Aula Prática 7 Resolução Determinação de pH e temperatura ótimos de peroxidase vegetal

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Prática 7
					 
				 DETERMINAÇÃO DE PH E TEMPERATURA ÓTIMOS DE PEROXIDASE VEGETAL
	Etapa 1: Plotar graficamente os dados (dispersão XY) e solicitar equação (conforme perfil encontrado - reta ou polinomial ordem 3)
	Tabela 1. Dados de absorvância para oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete em diferentes valores de pH
	 Amostra: Extrato bruto de Rabanete
	Tempo (seg)	 pH
		pH 4,0	pH 5,0	pH 6,0	pH 7,0	pH 8,0	pH 9,0
	20	0.0220	0.0250	0.0350	0.0300	0.0210	0.028
	40	0.0270	0.0320	0.0470	0.0400	0.0310	0.029
	60	0.0330	0.0420	0.0610	0.0520	0.0400	0.030
	90	0.0410	0.0600	0.0830	0.0710	0.0560	0.030
	120	0.0520	0.0790	0.1020	0.0880	0.0690	0.031
	150	0.0600	0.0990	0.1210	0.1040	0.0820	0.032
	180	0.0720	0.1180	0.1390	0.1190	0.0920	0.033
	240	0.0800	0.1550	0.1720	0.1480	0.1190	0.034
	Coef. x	0.0003	0.0006	0.0007	0.0006	0.0006	3.00E-05
																Figura 1. Curvas de progresso para oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de etrato bruto de rabanete: efeito de pH
																			 deve ser apresentada em resultados!
	Tabela 2. Dados de absorvância para oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete em diferentes temperaturas
	Tempo (seg)	Temperatura 
		25 °C	45 °C	100 °C
	20	0.0430	0.0490	0.0050
	40	0.0540	0.0690	0.0030
	60	0.0680	0.0950	0.0020
	90	0.0880	0.1270	0.0030
	120	0.1090	0.1590	0.0030
	150	0.1280	0.1890	0.0030
	180	0.1430	0.2170	0.0030
	240	0.1760	0.2700	0.0040
	Coef. x	0.000600	0.001200	-0.0000001
								Figura 2. Curvas de progresso para oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de etrato bruto de rabanete: efeito de temperatura
										 deve ser apresentada em resultados!
	 Etapa 2: Utilizar os coeficientes angulares (coef de x) das equações obtidas na etapa 1 para encontrar Vi. Preencher as tabela 3 e 4 que devem ser apresentadas em resultados
	Tabela 3. Velocidade de reação de oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete em diferentes pHs
	#	pH	Coef angular	Vi (µmol/min) 
	1	4	0.0003	0.0020
	2	5	0.0006	0.0041
	3	6	0.0007	0.0047
	4	7	0.0006	0.0041		ɛtetraguaiacol: 26,6 mM/cm
	5	8	0.0006	0.0041
	6	9	3.00E-05	0.0002
	Tabela 4. Velocidade de reação de oxidação do guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete em função da temperatura.
	#	Temperatura (°C)	Coef angular	Vi (µmol/min) 
	1	25	0.000600	0.0041
	2	45	0.001200	0.0081
	3	100	-0.000000	-0.0000		ɛtetraguaiacol: 26,6 mM/cm
	 Etapa 3: Plotar graficamente os dados (dispersão XY) de velocidade de oxidação de guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete em função do pH e da temperatura.Estas figuras devem ser apresentadas em resultados
		pH	Vi (µmol/min) 
		4	0.0020
		5	0.0041
		6	0.0047
		7	0.0041
		8	0.0041
		9	0.0002
					Figura 3. Velocidade de oxidação de guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete: Efeito de pH
		Temperatura (°C)	Vi (µmol/min) 
		25	0.0041
		45	0.0081
		100	-0.0000
					Figura 4. Velocidade de oxidação de guaiacol catalisada por peroxidase de rabanete: Efeito de temperatura
Vi (µmol/min) 	4	5	6	7	8	9	2.0300751879699245E-3	4.0601503759398489E-3	4.7368421052631574E-3	4.0601503759398489E-3	4.0601503759398489E-3	2.0300751879699248E-4	pH
Vi (µmol/min) 
Vi (µmol/min) 	25	45	100	4.0601503759398489E-3	8.1203007518796978E-3	-6.7669172932330822E-7	Temperatura (°C)
Vi (µmol/min)
EXEMPLO
pH 4,0	20	40	60	90	120	150	180	240	2.1999999999999999E-2	2.7E-2	3.3000000000000002E-2	4.1000000000000002E-2	5.1999999999999998E-2	0.06	7.1999999999999995E-2	0.08	pH 5,0	20	40	60	90	120	150	180	240	2.5000000000000001E-2	3.2000000000000001E-2	4.2000000000000003E-2	0.06	7.9000000000000001E-2	9.9000000000000005E-2	0.11799999999999999	0.155	pH 6,0	20	40	60	90	120	150	180	240	3.5000000000000003E-2	4.7E-2	6.0999999999999999E-2	8.3000000000000004E-2	0.10199999999999999	0.121	0.13900000000000001	0.17199999999999999	pH 7,0	20	40	60	90	120	150	180	240	0.03	0.04	5.1999999999999998E-2	7.0999999999999994E-2	8.7999999999999995E-2	0.104	0.11899999999999999	0.14799999999999999	pH 8,0	20	40	60	90	120	150	180	240	2.1000000000	000001E-2	3.1E-2	0.04	5.6000000000000001E-2	6.9000000000000006E-2	8.2000000000000003E-2	9.1999999999999998E-2	0.11899999999999999	pH 9,0	20	40	60	90	120	150	180	240	2.8000000000000001E-2	2.9000000000000001E-2	0.03	0.03	3.1E-2	3.2000000000000001E-2	3.3000000000000002E-2	3.4000000000000002E-2	
Absorvância 470 nm x Tempo (segundos)
 
