31 - Isolamento de nematoides

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COLETA DE AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES PARA ANÁLISE NEMATOLÓGICA
ISRAEL LIMA MEDINA
FITONEMATÓIDES
Seres que se encontram no solo parasitando plantas 
cultivadas em:
Orgãos subterrâneos (raízes, bulbos, tubérculos e rizomas); 
Orgãos aéreos (caules, folhas e sementes);
Organismos quando penetrarem e se alimentarem, causam 
danos mecânicos, além de retirarem nutrientes da planta 
para o seu próprio sustento;
Estes fitonematóides não se distribuem uniformemente no 
solo.
Densidade de nematóides
P
r
o
d
u
ç
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o
FITONEMATÓIDES
Ferraz, et al. 2010
FITONEMATÓIDES
Desta forma:
Vários métodos de coleta de nematóides são utilizados;
Do mesmo modo a extração é diferente;
Certificação do agente causal da doença 
FITONEMATÓIDES
SINTOMAS
SINTOMAS OCASIONADOS POR 
NEMATÓIDES SEDENTÁRIOS
SINTOMAS OCASIONADOS POR 
NEMATÓIDES MIGRADORES
SINTOMAS OCASIONADOS POR 
NEMATÓIDES NA PARTE ÁEREA DA PLANTA
DADOS DA ÁREA A SER COLETADA
 
Nº. da ficha:.............. Data da coleta: ........../ ........./ .............. 
Cód. /Usuário:.................................................. Data de recebimento Lab: ......./ ......./ ....... 
Nome /usuário:................................................ Nº. Amostra: ............... 
Endereço:........................................................ Município: 
CEP ...................... EST ................................. DDD ....... Fone ...........Fax......... Cel........... 
 E-mail .............................................................. 
Código da localidade ....................................... Local da coleta das amostras .......................... 
Município ......................................................... CEP ........................EST ................................. 
Cultura anterior ................................................ Cultura atual .................................................... 
Cultura a ser feita ............................................ Idade ............... 
Sistema da plantio ( ) Convencional ( ) Direto 
Fert. Solo: Alta ( ) 
 Média ( ) 
 Baixa ( ) 
 
Tipo de solo: Arenoso ( ) 
 Areno-argiloso ( ) 
 Argiloso ( ) 
 Orgânico ( ) 
 
Topografia da área: 
Plana e baixa ( ) 
Ondulada ( ) 
Inclinada ( ) 
 
Chuvas freqüentes: Estação chuvosa na coleta das amostras: 
 Sim ( ) Não ( ) Sim ( ) Não ( ) 
Área irrigada: Sim ( ) Não ( ) Porcentagem de dano: .................. % 
Presença de pragas: Sim ( ) Não ( ) Presença de doenças; Sim ( ) Não ( ) 
Plantas daninhas de folhas: Largas L ( ) Estreita E ( ) L + E ( ) 
Sintomas observados: .................................................................................................................. 
Observações gerais: .................................................................................................................... 
Assinatura do usuário ou portador:............................................................................................... 
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
Material necessário:
Enxadão ou trado;
Sacos plásticos (1 a 2L);
Baldes;
Tesoura de poda;
Etiquetas e lápis;
Fichas de informação 
Caixa de isopor
CUIDADOS:
A umidade do solo deve ser (60% c/c);
Na coleta de raízes evitar o ressecamento;
Preencher a ficha identificação da amostra;
Acondicionamento da amostra para envio ao laboratório;
Identificar os pontos de coleta (localização);
Na impossibilidade do envio imediato, guardar amostras 
na geladeira.
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
Representação da área 
infestada;
Características edaficas;
Reboleiras;
Diferentes propriedades e 
características do solo;
Tratamento diferente.
COMO AMOSTRAR?
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
CULTURAS ANUAIS
Antes da aração e gradagem Colher 15-20 subamostras 
de raízes da cultura atual e plantas daninhas;
Após o preparo do solo percorrer a área em zigue-zague 
coletando 15-20 subamostras solo/ha até 20-30cm de 
profundidade;
Misturar subamostras para obtenção 1 amostra 
composta/ha (800g solo e 100g raízes);
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
CULTURAS PERENES
Coletar as amostras na projeção da copa da planta;
Percorrer a área em zigue-zague coletando uma porção do 
solo (trado/pá/enxadão) até 20-30cm profundidade;
COMO COLETAR AMOSTRAS DE SOLO E 
RAÍZES?
VIVEIROS/MUDAS
Coletar no viveiro, “aleatoriamente”, 10 mudas + solo 
rizosfera para cada 1000 mudas;
Amostra composta: 800g solo e “1%” mudas;
Identificar amostra e enviar imediatamente ao laboratório.
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Funil de Baermann (Baermann, 1917)
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Funil de Baermann (Baermann, 1917)
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Densidade da H2O= 1,00 Densidade do nematóide= 1,09 ou 1,10
Vantagens: 
Barato, simples, eficaz, suspensão limpa.
Desvantagens: 
Nematóides imóveis, mortos ou pouco ativos, anelados não 
são recuperados; falta de aeração; temperatura influencia 
na recuperação dos nematóides.
Funil de Baermann (Baermann, 1917)
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Funil de Baermann (Baermann, 1917)
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Método de peneiramento de solo (Cobb, 1918)
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Método de peneiramento + Funil de Baermann
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Flotação centrífuga em solução de sacarose (Jenkins, 1964)
Primeira etapa
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Flotação centrífuga em solução de sacarose (Jenkins, 1964)
Segunda etapa
MÉTODOS DE EXTRAÇÃO
Flotação centrífuga em solução de sacarose (Jenkins, 1964)
Vantagens: 
Extração de ovos, nematóides imóveis e mortos; rápido; 
amostra limpa.
Desvantagens: 
Sacarose pode afetar o nematóide; solos argilosos são 
mais difíceis; perda de nematóides pelas peneiras; 
resultados variam com o operador; economicamente 
caro.
BIBLIOGRAFIA A CONSULTAR
Meloidogyne Pratylenchus 
Dolichodorus Hoplolaimus 
Heterodera Trichodorus 
Rotylenchulus Anguina 
Hemicycliophora Tylenchorchenchus
Helicotylenchus Mesocriconema 
Aphelenchoides Xiphinema 
Tylenchulus Belonolaimus 
Radopholus Ditylenchus 
Hirchmanniella Longidorus
Rhadinaphelechus 
NEMATÓIDES ENCONTRADOS NAS 
AMOSTRAS
OBRIGADO
islimes@hotmail.com