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Contagem de hemáciasContagem de hemáciasContagem de hemáciasContagem de hemácias
e de plaquetase de plaquetase de plaquetase de plaquetas
Prof. Prof. Prof. Prof. Jéssica Zirondi Caitano Jéssica Zirondi Caitano Jéssica Zirondi Caitano Jéssica Zirondi Caitano 
IntroduçãoIntroduçãoIntroduçãoIntrodução
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As hemácias, também chamadas de glóbulos vermelhos ou eritrócitos, correspondem à
maior quantidade de células circulantes do sangue. Têm, como principal função, o
transporte de gases sanguíneos, sendo oxigênio o principal. Além disso, têm um tempo de
vida de, aproximadamente, 120 dias no sangue periférico.
O exame “hemograma” apresenta uma avaliação minuciosa dos eritrócitos, tendo, como
parte dessa análise, a contagem de eritrócitos por mm³ de sangue. Para a realização da
contagem de hemácias, dois métodos podem ser aplicados: a contagem manual e a
contagem automatizada. A contagem manual é feita a partir da utilização da câmara de
Neubauer, na qual o sangue é diluído em proporção conhecida em líquido de Hayem, que
mantém a integridade da célula no meio. Contudo, essa metodologia não é muito indicada
devido à alta chance de erros. 
Os aparelhos hematológicos, geralmente, utilizam o método de contagem de pulso de
impedância (princípio de Coulter) para realizar a contagem dos eritrócitos. Assim, a
contagem automatizada apresenta maior precisão e resultados mais confiáveis.
A elevação da quantidade de eritrócitos pode estar associada a policitemias, e a redução
aos processos anêmicos. Os valores de eritrócitos se diferem quando relacionados à idade
e ao sexo. Sendo assim, há valores de referência diferentes de acordo com as variáveis:
Valor de referência para homem adulto: 4,5 - 5,9 Milhões/mm³.
Valor de referência para mulher adulta: 4,0 - 5,2 Milhões/mm³.
Valor de referência para recém-nascidos: 3,9 - 6,0 Milhões/mm³.
As plaquetas, também chamadas de trombócitos, são fragmentos citoplasmáticos de
megacariócitos (por isso, não são consideradas células), que participam ativamente dos
eventos relacionados à hemostasia. 
O exame hemograma também fornece uma avaliação quantitativa das plaquetas: a
contagem de plaquetas. Em alguns laudos, além da quantidade de plaquetas, outros
resultados também são fornecidos, a fim de obter uma análise plaquetária mais minuciosa.
Isso inclui: plaquetócrito (PCT), índice de anisocitose plaquetária (PDW), volume plaquetário
médio (VPM), índice de plaquetas imaturas (IPF) e marcador de macroplaquetas e
plaquetas gigantes (P-LCR), formando, assim, o plaquetograma. 
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A avaliação morfológica das plaquetas em lâmina apresenta grande importância quando se
trata da investigação dos problemas relacionados à hemostasia. A contagem total de
plaquetas pode ser realizada a partir de métodos automatizados, os quais fornecem um
resultado mais satisfatório devido à precisão dos contadores hematológicos, ou mediante a
contagem manual em câmara de Neubauer. A realização da metodologia manual exige um
grande rigor técnico e faz uso de líquidos hemolisantes ou não hemolisantes.
Além da metodologia realizada tradicionalmente em câmara de Neubauer, a contagem total
de plaquetas pode ser realizada em esfregaço sanguíneo corado, a partir de alguns
métodos, como Fônio modificado, Bárbara O’connor, dentre outros. O número de plaquetas
em um indivíduo pode variar entre 150.000 e 450.000/mm³. A redução do valor de
plaquetas é denominada “plaquetopenia” ou “trombocitopenia”, enquanto o aumento do
valor de plaquetas é definido como “plaquetose” ou “trombocitose”. É preciso lembrar que
esse resultado não avalia a função das plaquetas, apenas as quantifica. 
Nota: na grande maioria, os valores de plaquetopenia podem estar associados a erros pré-
analíticos. Dessa forma, uma nova coleta da amostra deve ser realizada, a fim de confirmar o
resultado.
O objetivo desta aula é determinar o valor total de hemácias e plaquetas por mm3 de
sangue a partir da metodologia de contagem manual em câmara de Neubauer e interpretar
os resultados obtidos.
