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Biotec AV2 aula 6

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Biotecnologia da Reprodução – Av2
06/11 – 6º Aula
Prova vai começar as 9:00 horas, mesmo padrão da Av1. TIFOI pode cair como uma comparação, saber as vantagens e desvantagens. 
Hoje vamos falar sobe uma técnica chamada TIFOI, é uma técnica nova. Na escala vamos ter a transferência de embriões, depois a TIFOI, e depois a FIV. Ela é um intermediário entre a FIV e Transferência de embriões.
 Na transferência de embrião se faz tudo na fazenda, você vai ter a doadora que vai fornecer os óvulos e tem a receptora que faz a gestação. Na transferência de embriões estimula a doadora a ovular vários óvulos com o estimulo de FSH e quando ela estiver no ponto de ovular, insemina vai haver a fecundação e os óvulos descem e vai recuperar esses óvulos dentro do útero por lavagem, tiro o embrião e joga na receptora para fazer a gestação.
Desvantagem: O principal problema da transferência de embriões é que você acaba muito rápido com a doadora, porque fica dando hormônio com isso ela esgota a doadora muito rápido, pode ter reação alérgica aos hormônios, se tira em torno de 15 filhotes por ano. 
A FIV, também vai ter uma doadora, uma receptora e o laboratório. Então no ovário da doadora aspira os folículos por ultrassom, leva para o laboratório, amadureço o folículo levando para estufa simulando um ambiente de ovário, quando ele tiver maduro eu insemino esse óvulo no laboratório, mantenho de novo na estufa fazendo um ambiente imitando um útero e quando tiver com uns 7 dias de inseminados, pega, avalia e joga nas receptoras. Não se aplica hormônio na FIV. 
O que é a receptora primária na FIV: pode ser usada para transportar e sua função é fazer o desenvolvimento dos embriões. Na FIV você coleta o óvulo da doadora, amadurece em laboratório, fecunda, taxa de clivagem, os que partiram joga dentro da tuba uterina de uma receptora primaria, depois lavar esse útero e tira o embrião. Quando se usa a receptora primaria na FIV precisa do laboratório para ocorrer a fecundação dos óvulos e o amadurecimento. 
A vantagem da FIV em relação a Transferência de embrião, é que não estraga muito a doadora. A desvantagem é que tem um útero e ovário cover, que nunca é tão bom quando um útero e ovário verdadeiro. 
Com essa técnica nova desenvolvida pelo pessoal da Embrapa, você elimina o laboratório. Você vai fazer uma FIV sendo que elimina toda a parte do laboratório. 
A TIFOI é a transferência de ovócitos imaturos, você substitui o laboratório por uma vaca ovuladora. Vai na fazenda, aspira a doadora tirando os óvulos igual na FIV, quando aspira tem que levar na lupa para fazer uma seleção dos óvulos. Nessa técnica a seleção é feita na fazenda mesmo, e ao invés de jogar na estufa, vai pegar a vaca ovuladora e ela vai está na véspera de dar cio, então se ela vai dar cio ela tem o folículo dominante o que vai ovular, então faz de novo o ultrassom dela, só que em vez de aspirar os óvulos você vai injetar os óvulos dentro do folículo que vai ovular. 
Na doadora você tem os óvulos e vai aspirando, levou para a lupa e olhou os folículos aspirados. Normalmente na FIV você pega os folículos e manda para estufa. Na estufa é aonde ocorre o amadurecimento dos folículos. Quando tiver maduro, faz a fecundação coloca o espermatozoide no ovulo, volta para a estufa para ter a maturação. Maturou pega e joga na receptora, todo esse processo descrito ocorre na FIV. QUESTÃO DE PROVA! 
Na transferência de embriões vai haver estimulo com hormônio, o FSH na doadora para estimular a superovulação. Quando esse óvulo ovular se faz a inseminação, a fecundação ocorre na tuba uterina. Os embriões vão ser recuperados no útero, esse processo todo não demora 7 dias. Agora vai lavar o útero e vai tirar o embrião e vai para a receptora. A receptora sempre está na mesma fase que a doadora. QUESTÃO DE PROVA! 
Qual a desvantagem da transferência de embrião em relação a FIV: a doadora só sofre e tira poucos embriões por ano, em torno de 15 embriões por ano. 
Qual a desvantagem da FIV em relação a transferência de embrião: precisa ter laboratório, e a qualidade do embrião. O embrião cover é sempre pior que o verdadeiro. Aqui produz em torno de 50 embriões por ano. Só que aqui o laboratório é caro, pode faltar luz, co2 e o processo ir para o lixo. 
Essa técnica nova a TIFOI, ela é uma mistura dessas duas, ela é uma técnica muito interessante porque ela muito simples, você pode fazer toda a técnica na fazenda, desde que você tenha uma lupa, ultrassom e aparelho de aspiração. 
