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Solubilidade de Proteínas e Desnaturação Apresentação 1. OBJETIVO Este experimento estuda a solubilidade das proteínas frente a agentes desnaturantes. Ao final deste experimento, você deverá ser capaz de: comparar a solubilidade das proteínas ante ácidos, bases, álcool e sal;• descrever como a fonte de proteína utilizada interfere no resultado do experimento;• descrever a interferência da concentração dos ácidos, das bases, do álcool e do sal nas reações com proteínas; • manipular um banho-maria;• usar uma pipeta e uma pêra para medição do volume.• 2. ONDE UTILIZAR ESSES CONCEITOS? A base de todo tecido vivo são as proteínas. Proteínas são macromoléculas orgânicas formadas pela combinação química entre aminoácidos. Não há um processo biológico do qual as proteínas não participem. Elas têm inúmeras funções em nosso organismo, entre elas: funcionam como catalisadores de reações químicas, transporte de oxigênio, atuam na defesa do organismo, composição hormonal, entre outras. A solubilidade é um fator importante, ainda, na indústria alimentícia. A sua aplicação é essencial na confecção de certos alimentos, para determinação do grau de extração e para purificação das proteínas. Além disso, a indústria alimentícia e os consumidores têm se preocupado com fontes alternativas de substituição das proteínas de origem animal pela de origem vegetal. Os grandes desafios são, principalmente, manter as características nutritivas, o sabor e a textura desses novos produtos. 3. O EXPERIMENTO Este experimento utiliza para fins de comparação, uma solução de albumina e uma clara do ovo. As soluções serão tratadas igualmente e a solução de albumina deve ser feita de acordo com as instruções do fabricante. Você verá como essas proteínas se solubilizam, reagem ou são desnaturadas nas reações com soluções de ácido nítrico concentrado (68% ou 16 M), ácido clorídrico concentrado (37% ou 12 M), hidróxido de sódio (12 M), etanol absoluto ou anidro (99%) e solução de cloreto de sódio (5 M). 4. SEGURANÇA Nesta prática serão utilizados luvas, jaleco e óculos de proteção. As luvas são imprescindíveis, pois serão utilizados ácidos e bases concentrados. O ácido clorídrico é fumegante, portanto, fazer o experimento na capela é de extrema importância. É fundamental também lembrar que serão utilizados equipamentos de aquecimento. 5. CENÁRIO O ambiente do experimento apresenta uma capela com uma chapa de aquecimento ou bico de Bunsen com tela de amianto, do lado do aparato encontra-se a pisseta com água destilada. Além disso, estarão o ovo em um béquer na bancada. As garrafas das respectivas soluções estarão na capela para serem selecionadas. Na gaveta estarão todos materiais necessários para realização do experimento. Bons estudos. Sumário teórico Acesse o sumário: 1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO As proteínas são macromoléculas biológicas e poliméricas, formadas por moléculas orgânicas menores, chamadas de aminoácidos. Dois aminoácidos se unem por ligações covalentes, chamadas de ligações peptídicas. Dessa forma, uma molécula de água é liberada e a cadeia primária da proteína começa a ser formada, dando origem a sua conformação ou estrutura espacial, ou seja, uma sequência dos aminoácidos. As cadeias primárias podem interagir entre si e formarem as cadeias secundárias em formas de hélice, folhas ou laços. Se a interação das cadeias secundárias continuar de forma tridimensional com ligações de hidrogênio e dissulfeto, serão formadas as cadeias terciárias (estrutura final do peptídio). Além disso, se dois ou mais peptídios se associam, então serão formadas as cadeias complexas quaternárias. É importante salientar que, as proteínas são formadas somente a partir de cem aminoácidos e que essas cadeias vão ser influenciadas diretamente pela presença de solventes. A solubilidade das proteínas depende principalmente de suas cargas elétricas. Dessa forma, se o ponto isoelétrico da proteína for atingido (carga elétrica líquida igual a zero), ocorrerá a precipitação. Entretanto, quanto mais distante o pH estiver do seu ponto isoelétrico, maior a solubilidade das proteínas na água, pois mais pontes de hidrogênio poderão ser formadas entre as moléculas de água e de proteína. Além disso, fatores como temperatura, soluções aquosas ácidas, soluções aquosas básicas, soluções aquosas salinas neutras ou de metais pesados e solventes orgânicos, também influenciam na solubilidade da proteína, podendo causar sua desnaturação. A desnaturação nada mais é do que a possível modificação estrutural da proteína e, consequentemente, perda da sua atividade biológica. É importante salientar que a desnaturação não afeta as ligações peptídicas entre os aminoácidos, ou seja, a estrutura primária da proteína. A desnaturação afeta somente as outras estruturas, pois as ligações são mais fracas que as ligações covalentes, presentes na estrutura primária. 