Materiais eMateriais eMateriais eMateriais e
EquipamentosEquipamentosEquipamentosEquipamentos
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Contagem Manual de HemáciasContagem Manual de HemáciasContagem Manual de HemáciasContagem Manual de Hemácias
Luva descartável
Tubos de ensaio para 8 ou 10 mL 
Estante para tubos 
Canetas para identificação
Micropipeta para 20 µL 
Ponteiras
Descarte de ponteira 
Câmara de Neubauer 
Água destilada 
Placa de Petri grande 
Tubo com sangue total em EDTA 
Papel higiênico 
Líquido de Hayem
Microscópio
Lamínula paracâmara de Neubauer
Algodão
Homogeneizador automático para tubos
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Contagem Manual de PlaquetasContagem Manual de PlaquetasContagem Manual de PlaquetasContagem Manual de Plaquetas
Luva descartável
Tubos de ensaio 
Estante para tubos 
Canetas para identificação
Micropipetas para 20 µL 
Micropipetas para 400 µL 
Ponteiras
Descarte de ponteira 
Câmara de Neubauer 
Água destilada 
Placa de Petri grande 
Tubo com sangue total em EDTA 
Papel higiênico 
Solução de oxalato de amônio a 1%
Microscópio
Lamínula paracâmara de Neubauer
Algodão
Homogeneizador automático para tubos
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Contagem Manual de HemáciasContagem Manual de HemáciasContagem Manual de HemáciasContagem Manual de Hemácias
Aliquotar o líquido de Hayem em um béquer;
Pipetar 4mL de líquido de Hayem em um tubo de ensaio;
Pipetar 20μL de sangue total homogeneizado (limpar a ponteira externamente com
papel absorvente) no líquido diluidor (lavando a ponteira no líquido diluidor a fim de
retirar toda amostra da mesma);
Tampar o tubo e homogeneizar por inversão;
Preencher corretamente a câmara de Neubauer;
Deixar a câmara de Neubauer em repouso por 5 minutos em câmara úmida;
Ajustar a câmara de Neubauer na mesa do microscópio;
Regular a luz do microscópio: intensidade no máximo, diafragma quase fechado e
condensador baixo;
Focalizar o material em objetiva de 10x ou 40x (começando pela objetiva de menor
aumento até de maior aumento);
Realizar a contagem em 5 quadrantes centrais da câmara de Neubauer;
Somar o valor contado em todos os quadrantes e multiplicar o valor da soma de
hemácias por 10.000 ou utilizar a seguinte fórmula:
He/mm³ = He contadas x 5 x 10 x 200
Em que: 
5 = fator de conversão para 1 mm²;
10 = fator de conversão para 1 mm³;
200 = fator de conversão da diluição.
Interpretar o resultado.
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Contagem Manual de PlaquetasContagem Manual de PlaquetasContagem Manual de PlaquetasContagem Manual de PlaquetasPipetar 400 μL de solução diluidora hemolisante no tubo de ensaio;
Transferir 20 μL de sangue bem homogeneizado, limpar a ponteira externamente com
papel absorvente e lavá-la no líquido diluidor;
Homogeneizar e aguardar 5 minutos (para ocorrer a hemólise);
Homogeneizar novamente;
Preencher corretamente a câmara de Neubauer;
Colocar a câmara de Neubauer em uma placa de Petri contendo algodão úmido (câmara
úmida) por 15 minutos (para sedimentação das plaquetas);
Ajustar a câmara de Neubauer na mesa do microscópio;
Regular a luz do microscópio: intensidade no máximo, diafragma quase fechado e
condensador baixo;
Focalizar o material em objetiva de 40x (começando pela objetiva de menor aumento até
de maior aumento);
Realizar a contagem em 5 quadrantes centrais da câmara de Neubauer;
Somar o valor contado em todos os quadrantes e multiplicar o valor da soma de
plaquetas por 1.000 ou utilizar a seguinte fórmula:
Plaquetas / mm³ = plaquetas contadas x 5 x 10 x 20
Em que:
5 = fator para área da câmara;
10 = fator para o volume da câmara;
20 = fator da diluição.
Imagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitos
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Imagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitosImagem 1 - Características dos eritrócitos
Fonte: a autora.