Na FIV eu tenho a oportunidade de usar a receptora primária. Faz a fecundação, leva para a estufa e depois coloca na receptora primaria é um caminho, elimina o laboratório. Na receptora primaria vai ter um embrião da mesma qualidade, diminui os custos de laboratório e melhora a qualidade do embrião. 
Essa técnica da TIFOI, você vai ter que sincronizar as receptoras com a doadora, igual isso não muda. As receptoras são sem sincronizadas para dar cio na fecundação. Vai avaliar toda as receptoras, e vai procurar uma receptora que tenha um ovário com um bom folículo dominante. Essa receptora que tem um bom folículo dominante ela vai mudar de nome, ela deixa de ser receptora e chama de Vaca Ovuladora. 
Vai aspirar o ovário da doadora igual se fez na FIV. Pega os folículos e faz uma seleção na lupa, agora vai pegar todos os folículos aspirados, vai puncionar a receptora só que ao invés de aspirar, vai soprar os óvulos ali dentro. A receptora está no ponto para dar o cio amanhã, então amanhã quando ela der cio vai inseminar ela. Vai fazer a inseminação, ocorrer a fecundação na tuba, vão descer os embriões para o útero, vai fazer a lavagem e jogar nas receptoras. 
Vantagens da TIFOI: Nessa técnica nova você elimina o problema de prejudicar a doadora com os hormônios, você aumenta o número de filhotes, diminui o custo com laboratório e melhora a qualidade dos embriões. 
Na FIV você usa sêmen sexado, nessa técnica TIFOI, não pode usar sêmen sexado, se usa sêmen convencional. 
Quantas receptoras se sincronizam para cada doadora? 10 
Transgênico
Na aula passada vimos os marcadores moleculares, que são estruturas dentro do cromossoma que consegue identificar que são ligados ao gene, pode ser o próprio gene ou um marcador que marca que o gene está ali. 
No transgênico vamos pegar a sequência genica que interessa, vamos recortar, em geral falamos em transferência de genes em espécies diferentes, mas você pode fazer um transgênico dentro da mesma espécie. Vai recortar a sequência genica que me interessa, pega e acrescenta essa sequência genica no indivíduo que eu quero que seja geneticamente modificado. E com isso houve uma mudança dentro do DNA desse indivíduo, a partir de agora esse indivíduo ele vai ter esse gene e vai passar esse gene de geração a geração, então você consegue perpetua esse gene. 
Isso é bom? Depende, pode ser bem interessante no ponto de vista produtivo e no ponto de vista médico. 
No nosso ramo hoje em dia, são usados nos animais produzindo produtos transgênicos para basicamente produzir fármacos. 
Um exemplo é a cabra, com o fator da hemofilia, ela não coagula o sangue porque falta o fator de coagulação. Eles pegaram o gene que faz a produção desse fator de coagulação, modificaram geneticamente umas cabras, e elas passam a produzir esse fator de coagulação no leite, então emprenha a cabra, ela vai produzir o leite, ordenha a cabra, purifica o leite e tira o fator de coagulação. 
Outro exemplo que está sendo testado aqui no Rio pela UF, são umas porcas que são modificadas geneticamente e elas no leite produzem fibroblasto humano, tira os leites das porcas, depois purifica esse material e estão fazendo ataduras para tratar de queimaduras, acelera a cicatrização. 
Girassol transgênico, na Holanda eles estudaram o gene do girassol e introduziram no gene do girassol para nanismo. Então o girassol não cresce, ele fica no máximo com 40 cm. Só que ao introduzir o gene para nanismo, também veio o gene estéreo, então não adianta você plantar porque eles introduziram um genede apoptose, com 45 dias essa flor entra em decadência e morre. A planta morre com um certo tempo, você não consegue fazer filho dela. 
O Roundup mata tudo, folha larga e folha comprida. Quando começava a nascer a soja nascia outras pragas juntas e ficava difícil. Eles descobriram que tem uma planta que quando eles jogavam Roundup nela a folha não morria. Eles descobriram o gene dessa planta que faz com que ela seja resistente a Roundup, pegaram esse gene e introduziram na soja, e quando começa as pragas eles passam o Roundup, mata tudo menos a soja. Foi colocado outro gene que a reação de 10 minutos no laboratório ela fica azul se for soja transgênica. 
O grande problema dos transgênicos é que está entrando com uma coisa que ecologicamente você não sabe qual impacto dessa tecnologia no ambiente. Hoje se tem a quantidade de genes que tem alergia alimentar só está aumentando e isso é por causa dos produtos industrializados, é bom abrir o olho com produto transgênico. Hoje se consegue colocar resistência genética a algumas doenças nos produtos que vai produzir. 
