Aula 4 de Microbiologia (Laboratorio de microbiologia e meios de Cultura bacteriologica)

Prévia do material em texto

Microbiologia Básica 
Professor : David Lucas Ribeiro de Almeida
Formação: Biomédico 
Laboratório de Microbiologia
O laboratório de microbiologia é responsável por caracterizar e também identificar os microrganismos presentes em vários tipos de amostras.
É no setor de microbiologia que são realizados exames como cultura de urina, orofaringe e outras secreções, a fim de diagnosticar doenças infecciosas relacionadas, por exemplo, à atividade bacteriana nociva presente no organismo.
O Setor de Microbiologia é responsável pelo cultivo, isolamento e identificação de bactérias, fungos e leveduras causadores de doenças em humanos.
Realizamos culturas de amostras de pelos, urina, fezes, secreções, sangue, entre outros.
Laboratório de Microbiologia
Materiais Biológicos
Urina 
Fezes 
Materiais Biológicos
Hemocultura 
Materiais Biológicos
Swab Nasal 
Materiais de Laboratório 
A Placa de Petri para Laboratório é utilizada em laboratórios de microbiologia e rotinas de bacteriologia para cultura e identificação de microrganismos. 
Uma alça de inoculação ou alça Bacteriológica é um acessório de laboratório que é útil no campo da microbiologia para transferir e inocular microrganismos vivos. É uma das ferramentas mais comuns em um laboratório microbiológico.
Materiais de Laboratório 
Placas pétri 
Alças Bacteriológica
Meios de cultura 
Os meios de cultura são insumos preparados em laboratórios que fornecem os nutrientes para o crescimento e desenvolvimento de microrganismos (como bactérias e fungos) fora do seu habitat natural
Existe uma variedade enorme destes meios e são utilizados para análises laboratoriais e estudos científicos em diversas áreas, principalmente em alimentos, água, cosméticos e microbiologia clínica.
Aspergillus fumigatus 
Eschirichia coli 
Meios de cultura 
Conceito de Ágar 
O ágar é um solidificante que é usado no preparo dos meios de cultura, que quando adicionado a um caldo nutriente
Mistura de nutrientes específicos necessários para o cultivo de um determinado microrganismo,
Forma um meio de cultura. Esse meio de cultura formado também é denominado de ágar.
Condições dos Meios de Cultura 
Além dos nutrientes e condições ambientais favoráveis para esse cultivo, muitos critérios devem ser considerados.
Diferentes microrganismos possuem diferentes necessidades, por isso o meio de cultura é adaptado para satisfazer essas necessidades, utilizando nutrientes específicos dependendo do microrganismo de interesse. 
Além desses fatores, deve ser levado em conta o pH e a quantidade de oxigênio ou mesmo a sua ausência.
Tipos de Meios de Culturas 
Os meios de cultura em microbiologia para o cultivo de bactérias são conhecidos como meios artificiais ou meios sintéticos
Não ocorrem naturalmente, ou seja, eles são preparados no laboratório. Existem várias maneiras de se classificar os meios de cultura que são QUIMICAMENTE DEFINIDO divididos em:
SÓLIDO
LÍQUIDO
ENRIQUECIDO
SELETIVO
DIFERENCIAL
 Meios Sólido 
Os meios sólidos são preparados adicionando-se ágar em placas de Petri, onde o meio se solidifica. 
As bactérias crescem na superfície do meio sólido.
Pode ser utilizado como agente gelificante em meio de cultura bacteriológico e crescimento de anaeróbios e aeróbicos.
Mueller-Hinton
Um meio de cultura microbiológico que é frequentemente usado para testes de susceptibilidade antimicrobiana. 
TSA (Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos 
 Meios Líquido 
Os meios de cultura líquidos, sem agentes solidificantes, são também conhecidos como caldos e seu acondicionamento é feito em tubos de ensaio. 
São utilizados para ativação das culturas, repiques de microrganismos, provas bioquímicas e motilidade das bactérias 
 Meios Enriquecido 
Contém um grande suprimento de nutrientes que promove o crescimento dos microrganismos fastidiosos. É geralmente preparado pela adição de nutrientes extras a um meio denominado ágar nutriente.
O Ágar-sangue (ágar nutriente mais 5% de hemácias de carneiro) meios de cultura para coleta de mucosas e pele
O Ágar-chocolate (ágar nutriente adicionado de hemoglobina em pó)
São exemplos de meios sólidos enriquecidos utilizados rotineiramente nos laboratórios de bacteriologia clínica.
Ágar Sangue (Pele e Mucosas) 
Utilizado para isolamento de microrganismos não fastidiosos e verificação de hemólise sendo meio mais usado no laboratório para crescimento de bactérias
Ágar Chocolate (Fastidiosos)
Um meio enriquecido e não seletivo para cultivo de bactérias delicadas e exigentes. Uma variante do ágar sangue que utilizada hemácias lisadas.
 Meios Seletivo 
Contém inibidores adicionados que tornam inviável o crescimento de certos microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo que está sendo pesquisado.
Por exemplo, o ágar MacConkey inibe o crescimento de bactérias gram-positivas, selecionando assim, as bactérias gram-negativas.
Ágar CLED é um meio de cultura que além de isola e quantificar os microrganismos da urina (Urinocultura) sendo um meio para colônias de microrganismo lactase positivos e coloração azul para lactase negativos
Ágar MacConkey (Fermentação) 
Colônias bacterianas que fermentam lactose tornam o meio rosa choque e as bactérias que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo claro.
Ágar CLED (Urinocultura) 
Isolar e quantificar os microrganismos da urina. É um meio de coloração verde clara onde apresenta coloração amarelada para colônias de microrganismo lactase positivos e coloração azul para lactase negativos.
 Meios Diferencial 
Meio Diferencial: promove uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos.
Possibilita a distinção entre vários gêneros e espécies de microrganismos, por possuir substâncias que permitem uma diferenciação presuntiva, evidenciada na mudança de coloração ou na morfologia das colônias.
Meio CLED: Meio não seletivo mais é diferencial
Meio ágar Sangue: Meio enriquecido e diferencial
Meio MacConkey: Meio seletivo e diferencial
Meio ágar Chocolate: Meio enriquecido e não seletivo
Revisão de Principais Meios de Cultura
Inoculação 
Nos laboratórios de microbiologia clínica, os meios de cultura são rotineiramente inoculados com amostras clínicas (amostras que foram coletadas de pacientes com suspeita de doença infecciosa)
A inoculação de um meio líquido envolve a adição de uma parte da amostra ao meio (Alça Bacteriológica)
 A inoculação de um meio sólido ou meio em placa envolve a utilização de uma alça de inoculação estéril para a aplicação de uma parte da amostra à superfície do meio. 
Esse processo é conhecido como semeadura em estrias.
Tipos de Semeio 
Quantitativa (Urinoculta)
Qualitativa (Semeio)
Referencias
https://kasvi.com.br/bacteria-gram-positiva-gram-negativa/
Ministério da Saúde. Técnica de Coloração de GRAM
https://www.infoescola.com/microbiologia/bacterias-gram-positivas-e-gram-negativas/
https://www.msdmanuals.com/pt-br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias-gram-positivas