Morfologia do eritrócito em sangue periférico apresentando características normais:
redondo, discoide, bicôncavo, anuclear, tamanho uniforme e com coloração vermelha mais
intensa nas bordas e mais pálido no centro. (1A) Eritrócitos visualizados em microscópio
óptico após a coloração com corantes hematológicos e (1B) eritrócitos em formato 3D.
Imagem 2 - Hemácias visualizadas no microscópio em aumento de 40x durante a contagemImagem 2 - Hemácias visualizadas no microscópio em aumento de 40x durante a contagemImagem 2 - Hemácias visualizadas no microscópio em aumento de 40x durante a contagemImagem 2 - Hemácias visualizadas no microscópio em aumento de 40x durante a contagem
manualmanualmanualmanual
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Fonte: a autora.
Trata-se de hemácias visualizadas em câmara de Neubauer diluídas em líquidos de Hayem
durante a contagem manual.
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Imagem 3 - Contagem de hemácias e plaquetas em câmara de NeubauerImagem 3 - Contagem de hemácias e plaquetas em câmara de NeubauerImagem 3 - Contagem de hemácias e plaquetas em câmara de NeubauerImagem 3 - Contagem de hemácias e plaquetas em câmara de Neubauer
Fonte: Vivas ([2022], p. 8).
A contagem de hemácias/plaquetas é realizada de forma semelhante na câmara de
Neubauer. Para ambas, deve ser contada a quantidade de hemácias/plaquetas em cinco
quadrantes centrais, indicados na imagem pela letra H (3A). Para cada quadrante contato,
deve seguir a regra da imagem (3B): contar as hemácias/plaquetas sobrepostas nas linhas
de apenas dois lados do quadrante, assim como mostram as células indicadas na cor preta
da imagem. Nesse caso, apenas as hemácias/plaquetas representadas pela cor preta
deverão ser contadas. Após a contagem, a fórmula utilizada para a realização do cálculo é
diferente para cada uma.
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Imagem 4 - MegacariócitoImagem 4 - MegacariócitoImagem 4 - MegacariócitoImagem 4 - Megacariócito
Fonte: a autora.
O megacariócito é uma célula grande encontrada na medula óssea. A partir da
fragmentação do citoplasma, ocorre a formação das plaquetas, que atingem a corrente
sanguínea a partir dos sinusoides.
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Imagem 5 - Plaquetas visualizadas na microscopiaImagem 5 - Plaquetas visualizadas na microscopiaImagem 5 - Plaquetas visualizadas na microscopiaImagem 5 - Plaquetas visualizadas na microscopia
Fonte: a autora.
As setas indicam as plaquetas visualizadas em microscopia óptica com aumento de 40x,
diluídas em líquido não hemolisante.
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Na PráticaNa PráticaNa PráticaNa Prática
18:04
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Veri!que seu AprendizadoVeri!que seu AprendizadoVeri!que seu AprendizadoVeri!que seu Aprendizado
1) Um profissional de um laboratório, com o intuito de liberar o valor total de eritrócitos,
preparou a diluição dos eritrócitos em líquido de Hayem e, depois, preencheu a câmara de
Neubauer. As imagens a seguir são referentes às hemácias visualizadas na microscopia
(aumento de 40x), mais especificamente, durante a contagem. Determine a quantidade de
eritrócitos do paciente e interprete o resultado.
2) Durante a contagem de plaquetas na câmara de Neubauer, utilizando oxalato de amônio
como líquido diluidor, o analista contou: 59 plaquetas no quadrante superior direito, 68 no
quadrante superior esquerdo, 61 no quadrante central, 72 no quadrante inferior direito e 64
no quadrante inferior esquerdo. Calcule o valor de plaquetas do paciente.
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Orientação de respostaOrientação de respostaOrientação de respostaOrientação de resposta
ReferênciasReferênciasReferênciasReferências
FAILACE, R. Hemograma: manual de interpretação. Porto Alegre: Artmed, 2015.
SILVA, P. H. da et al. Hematologia laboratorial: teoria e procedimentos. Porto Alegre:
Artmed, 2016.
VIVAS, W. L. P. Manual prático de hematologia. [S. l.: s. n.], [2022]. Disponível em:
http://docente.ifsc.edu.br/rosane.aquino/MaterialDidatico/AnalisesClinicas/hemato/Manual
%20de%20Hematologia.pdf. Acesso em: 25 out. 2022.
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