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Prática 5 ATIVIDADE PEROXIDÁSICA EM EXTRATO BRUTO VEGETAL Etapa 1: Plotar graficamente os dados (dispersão XY) e solicitar equação (conforme perfil encontrado - reta ou polinomial ordem 3) Tabela 1: Dados de absorvância para oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de Guaiacol Amostra: Extrato bruto de Guaiacol Tempo (seg) Volume de amostra 0,01 mL 0,02 mL 0,03 mL 0,04 mL 0,05 mL 20 0.0060 0.0330 0.0280 0.0130 0.0550 40 0.0080 0.0390 0.0320 0.0290 0.0840 60 0.0110 0.0480 0.0500 0.0510 0.1110 90 0.0140 0.0650 0.0770 0.0830 0.1480 120 0.0180 0.0800 0.1010 0.1110 0.1820 150 0.0240 0.0930 0.1250 0.1380 0.2130 180 0.0280 0.1080 0.1430 0.1610 0.2430 240 0.0390 0.1350 0.1830 0.2070 0.3000 Coef. x 0.0001 0.0005 0.0005 0.0010 0.0016 Figura 1. Curvas de progresso para oxidação do guaiacol catalisada por diferentes quantidades de extrato bruto de peroxidase de rabanete deve ser apresentada em resultados! Etapa 2: Utilizar os coeficientes angulares (coef de x) das equações obtidas na etapa 1 para encontrar Vi e na sequência A e Ae. Preencher a tabela 2 que deve ser apresentada em resultados Tabela 2. Atividade peroxidásica de extrato bruto de Rabanete: Vi (µmol/min), A (U/ml) e Ae (U/mg). # Volume de amostra (mL) Coef angular Vi (µmol/min) A Ae (U/mL) (U/mg) 1 0.01 0.0001 0.0007 0.0677 0.2165 2 0.02 0.0005 0.0034 0.1692 0.5414 3 0.03 0.0005 0.0034 0.1128 0.3609 4 0.04 0.0010 0.0068 0.1692 0.5414 ɛtetraguaiacol: 26,6 mM/cm 5 0.05 0.0016 0.0108 0.2165 0.6929 Média A: 0.1504 0.4812 C (mg/mL) = 3,2 mg/mL Absorvância x Tempo 0,01 mL y = 0,0001x + 0,0017 R² = 0,9906 20 40 60 90 120 150 180 240 6.0000000000000001E-3 8.0000000000000002E-3 1.0999999999999999E-2 1.4E-2 1.7999999999999999E-2 2.4E-2 2.8000000000000001E-2 3.9E-2 0,02 mL y = 0,0005x + 0,0216 R² = 0,9984 20 40 60 90 120 150 180 240 3.3000000000000002E-2 3.9E-2 4.8000000000000001E-2 6.5000000000000002E-2 0.08 9.2999999999999999E-2 0.108 0.13500000000000001 0,03 mL y = -8E-09x3 + 3E-06x2 + 0,0005x + 0,0138 R² = 0,9971 20 40 60 90 120 150 180 240 2.8000000000000001E-2 3.2000000000000001E-2 0.05 7.6999999999999999E-2 0.10100000000000001 0.125 0.14299999999999999 0.183 0,04 mL y = -2E-09x3 - 8E-09x2 + 0,001x - 0,0094 R² = 0,9995 20 40 60 90 120 150 180 240 1.2999999999999999E-2 2.9000000000000001E-2 5.0999999999999997E-2 8.3000000000000004E-2 0.111 0.13800000000000001 0.161 0.20699999999999999 0,05 mL y = 5E-09x3 - 3E-06x2 + 0,0016x + 0,0238 R² = 1 20 40 60 90 120 150 180 240 5.5E-2 8.4000000000000005E-2 0.111 0.14799999999999999 0.182 0.21299999999999999 0.24299999999999999 0.3 Tempo (segundos) Absorvância 470 nm Planilha2
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