AP2- Microbiologia

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Nomes: Laura Puiati Salvador (2020082998); Bruno Ferreira Desmots da Silva
(2020075550)
Professor de prática: Flaviano.
Universidade Federal de Minas Gerais
Instituto de ciências Biológicas
Departamento de Microbiologia
Microbiologia Aplicada à Odontologia – ERE
2a Avaliação Prática – 5 pontos
Responda as questões abaixo, de acordo com a aula P3:
1. (1,5) Cite o meio de cultura ideal e discuta a finalidade da utilização do meio
escolhido para o isolamento e identificação presuntiva de bactérias do gênero
Staphylococcus da nasofaringe.
R: Foi utilizado uma placa de Ágar Hipertônico manitol (AHM).
Esse meio de cultura é seletivo para bactérias do gênero Staphylococcus, pois apresenta 75
g/l (7,5%) de NaCl e as bactérias desse gênero são halotolerantes, sendo capazes de
crescer em meios contendo até 10% de NaCl, enquanto que a alta concentração de NaCl
não é favorável para a maioria das outras bactérias.
Esse meio também é indicador devido a presença do açúcar manitol que não é utilizado por
todas as bactérias, havendo dentro do gênero Staphylococcus bactérias capazes de
fermentar o manitol e outras que não são. Assim, essa capacidade nos é revelada pela
presença do vermelho de fenol, um indicador de pH que dá a coloração rosa-avermelhada
para o meio de cultura ainda não inoculado. A partir da inoculação (feita por meio de um
swab esterilizado inserido na nasofaringe) e após a semeadura desse meio, as bactérias
crescem em sua superfície e a capacidade ou não de fermentar o manitol pode ser
observada a partir da mudança da coloração do vermelho fenol para o amarelo quando
ocorre a fermentação, pois a mesma resulta em produtos e pH ácidos (colônias manitol
positiva). Enquanto isso, bactérias que não fermentam o manitol mantêm o meio com a cor
rosa-avermelhada (colônias manitol negativas).
2. (1,5) Cite o meio de cultura ideal e discuta a finalidade da utilização do meio
escolhido para o isolamento e identificação presuntiva de bactérias do gênero
Streptococcus da orofaringe.
R: O meio de cultura ideal para o gênero Streptococcus da orofaringe é o ágar sangue. O
ágar sangue é um meio não seletivo e rico em componentes necessários para o
crescimento de bactérias fastidiosas, ou seja, bactérias que têm exigências nutricionais
muito específicas, como bactérias do gênero Streptococcus, precisando, assim, de um meio
complexo e rico em nutrientes, como o ágar sangue. Além disso, no ágar sangue é possível
identificar o padrão de hemólise da bactéria que formam as colônias no ágar. Nesse viés, no
gênero Streptococcus, há espécies que conseguem lisar completamente com as hemácias
presentes no meio de cultura, sendo o padrão conhecido como beta-hemólise. O padrão de
hemólise, conhecido como alfa-hemólise, é destacado por uma hemólise parcial das
hemácias. Por fim, o padrão gama representa os não hemolíticos, que se destacam pela
não hemólise das hemácias presentes no meio de cultura. Portanto, o ágar sangue, além de
prover nutrientes para bactérias fastidiosas, como as do gênero Streptococcus da
orofaringe, nos permite também observar o padrão de hemólise, que é uma etapa
necessária para o processo de identificação da espécie.
3. (2,0) De acordo com a videoaula P3, cite e explique a finalidade de 4 análises
importantes para a identificação presuntiva de cocos Gram-positivos dos gêneros
Staphylococcus ou Streptococcus:
a) Prova da catalase: essa análise permite a diferenciação de Staphylococcus e
Streptococcus, essa identificação tem por finalidade observar a produção da enzima
catalase, que degrada peróxido de hidrogênio em oxigênio e água, sendo que essa
liberação de oxigênio nos permite a leitura do teste. Assim, em contato com o peróxido de
hidrogênio, uma colônia de Streptococcus não promove qualquer alteração, pois não é
produtora de catalase, enquanto que uma colônia de Staphylococcus por ser capaz de
degradar o peróxido de hidrogênio em oxigênio e água, formando bolhas a liberação de
oxigênio.
b) Prova em coloração Gram: essa análise tem como objetivo a identificação de cocos
Gram-positivos através do seu arranjo. Por meio do Gram, observa-se que as bactérias do
gênero Staphylococcus se apresentam na forma de cocos, com a cor arroxeada, ou seja,
Gram-positivos, e com o arranjo em cachos, enquanto que as bactérias do gênero
Streptococcus se apresentam com o arranjo em cadeia.
c) Prova da coagulase: essa prova verifica a capacidade de um microorganismo cagular o
plasma pela produção da enzima Coagulase. É realizada colocando-se uma alçada de uma
colônia em 0,5 mL de plasma de coelho. A seguir, os tubos são incubados, em estufa
bacteriológica, a 37 graus celsius e procede-se à leitura a partir de 2 h de incubação.
Observa-se a formação ou não de coágulo no interior do tubo, o que indica prova positiva.
Sendo importante para a diferenciação de espécies do gênero Staphylococcus.
d) Prova da DNAse: Algumas espécies de Staphylococcus produzem a enzima DNAse,
que degrada DNA. Nessa prova, há a inoculação de colônias de Staphylococcus em meio
contendo DNA (ágar DNAse), obtido comercialmente. O meio inoculado é incubado à 37
graus celsius, por 24 horas, em estufa bacteriológica. Decorrido o período de incubação, no
momento da leitura colocar o HCl 1N de maneira que cubra as colônias, aguardar 30
segundos. Na leitura, haverá formação ou não de um halo transparente ao redor do
crescimento bacteriano. Caso haja a formação de halo transparente, identifica
Staphylococcus aureus; caso haja ausência de formação de halo transparente, outros
Staphylococcus .