2 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO No procedimento experimental, vamos ressaltar os fatores que afetam cada proteína analisada e que provocam a sua desnaturação. O primeiro fator é o aquecimento em banho-maria, pois em temperaturas acima de 40°C, os dobramentos das proteínas são modificados, causando a sua precipitação. O fator pH (potencial hidrogeniônico) pode ser alterado pela adição de ácidos e bases fortes. Desse modo, o pH ótimo de trabalho da proteína é modificado. Essa alteração de pH causa a desnaturação ou hidrólise da proteína pelas alterações nas ligações de hidrogênio e, consequentemente, na sua cadeia terciária. Além disso, a adição de ácidos fortes modifica o ponto isoelétrico, deixando-o positivo e fazendo com que a proteína interaja com os ânions e, por fim, precipite, o que pode ser revertido ou ressolubilizado através de uma nova alteração do pH. Alguns exemplos de ácidos e bases fortes são ácido nítrico, ácido clorídrico e hidróxido de sódio. O fator solvente orgânico, como por exemplo, o etanol absoluto, tem uma interação menor com a proteína do que a água. Isso ocorre devido à alta constante dielétrica da água (capacidade de interação do solvente com o soluto). Assim, a interação proteína-proteína se sobressai em solventes orgânicos e, por consequência, precipita a proteína. No caso de soluções salinas neutras, como por exemplo, uma solução de cloreto de sódio, a solubilidade dependerá da quantidade do sal adicionado. Se a solução for saturada, indica uma grande quantidade de íons. Assim, o poder de solvatação da água tenderá para os íons, a interação proteína-proteína aumentará, e a precipitação é favorecida. Roteiro 1 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO INSTRUÇÕES GERAIS 1. Neste experimento, você irá estudar a solubilidade das proteínas frente a agentes desnaturantes. 2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do VirtuaLab. 3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial VirtuaLab” presente neste Roteiro. 4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção“Avaliação de Resultados”. 2 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO RECOMENDAÇÕES DE ACESSO PARA ACESSAR O VIRTUALAB 1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 5. Realize teste de velocidade da internet. Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! ATENÇÃO: O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 3 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO PERGUNTAS FREQUENTES 1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador. b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho. Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina. c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> “Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o computador. 4 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente novamente. b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho. Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina. c) Verifique se o navegador está atualizado. 5 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO MATERIAIS NECESSÁRIOS • Ácido clorídrico concentrado; • Ácido nítrico concentrado; • Água destilada; • Banho-maria; • Bastão de vidro; • Béqueres; • Clara de ovo; • Etanol absoluto; • Pipetas de Pasteur; • Solução de Albumina; • Solução de cloreto de sódio; • Solução de hidróxido de sódio; • Tubos de ensaio. PROCEDIMENTOS 1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas e óculos. 6 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 2. PREPARANDO O EXPERIMENTO Ligue o exaustor e a luz da capela. Abra a janela da capela. Abra o armário inferior e selecione os itens necessários e coloque-os no interior da capela. 3. PREPARANDO AS AMOSTRAS Coloque a solução de Albumina no béquer e, em seguida, pipete 2 mL dessa solução e transfira para os tubos de ensaio 1 a 8. Higienize a pipeta e o béquer. Coloque a clara de ovo no béquer, adicione água destilada, homogeneíze essa solução com o auxílio do bastão de vidro e deixe descansar. Depois, transfira 2 mL da solução da clara de ovo para os tubos de ensaio 9 a 16. 4. ADICIONANDO OS REAGENTES Aqueça em banho-maria os tubos 2 e 10. Após isso, adicione os reagentes aos tubos: água destilada nos tubos 3 e 11, ácido nítrico concentrado nos tubos 4 e 12, ácido clorídrico concentrado nos tubos 5 e 13, solução de hidróxido de sódio nos tubos 6 e 14, solução de cloreto de sódio nos tubos 7 e 15 e etanol absoluto nos tubos 8 e 16. Por fim, deixe as amostras em repouso e observe o resultado. 5. ANALISANDO OS RESULTADOS Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 07 deste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema. 7 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 1. De acordo com o procedimento executado, explique como podemos precipitar as proteínas. 2. Cite três agentes desnaturantes. 