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Universidade Federal de Juiz de Fora - UFJF Curso: Graduação em Ciências Biológicas Disciplina: PPCC – Protozoa, Porífera, Cnidária e Ctenophora Professor (a): Bianca Sartini Aluna: Fernanda Rocha Vandanezi Alvim Matricula: 201301029 Técnicas de Estudo e Observação de Hemoparasitos Introdução: Haemoproteus e Plasdodium, são parasitos pertencentes ao Filo Apicomplexa e caracterizados por em seu estágio infeccioso apresentar um complexo apical anterior e bem desenvolvido que se prende ou que penetra no interior da célula hospedeira. O complexo apical consiste em um conóide aberto nas extremidades e envolvido dois anéis polares, além de possuir duas estruturas glandulares chamadas roptrias e micronemas com enzimas que auxiliam a penetração na célula. Organismos Apicomplexa também são conhecidos por possuir uma organela de função desconhecida, denominada apicoplasto, que é um plastideo com genes de cloroplasto, mas que não são associados a clorofila. Não apresentam cílios e pseudpódes, e a ocorrência de flagelos só se faz apenas nos seus microgametas. Na lateral do seu corpo, apresentam micrósporos, que são poros para alimentação. No ciclo de vida destes organismos, há o estágio móvel infectante chamado esporozóito (haploide) que ao penetrar no hospedeiro, cresce e se diferencia em merontes e sofrem a merogonia se transformando em merozoitos. Estes merozoitos sofrem um processo conhecido como gametogonia onde se diferenciam para formar gametas, que vão se unir (singamia) e formar o zigoto, que ao ser encapsulado dá origem ao oocisto. Quando esse oocisto sofre esporogonia, entram novamente no seu estado infectante (esporozoítos). Objetivos: Confecção e preparação permanente de esfregaço sanguíneo. Observação dos hemoparasitos Haemoproteus e Plasdodium em pombos e em aves da ordem Passeriformes, respectivamente. Metodologia: Na confecção da lâmina permanente, contendo Haemoproteus, o esfregaço foi realizado com sangue de pombo em uma lâmina extremamente limpa e sem gordura. O sangue foi coletado direto do pombo em uma quantidade pequena por uma lâmina “suja”. Esta lâmina “suja”, foi então colocada em um ângulo de 45 graus com a lâmina com qual se fará o esfregaço e a pequena quantidade de sangue foi difundida entre as duas lâminas. Após a difusão, deslizou-se a lâmina “suja” pela lâmina do esfregaço, trazendo todo o sangue, que se estendeu numa camada uniforme. Agitando a lâmina do ar, o esfregaço secou. Com o esfregaço já seco, a lâmina foi imersa 30 segundos no fixador e em dois tipos de corante rápido e posta para secar. Analise da lâmina foi realizada sob microscópio fotônico, com a ampliação de 100x na objetiva e 10x nas oculares. Já a observação do Plasdodium foi realizada em lâminas ~~~~~~ já preparadas com amostras de sangue de Passeriformes e analisadas em microscópio fotônico, com ampliação de 100x na objetiva e 10x nas oculares. Resultado: No sangue do pombo, na mesma lâmina, foram encontrados Haemoproteus que invadiram os elitrócitos, sob estágios de vida: Macrogametócitos com hemozoina (pigmento férrico acumulado) por todo citoplasma e o núcleo evidente. Microgametócitos com hemozoina apenas na extremidade e o núcleo não evidente. Já a lâmina preparada com sangue de Passeriforme, foi encontrado o Plasdodium que invadiram os elitrócitos, quando estão sob o estágio de Merozoítos. Referências Bibliográficas: Ruppert, Edward E., Fox, Richard S., Barnes, Robert D. Zoologia dos invertebrados: uma abordagem funcional-evolutiva. São Paulo. Roca, 2005.
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