VÍDEO: Nem todo organismo geneticamente modificado é transgênico, mas todo transgênico é um organismo geneticamente modificado. Um alimento transgênico possui material genético além do seu próprio, pode ser inclusive de outra espécie. 
O problema dos transgênicos por exemplo, se você aumenta a resistência das plantas pode diminuir o número de agrotóxico ficando até mais saudável, mas na realidade não é assim. Realmente nas plantas resistentes a doenças o uso de agrotóxicos caiu, o problema é que elas são só 30% dos transgênicos usados, 70% dos transgênicos são resistentes a herbicidas. O agrotóxico ele não escolhe a planta que vai matar, é para ele matar a praga e o cultivo, como a planta transgênica não morre nem se afogar ela no herbicida, os agricultores enchem a plantação de agrotóxico para matar todas as pragas e todos os matos que ele quiser, óbvio que nesse caso quem acaba pagando somos nós. Já foi comprovado que tem herbicida até nos animais que se alimentam das plantas transgênicas, e esses animais acabam indo para na nossa alimentação. 
Não dá para dizer que os transgênicos é algo ruim ou bom, é necessariamente aquilo que quisermos deles. Por isso o nosso papel como consumidor é verificar e cobrar das empresas que usem produtos seguros ou que não mínimo deixem bem claro qual tipo de medicação foi feita naquele alimento que estamos consumindo. 
O transgênico é a biotecnologia que mais justifica depois do uso do clone, porque eu cheguei no indivíduo que eu quero e não quero perder esse gene, então multiplica esse gene através da clonagem. O transgênico é um passo antes do clone, eu faço o indivíduo transgênico, chego aonde eu quero e para não perder esse gene multiplica ele por clonagem. 
Existe uma vacina contra carrapato, o principio dessa vacina e como ela funciona é bem interessante. É uma vacina geneticamente modificada, onde os australianos que descobriram isso. Eles precisam acham um gene que fosse letal para o carrapato e que ao mesmo tempo não tivesse contato com o hospedeiro. O carrapato é resistente ao anticorpo que temos contra eles, então eles precisavam achar uma molécula que fosse prejudicial ao carrapato e que o hospedeiro nunca tivesse tido em contato com essa molécula. O princípio é fazer um anticorpo que vai destruir o intestino do carrapato, porque se destruir o intestino do carrapato o que ele consumir ele vai morrer. Eles descobriam que lá no intestino do carrapato tem uma proteína que TM 35, que ela fica bem dentro do intestino do carrapato. Quando injetada essa proteína no bovino, o bovino faz muito anticorpos contra ela, então é uma proteína que imunologicamente é muito ativa. E uma vez que o anticorpo chega ele rompe o intestino do carrapato e o carrapato não consegue se alimentar e morre. Os cubanos entraram na história, pegaram essa proteína e inocularem essa sequência genica dentro da sequência genica de uma levedura, porque levedura se tem muita facilidade de reproduzir e fizeram a vacina. Os carrapatos morrem e ficam seco em cima do animal ou não morrem, mas ficam todos avermelhados, porque destrói o intestino e começa a passar hemoglobina para dentro do carrapato ou então eles não morrem e nem ficam avermelhados, mas vão diminuindo de tamanho. 
No milho tem uma grande praga no milho, é uma lagarta. Quando o milho é muito jovem a folha dele ela é toda enrolada, e essa lagarta ela come o broto da folha, é a maior praga do milho. Vai cortando a folha do milho, que diminui a área de fotossíntese, vai recebendo menos luz solar e produz menos, isso se não vim a morrer. Descobriram um fungo que ele parasita ela lagarta, então se você banhar essa lavoura com o fungo, esse fungo vai parasitar o intestino da lagarta e ela vai morrer, e com isso você controla o ataque de lagartas no milharal. Ele vai atacar o sistema digestivo da lagarta e ela vai morrer. Isso se chama controle biológico. Não tem nenhuma contraindicação, porque esse fungo não é patogênico, ele é encontrado na natureza, você só está aumentando o número dele. 
Eles inventaram um milho transgênico que tem dentro do seu DNA, o material desse fungo que mata a lagarta. Uma coisa que tem que tomar muito cuidado com os transgênicos é que quando se criaram os inseticidas começaram a matar os insetos, sendo que depois de um tempo começaram a criar resistência. A lagarta também cria resistência. Tendo o que se chama de quebra de transgênico, que é a quebra da resistência. Então para evitar esse tipo de problema o que se recomenda é você deixar uma área plantada toda com o milho transgênico e você plantar no meio da área linha de milho não transgênico, esse milho não transgênico vai ser atacado pelas lagartas e essas lagartas vão se multiplicar, elas não vão ter resistência ao transgênico. Quando se usa transgênico em lavoura precisa tomar esse tipo de cuidado.

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