos de hipercromia pós-lesão cutânea (restauradora ou inflamatória), recomendamos o tratamento com injeção de ozônio na pele ou uso tópico de óleo ozonizado. A recomendação de alguns autores [ 98 ] que relataram que o peróxido de hidrogênio (H 2 O 2 ) atua nos estágios iniciais da melanogênese e no ambiente oxidante dentro do melanossomo, regulando a síntese de melanina (atua sob a tirosinase). Os autores, inclusive, admitiram a possibilidade do uso de cremes com ação despigmentante contendo peróxido de hidrogênio no tratamento desse tipo de hipercromia. Ainda, sobre o óleo ozonizado e sua ação na hipercromia, os autores compararam os efeitos do óleo ozonizado com o ácido hialurônico tópico (gel, 0,2%) no tratamento de queimaduras na pele (usado uma vez ao dia, durante 12 semanas). Os autores relataram que o óleo ozonizado era tão eficaz quanto o ácido hialurônico na redução dos sintomas de queimadura na pele, mas parecia ser mais eficaz na redução da hiperpigmentação pós-lesão [ 99 ]. Em relação às manchas senis associadas ao envelhecimento da pele, foi encontrado um relato de caso [ 84 ] com redução intensa das manchas faciais e redução e / ou eliminação das rugas e melhora do turgor dérmico (face e pescoço) após bioestimulação da pele com injeções semanais de ozônio. Em casos graves de acromia, como vitiligo, a ozonioterapia sistêmica parece ser o melhor método de tratamento, pois 50 pacientes tiveram os níveis de marcadores antioxidantes avaliados (superóxido dismutase, glutationa peroxidase, glutationa, dialdeído malônico, 8-OH-desoxiguanosina), e foram tratados com injeção intravenosa de solução salina ozonizada (300 - 400 ml, por 30 a 60 minutos), 3 vezes por semana, totalizando 9 a 10 procedimentos. Como resultado, a progressão do vitiligo foi interrompida em 40 pacientes (80%) com repigmentação difusa ou pontual e diminuição ao redor das manchas despigmentadas. Além disso, também houve normalização dos índices de estresse oxidativo com diminuição do dialdeído malônico e da 8-OH- desoxiguanosina. Há também um aumento na concentração de glutationa e glutationa peroxidase em média em 1,5 vezes [46 ]. Com base no exposto, e com base em nossa experiência clínica, entendemos que as injeções locais, principalmente em caso de hipercromia, o uso de óleo ozonizado ou cosméticos, quase sempre associado à ozonioterapia sistêmica (insuflação retal, injeção intravenosa de solução salina ozonizada e auto-hemoterapia) podem ser excelentes opções terapêuticas em diversos casos de discromia, principalmente aquelas verificadas após tratamentos estéticos (jato de plasma, radiofrequência fracionada, microagulhamento, peelings, etc.). 6. Considerações Finais Além das alterações estéticas descritas neste estudo, ainda encontramos subsídios para o uso da ozonioterapia em outras situações clínicas, como telangiectasias, terapia capilar. Também estamos utilizando-o de forma “experimental” junto com a eletrolólise em substituição à carboxiterapia na técnica de Eletrocarbolólise, bem como na limpeza estética da pele com compressas de água ozonizada, em hidrolipoclastia com solução salina ozonizada injetada diretamente na gordura subcutânea, associando a uso de ondas sonoras (ultrassom, ultracavitação ou ondas de choque) e após microagulha (óleo ozonizado) [ 13 ] [ 74 ] [ 100 ] [ 101 ]. Com base no exposto em nossa prática clínica, concluímos que a ozonioterapia por meio de suas diversas modalidades terapêuticas (aplicações sistêmicas ou locais: transcutânea, intradérmica e subcutânea) tem agregado muito aos procedimentos estéticos, principalmente por sua efetiva ação adjuvante ou como a principal agente de alterações fisiológicas críticas para potencializar os resultados clínicos, ademais, encontramos inúmeros relatos na literatura mundial sobre a utilização do ozônio no tratamento das disfunções estéticas, garantindo assim o suporte necessário para a sua utilização nesta área de atividade profissional, como por várias décadas, como Rússia [ 8 ] [ 10 ], Espanha [ 74 ], Turquia [ 16 ], Itália [ 14 ] [ 15 ], Brasil [84 ] já publicaram seus estudos em diversas publicações mostrando resultados efetivos do uso da ozonioterapia no tratamento das disfunções estéticas, portanto, acreditamos que atualmente existe grande respaldo e justificativa consistente para todos os profissionais que tratam das afecções estéticas utilizando as diversas modalidades terapêuticas disponível na terapia de ozônio. Conflitos de interesse Os autores declaram não haver conflito de interesses quanto à publicação deste artigo. Referências [1] Rubin, M.B. (2001) The History of Ozone—The Schonbein Period, 1839- 1868. Bulletin for the History of Chemistry, 26, 40-56. [2] Rideal, E.K. (1920) The Manufacture of Chemicals by Electrolysis. Ozone. Constable, London. https://archive.org/details/ozonerid00rideuoft [3] Nogales, C.G., Ferrari, P.H., Kantorovich, E.O. and Lage-Marques, J.L. (2008) Ozone Therapy in Medicine and Dentistry. The Journal of Contemporary Dental Practice, 9, 75-84. https://doi.org/10.5005/jcdp-9-4-75 [4] Elvis, A.M. and Ekta, J.S. (2011) Ozone Therapy: A Review. Journal of Natural Science Biology and Medicine, 2, 66-71. https://doi.org/10.4103/0976-9668.82319 [5] Wentworth, P. (2003) Evidence for Antibody-Catalyzed Ozone Formation in Bacterial Killing and Inflammation. 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