Aula_de_Proteinas_2

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 Interações não-covalentes são fracas
 Fatores: calor, pH, sais, substâncias caotrópicas, detergentes
Conformação nativa de uma proteína refere-se à estrutura tridimensional em que a molécula apresenta suas propriedades biológicas naturais. 
Desnaturação refere-se a alterações da conformação nativa de uma proteína, podendo resultar em perda parcial ou total, reversível ou irreversível, de sua atividade biológica. 
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
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Calor
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
A clara do ovo, que contém albumina, coagula formando um sólido branco. Não adianta tentar ressolubilizar (renaturação) abaixando a temperatura. 
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pH
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
A variação do pH interfere nas cargas das cadeias laterais dos resíduos de aminoácidos. Em pH ácido durante a formação do ácido láctico, a caseína do leite pode precipitar. 
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Sais: salting out
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
O aumento na concentração de sais causa uma competição entre os sais e as proteínas pelas moléculas de água do meio (força iônica); resultando numa menor quantidade de água disponível para a solubilização das proteínas. (precipitação por sais)
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Sais: salting in
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
Em soluções com baixa força iônica, pequenos aumentos na concentração de sais também aumenta a solubilidade das proteínas. (solubilização por sais)
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Detergentes
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
O dodecilsulfato de sódio (SDS) desnatura as proteínas introduzindo cargas negativas ao longo da proteína desnaturada. 
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Substâncias Caotrópicas
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
O -mercaptoetanol e a uréia causam desnaturação por interagir com os aminoácidos. 
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Cabelo
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
A queratina possui muitas cisteínas em suas cadeias, formando várias pontes dissulfeto entre as -hélices.
maior nº de pontes dissulfeto
menor nº de pontes dissulfeto
trança mais apertada
trança mais frouxa
cabelo com mais peso e volume
cabelo com menos peso e volume
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Cabelo permanente
Desnaturação e Renaturação de Proteínas
peróxido de hidrogênio (oxidante)
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Cromatografia
Processos de Separação de Proteínas
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1) Cromatografia
Processos de Separação de Proteínas
Por exclusão:
Também chamada de filtração em gel. 
As proteínas maiores são eluídas primeiramente através da coluna cromatográfica, enquanto as menores são eluídas posteriormente.
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2) Cromatografia
Processos de Separação de Proteínas
Por troca iônica:
Coluna com substâncias de carga negativa – coluna catiônica. 
Coluna com substâncias de carga positiva – coluna aniônica. 
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3) Cromatografia
Processos de Separação de Proteínas
Por afinidade:
Separação de uma proteína específica – anticorpo. 
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2) Eletroforese Unidimensional
Processos de Separação de Proteínas
-mercaptoetanol
SDS-dodecil sulfato de sódio
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2) Eletroforese Unidimensional
Processos de Separação de Proteínas
Gel de poliacrilamida – proteínas 
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2) Eletroforese Unidimensional
Processos de Separação de Proteínas
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2) Eletroforese Bidimensional
Processos de Separação de Proteínas
Gel formado com um gradiente de pH – focalização isoelétrica. 
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2) Eletroforese Bidimensional
Processos de Separação de Proteínas