8 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO TUTORIAL VIRTUALAB 1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir utilize o atalho do teclado “Alt+8”. 9 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Abra o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas e óculos. 10 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Feche o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 11 ALGETEC - SOLUÇÕESTECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 2. PREPARANDO O EXPERIMENTO Visualize o painel de controle da capela clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Painel de controle” ou através do atalho do teclado “Alt+3”. Ligue a luz da capela clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado. 12 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Ligue o exaustor da capela clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado. Abra a janela da capela clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 13 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Visualize o armário inferior clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário inferior” ou através do atalho do teclado “Alt+4”. Abra os armários clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 14 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Mova os tubos de ensaio para a capela clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles. Repita esse processo para os demais itens necessários. Feche os armários clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 15 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 3. PREPARANDO AS AMOSTRAS Visualize o interior da capela clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Interior da capela” ou através do atalho do teclado “Alt+2”. Coloque a albumina no béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 16 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Pipete a solução do béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta. Transfira a solução para o tubo de ensaio 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta e selecione o tubo desejado. 17 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Colete mais da última solução passando o cursor do mouse sobre a pipeta e pressione a letra E no teclado do seu computador. Repita o procedimento anterior para transferir a albumina para os tubos 2 a 8. 18 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. 19 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Transfira a clara de ovo para o béquer clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Coloque água destilada no béquer clicando com o botão scroll do mouse sobre ela. 20 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Homogeneíze a solução clicando com o botão direito do mouse sobre o bastão de vidro. Colete a clara de ovo clicando com o botão scroll do mouse sobre a pipeta Pasteur. 21 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Transfira a solução para o tubo de ensaio 9 clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta e selecione o tubo desejado. Repita os procedimentos anteriores para transferir a clara de ovo para os tubos 10 a 16. 22 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. 23 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 4. ADICIONANDO OS REAGENTES Aqueça o tubo de ensaio passando o cursor do mouse sobre o suporte e pressione a letra Q no teclado do seu computador. Selecione o tubo 2 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a opção 2. 24 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita o procedimento anterior para aquecer o tubo 10. Coloque água destilada no béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 25 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Pipete a solução do béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta Pasteur. Transfira a solução para o tubo de ensaio 3 clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta e selecione o tubo desejado. 26 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Colete mais da última solução passando o cursor do mouse sobre e pipeta e pressione a letra E no teclado do seu computador. Repita os procedimentos anteriores para transferir a água para o tubo 11. 27 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICASOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Coloque o ácido nítrico no béquer 2 clicando com o botão direito do mouse sobre ele. Pipete a solução do béquer 2 clicando com o botão direito do mouse sobre a pipeta Pasteur. 28 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita os procedimentos anteriores para transferir o ácido nítrico para os tubos 4 e 12. Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. 29 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. Coloque HCl no béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 30 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita os procedimentos anteriores e transfira o HCl para os tubos 5 e 13. Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. 31 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. Coloque o hidróxido de sódio no béquer 2 clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 32 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita os procedimentos anteriores para transferir o hidróxido de sódio para os tubos 6 e 14. Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. 33 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. Coloque o cloreto de sódio no béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 34 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita os procedimentos anteriores para transferir o cloreto de sódio para os tubos 7 e 15. Limpe a pipeta passando o cursor do mouse sobre ela e pressione a letra C no teclado do seu computador. 35 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Limpe o béquer passando o cursor do mouse sobre ele e pressione a letra C no teclado do seu computador. Coloque o etanol no béquer 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 36 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Repita os procedimentos anteriores para transferir o etanol para os tubos 8 e 16. Visualize o suporte de tubos 1 clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Tubos de ensaio – suporte 1” ou através do atalho do teclado “Alt+5”. 37 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO Observe os resultados e repita o passo anterior para visualizar os suportes 2 e 3. 38 ALGETEC - SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO C.P.: 40260-215 Telefone: (+55 71) 3272-3504 Correo electrónico: contato@algetec.com.br | Página web: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS E DESNATURAÇÃO 5. AVALIANDO OS RESULTADOS Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 07 deste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema. Pré Teste 1) Assinale a alternativa correta: A) A estrutura secundária de uma proteína é a sequência de aminoácidos que a formam. B) As variações de temperatura e de pH não podem desnaturar uma proteína. C) A desnaturação envolve alterações nas estruturas quaternárias, terciária e secundária. 2) As proteínas podem sofrer alterações na sua estrutura se forem adicionadas aos solventes. Entretanto, essas modificações podem ser reversíveis, caso seja retirado o respectivo solvente. Baseado nesse contexto, a estrutura espacial das proteínas está relacionada com qual tipo de estrutura? A) Primária. B) Secundária. C) Terciária. 3) Qual desses fatores desnatura uma proteína? A) Adição de água destilada. B) Modificação do pH. C) Adição de solução salina neutra de baixa concentração. 4) "As __________ são compostos formados por ___________unidos (as) por ligações ___________, e as __________são ___________ orgânicos, de natureza _______, sensíveis às variações de temperatura." Os termos que corretamente preenchem as lacunas são, respectivamente: A) Proteínas - gorduras - peptídicas - enzimas - açúcares - lipídica. B) Proteínas - aminoácidos - energéticas - enzimas - catalisadores - proteica. C) Proteínas - aminoácidos - peptídicas - enzimas - catalisadores - proteica. 5) As moléculas de proteínas são formadas por dezenas, centenas ou milhares de outras moléculas, ligadas em sequência, como os elos de uma corrente. Assinale a alternativa que menciona quais moléculas formam as proteínas. A) Aminoácidos. B) Glicose. C) Enzimas. Experimento * Este laboratório também está disponível para dispositivos Android. Conteúdo interativo disponível na plataforma de ensino! Pós Teste 1) Quais solventes solubilizaram as proteínas utilizadas no experimento? A) Hidróxido de sódio e cloreto de sódio; B) Ácido nítrico e ácido clorídrico; C) Água e etanol. 2) Com relação ao experimento de solubilidade de proteínas, assinale a alternativa correta. A) A elevação da temperatura do banho-maria não alterou a estrutura da albumina; B) O etanol solubilizou completamente a albumina; C) As variações de temperatura e de pH provocaram desnaturação da albumina. 3) De acordo com o experimento realizado e sabendo que as proteínas podem precipitar ou permanecer solúveis sob certas condições, assinale a alternativa correta. A) Se a concentração do cloreto de sódio aumentar no experimento, a solubilidade da albumina irá diminuir; B) O etanol é um bom precipitante de proteínas, apesar de ser miscível em água; C) Nas precipitações ocorridas pela adiçãodos ácidos nítrico e clorídrico, o processo não pode ser revertido pela adição de uma base. 4) Qual foi a solução que reagiu com a clara de ovo e a albumina e o resultado foi uma solução amarelada? A) Ácido nítrico concentrado; B) Ácido clorídrico concentrado; C) Hidróxido de sódio 12 M. 5) Identifique abaixo os equipamentos de proteção individual utilizados neste experimento? A) Jaleco, luvas e máscara; B) Jaleco, luvas e óculos; C) Somente Jaleco.
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