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ROTEIRO AULA PRÁTICA BROMATOLOGIA 2025 SEGURANÇA E NORMAS DE TRABALHO EM LABORATÓRIO O laboratório é a oficina de trabalho de um pesquisador, frequentá-lo exige cuidado, atenção, conhecimento e respeito. NORMAS DE SEGURANÇA É de extrema importância que o estudante siga as instruções e recomendações dadas pela professora Usar sempre jaleco comprido, calças ou saias compridas e sapatos fechados. Prender os cabelos compridos. Ler todo o roteiro do experimento antes de executá-lo e certificar-se de que os reagentes e solventes foram corretamente selecionados. Verificar que tipos de substâncias serão utilizados (tóxicas, explosivas, corrosivas, inflamáveis) e empregar as medidas de segurança adequadas no manuseio de cada uma. Óculos de proteção e luvas devem ser usados no manuseio de substâncias corrosivas e causadoras de irritação. Trabalhar na capela durante a utilização de substâncias tóxicas. Não comer ou beber no laboratório e, muito menos, fumar. Não correr no laboratório, evitar movimentos bruscos. Manter a bancada sempre limpa. Caso algum produto químico derrame, informar ao professor e providenciar a limpeza adequada. A vidraria a ser utilizada deve estar limpa e totalmente seca. A utilização de vidraria molhada pode comprometer os resultados. Não usar vidrarias quebradas ou trincadas. E comunicar ao responsável a presença de vidrarias com essas características. Lavar sempre as mãos durante e depois dos trabalhos; nunca levar as mãos aos olhos e bocas, durante os trabalhos. Nunca despejar solvente em pias ou tanques. Diante da dúvida, pergunte a técnica de laboratório qual a melhor operação a ser tomada. Certificar-se do uso adequado dos coletores. Deve haver no laboratório, frascos coletores para os diferentes tipos de solventes (clorados, não clorados e misturas de reagentes) e sólidos (orgânicos e inorgânicos). Localizar o equipamento de segurança: extintor, chuveiro de segurança, caixa de primeiros socorros, etc. Evitar o uso do bico de Bunsen para aquecimento de substâncias orgânicas; nesses casos usar chapa ou manta aquecedora, pois a maioria dos solventes orgânicos é inflamável. Quando o uso de chama for necessário, afastar os solventes orgânicos das proximidades da fonte da chama. A medida de volumes de líquidos pode ser feita na maioria dos casos em provetas. Quando for necessário o uso de pipetas, utilizar pêra de sucção (nunca pipetar diretamente com a boca). Desligar aquecedores e banhos que não estiverem sendo utilizados. Lavar a vidraria utilizada, após experimentos. No caso de dúvidas, sempre perguntar ao docente, a técnica de laboratório ou ao discente monitor da disciplina. Bom trabalho! PRÁTICA 01: DETERMINAÇÃO DE ACIDEZ TITULÁVEL E PH EM LEITE A determinação de acidez pode fornecer um dado valioso na apreciação do estado de conservação de um produto alimentício. Um processo de decomposição, seja por hidrólise, oxidação ou fermentação, altera quase sempre a concentração dos íons de hidrogênio. Os métodos de determinação da acidez podem ser os que avaliam a acidez titulável ou fornecem a concentração de íons de hidrogênio livres, por meio do pH. Os métodos que avaliam a acidez titulável resumem-se em titular com soluções de álcali padrão a acidez do produto ou de soluções aquosas ou alcoólicas do produto e, em certos casos, os ácidos graxos obtidos dos lipídios. Pode ser expressa em mL de solução molar por cento ou em gramas do componente ácido principal. A maior parte dos alimentos tem pH na faixa de 5,0 a 6,5, como carnes, pescados e alguns vegetais (milho, ervilha, cogumelos). Outros são um pouco mais ácidos, com pH abaixo de 5,0 como o palmito, suco de tomate e mais ácidos (pH 2,8 a 3,5) como suco de limão, laranja e vários refrigerantes. A maioria dos microrganismos desenvolve-se em pH em torno da neutralidade (6,6 a 7,5). ACIDEZ TITULÁVEL Materiais Proveta de 50 mL, Frasco Erlenmeyer de 125 mL, Bureta de 25 mL, Balança analítica, Espátula metálica Pipetas volumétricas de 1 e 10 mL. Reagentes Solução fenolftaleína Solução de hidróxido de sódio 0,1 M ou 0,01 M Amostras Leite sem pasteurizar Procedimento 1. Pese de 1 a 5 g ou pipete de 1 a 10 mL da amostra, 2. Transfira para um frasco Erlenmeyer de 125 mL com o auxílio de 50 mL de água. 3. Adicione de 2 a 4 gotas da solução fenolftaleína 4. Titule com solução de hidróxido de sódio 0,1 ou 0,01 M, até coloração rósea Cálculos: A cada 0,1 mL de solução de hidróxido de sódio usada equivale a 1°Dornic PH Materiais Balança analítica Béquer (250mL) pH-metro Amostras Leite UHT 24h temperatura de refrigeração Leite UHT 24h temperatura ambiente Leite pasteurizado 24h temperatura de refrigeração Leite pasteurizado 24h temperatura ambiente Procedimento 1. Realizar a calibração do equipamento 2. Adicionar 50mL de amostra em um béquer 3. Realizar a leitura com equipamento Tabela – Avaliação do pH em amostras de leite Leite Temperatura pH Leite UHT 24h temperatura refrigeração Leite UHT 24h temperatura ambiente Leite Pasteurizado 24h temperatura refrigeração Leite Pasteurizado 24h temperatura ambiente Tabela – Interpretação de resultados pH Acidez Dornic (°D) Interpretação de resultados 6,6 a 6,8 15 a 18 Leite normal (fresco) 6,9 15 Leite típico alcalino: leite de vaca com mastite, leite na fase final de lactação, leite de retenção, leite fraudado com água 6,5 a 6,6 19 a 20 Leite ligeiramente ácido: leite de princípio de lactação, leite com colostro, leite em início de processo de fermentação 6,4 20 Leite não resiste ao aquecimento a 110°C 6,3 22 Leite não resiste ao aquecimento a 100°C 6,1 24 Leite não resiste ao aquecimento a 70°C 5,2 55 a 60 Leite que começa a flocular à temperatura ambiente Discussão 1. Discutir as diferenças de pH do leite pasteurizado do sob refrigeração e a temperatura ambiente 2. Discutir as diferenças de pH do leite UHT sob refrigeração e à temperatura ambiente 3. Quais leites, considerando a leitura do pH, estão inaptos ao consumo? 4. Em qual dos leites era esperado um pH mais baixo após 24h de aberto (UHT X pasteurizado)? 5. Consultar RTIQ do leite Referências 1. Instituto Adolfo Lutz. Métodos Físico-Químicos para Análise de Alimentos, 4a ed., 2005. 2. SILVA, C. O.; TASSI, E. M. M.; PASCOAL, G. B. Ciência dos Alimentos: Princípios de bromatologia. 1ª ed. Rio de Janeiro: Rubio, 2016. 3. MAPA. IN n° 76