pH 4,0	y = 0,0003x + 0,0168
R² = 0,9856
20	40	60	90	120	150	180	240	2.1999999999999999E-2	2.7E-2	3.3000000000000002E-2	4.1000000000000002E-2	5.1999999999999998E-2	0.06	7.1999999999999995E-2	0.08	pH 5,0	y = 0,0006x + 0,0081
R² = 0,9971
20	40	60	90	120	150	180	240	2.5000000000000001E-2	3.2000000000000001E-2	4.2000000000000003E-2	0.06	7.9000000000000001E-2	9.9000000000000005E-2	0.11799999999999999	0.155	pH 6,0	y = -2E-09x3 + 2E-07x2 + 0,0007x + 0,0207
R² = 0,9998
20	40	60	90	120	150	180	240	3.5000000000000003E-2	4.7E-2	6.0999999999999999E-2	8.3000000000000004E-2	0.10199999999999999	0.121	0.13900000000000001	0.17199999999999999	pH 7,0	y = -1E-09x3 + 2E-07x2 + 0,0006x + 0,0175
R² = 0,9997
20	40	60	90	120	150	180	240	0.03	0.04	5.1999999999999998E-2	7.0999999999999994E-2	8.7999999999999995E-2	0.104	0.11899999999999999	0.14799999999999999	pH 8,0	y = 2E-09x3 - 1E-06x2 + 0,0006x + 0,0088
R² = 0,9993
20	40	60	90	120	150	180	240	2.1000000000000001E-2	3.1E-2	0.04	5.6000000000000001E-2	6.9000000000000006E-2	8.2000000000000003E-2	9.1999999999999998E-2	0.11899999999999999	pH 9,0	y = 3E-05x + 0,0279
R² = 0,9749
20	40	60	90	120	150	180	240	2.8000000000000001E-2	2.9000000000000001E-2	0.03	0.03	3.1E-2	3.2000000000000001E-2	3.3000000000000002E-2	3.4000000000000002E-2	Tempo (segundos)
Absorvância 470 nm
Absorvância 470 nm x Tempo (segundos)
 
25 °C	y = -2E-09x3 + 5E-07x2 + 0,0006x + 0,0293
R² = 0,9995
20	40	60	90	120	150	180	240	4.2999999999999997E-2	5.3999999999999999E-2	6.8000000000000005E-2	8.7999999999999995E-2	0.109	0.128	0.14299999999999999	0.17599999999999999	45 °C	y = -6E-10x3 - 6E-07x2 + 0,0012x + 0,0242
R² = 0,9998
20	40	60	90	120	150	180	240	4.9000000000000002E-2	6.9000000000000006E-2	9.5000000000000001E-2	0.127	0.159	0.189	0.217	0.27	100 °C	y = -1E-07x + 0,0033
R² = 0,0001
20	40	60	90	120	150	180	240	5.0000000000000001E-3	3.0000000000000001E-3	2E-3	3.0000000000000001E-3	3.0000000000000001E-3	3.0000000000000001E-3	3.0000000000000001E-3	4.0000000000000001E-3	Tempo (segundos)
Absorvância 470 nm
pH ótimo
Temperatura
ótima
Planilha2