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12/03/2024 1 Parasitologia Clínica Trypanosoma cruzi- Doença de Chagas, Clínicos e Laboratoriais Prof. Adriano Rios da Silva Santana Leite adriano.leite@udf.edu.br @prof.adriano_rios 1 2 12/03/2024 2 Barbeiro se alimentando do ser humano 3 4 12/03/2024 3 Trypanosoma aderindo-se à célula muscular. T. cruzi penetrando em célula do miocárdio. Tripanossomos, já sem flagelo, alojados no músculo cardíaco. MORFOLOGIA: Amastigota: intracelular (tecidos do hospedeiro vertebrado) Tripomastigota: sangue circulante triatomíneos, em meios de cultura Epimastigota: intestino posterior de triatomíneos, meios de cultura 5 6 12/03/2024 4 7 8 12/03/2024 5 A transmissão oral ocorre por ingestão de barbeiros moídos junto com cana-de-açúcar ou açaí Fezes do barbeiro Transfusão sanguínea Transplantes Transmissão congênita Acidentes laboratoriais MECANISMOS DE TRANSMISSÃO Principal agente de transmissão: o barbeiro Há alguns anos a transmissão oral tem ultrapassado a transmissão pelas fezes do barbeiro 9 10 12/03/2024 6 História natural da doença de Chagas Forma aguda clinicamente aparente ou assintomática: altas parasitemias, extensa lesão tecidual. Forma crônica indeterminada (assintomática) e forma crônica determinada (comprometimento cardíaco, digestivo ou misto): baixas parasitemias, raros ninhos de amastigotas nos tecidos. 11 12 12/03/2024 7 Fase Aguda Fase Aguda Período Indeterminado Período Indeterminado Fase Crônica Fase Crônica Sistema Imune Sistema Imune Fases da doença Aguda: parasitemia elevada e ação do sistema imunológico; Crônica: número de parasitos reduzidos na circulação Fases da doença Aguda: parasitemia elevada e ação do sistema imunológico; Crônica: número de parasitos reduzidos na circulação PATOGENIA DA DOENÇA DE CHAGAS Se o indivíduo superou a fase aguda, pode-se dizer que a resposta imune foi parcialmente eficiente, o que leva à FASE CRÔNICA Segue-se um tempo de 10-30 anos chamada de FASE ASSINTOMÁTICA Nessa fase o parasitismo decresce – redução da reação inflamatória – menor multiplicação dos parasitas (quiescência dos parasitas) – mesmo assim, permanece ocorrendo lesões, principalmente no coração, esôfago e cólon 13 14 12/03/2024 8 Resposta imune T. cruzi Resposta imune do hospedeiro Humoral Protetora Anticorpos líticos Celular Inata MØs Adaptativa Linfócitos T Células dendríticas Linfócitos B Células NK Fagocitose Glicosilfosfadilinositol (GPI) reconhecida por TLR2 e TLR4 Trypanosoma cruzi Plasmodium sp Toxoplasma gondii 15 16 12/03/2024 9 Trypanosoma cruzi Célula Dendríca LinfócitoB Sistema Complemento Ativação por TLRs Macrófago LinfócitoTCD8+ Importante perfil citotóxico Antiorpos anti protozoário Ativação por TLRs Célulasnucleadas Replicação dentro de fagolisossomos Pode haver escape para o citosol NK IFN-γ IL-12 TNF-α Óxido nítrico O2 - Morte de parasitas intracelulares MO X X X IFN-γ Th1 MO = macrófagos 17 18 12/03/2024 10 NK IFN-γ IL-12 TNF-α Óxido nítrico O2 - Morte de parasitas intracelulares MO X X X IFN-γ Th1 MO = macrófagos Fase Aguda: Sintomática ou assintomática Estado imunológico Manifestações locais 19 20 12/03/2024 11 • Fase aguda Febre Edema Hepatomegalia Esplenomegalia Insuficiência cardíaca Diagnóstico • Microscopia – detecção de tripomastigotas sanguíneos • gota espessa - esfregaço • após centrifugação em tubos de micro-hematócrito • Sorologia – níveis elevados de IgM (sensibilidade baixa) • imunoflorescência indireta • ELISA Fase aguda 21 22 12/03/2024 12 PATOGENIA DA DOENÇA DE CHAGAS CRÔNICA MIOCARDIOPATIA • Dilatação, hipertrofia, miocardite e fibrose • Aneurisma da ponta do ventrículo esquerdo • Trombose/embolias • Destruição de neurônios do sistema nervoso autônomo (desnervação) MEGAS MUITOSANOS DEPOIS DE CONTÍNUAS INVASÕES DO MÚSCULO LISO/ESTRIADO E DOS NEURÔNIOS E EVENTUAL PARASITEMIA... •Lesões inflamatórias na parede do intestino ou esôfago •Destruição de células nervosas (desnervação) A fibrose que pode ser encontrada no coração é irreversível e pode levar a insuficiência cardíaca 23 24 12/03/2024 13 25 26 12/03/2024 14 Fase Crônica: Baixa parasitemia Conduta: Pesquisa Indireta de T. cruzi Xenodiagnóstic o Hemoculturas, PCRInoculação em animais de laboratório Testes Sorológicos: Pesquisa de IgG por imunofluorescência indireta, ELISA, hemaglutinação, fixação de complemento e reação de precipitação 27 28 12/03/2024 15 Nifurtimox (Lampit): Nitro-derivado que age através da produção de radicais livres. O parasita é mais sensível devido a uma deficiência no seu repertório de enzimas anti-oxidantes.; Toxicidade freqüente (anorexia, náusea, vômitos, reações alérgicas); Parcialmente efetivo na fase aguda; Inativo na fase crônica; Tratamento prolongado (até 90 dias); 100 mg/Kg por dia; Somente disponível nos EUA e Canadá. Tratamento 29 30 12/03/2024 16 Benznidazole (Rochagan): • Modo de ação ainda não completamente claro. Parece inibir a síntese de RNA e proteína; • Toxicidade frequente (Anorexia, cefaléia, dermatopatia, gastralgia, insônia, náuseas, perda de peso, polineuropatia, vômitos); • Parcialmente efetivo na fase aguda; • Inativo na fase crônica; • Tratamento prolongado (até 60 dias); • adultos: 5 mg/Kg por dia. • crianças: 5-10 mg/Kg por dia. 31