Relatório de Aula pratica sobre fermentação

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Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro 
Campos dos Goytacazes – Rj. 
2017 
 
Bioquímica 
Relatório (Aula prática 3/5) 
 
Curso: Ciências Biológicas – Bacharel 
Turma: 2016.2 
Tema: Fermentação 
Alunos (as): Amanda Mello 
 Letícia Diniz 
 Kaio Andrade 
 Kariny Castro 
 
Fermentação 
A fermentação é um processo químico anaeróbico onde organismos 
unicelulares, fungos e bactérias, transformam matéria orgânica em outros 
produtos e energia. Esses seres usam esse método como forma de conseguir 
energia para as suas funções biológicas. 
O processo de fermentação ocorre no citoplasma da célula e com auxílio de 
enzimas que atuam na catalisação, independentemente do ser vivo. 
A fermentação é um via de produção de energia com a utilização de matéria 
orgânica, um exemplo é a glicose. Antes do processo de fermentação existe a 
realização de outro processo chamado glicólise. 
No processo de glicólise há incorporação de fosfatos (P) nas moléculas de 
glicose, o que favorece a sua fragmentação em duas moléculas de ácido 
pirúvico. 
A glicose é inicialmente quebrada em piruvato no processo de glicólise, no 
entanto terão duas formas de metabolização em diferentes compostos o que 
vai diferenciar os tipos de fermentação, a láctica e alcoólica. Na fermentação 
alcoólica o piruvato é convertido em ácido láctico e na láctica é convertido em 
etanol, ocorrendo em ambos a liberação de CO2, como no esquema abaixo: 
 
 
 
 
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Figura 1: Esquema Geral de Fermentação 
 
Fermentação láctica 
Tendo o ácido láctico como produto final, os lactobacilos (bactérias do leite) 
realizam esse tipo de fermentação. Ocorre com a utilização da lactose 
desdobrado pela ação enzimática, que acontece fora das células bacterianas, 
em glicose e galactose. 
Glicose + Galactose Lactose 
 
Fermentação Alcoólica 
Álcool etílico (etanol) e gás carbônico são produzidos na fermentação de 
açucares, realizado por leveduras e algumas bactérias formando a fermentação 
alcoólica. O etanol pode ser produzido a partir de qualquer carboidrato 
fermentável pela levedura, como por exemplo a sacarose. 
Nesta fermentação ocorre a conversão das duas moléculas de ácido pirúvico, 
que quando sofre a descarboxílação, forma o ácido acético que sofre redução e 
faz a oxidação do NADH para NAD+. Resultando na produção de etanol e a 
liberação de gás carbônico. 
 
 
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Campos dos Goytacazes – Rj. 
2017 
 
 
 
Objetivo 
Observação e análise do consumo de sacarose e a liberação de CO2 na 
produção de etanol durante a fermentação alcoólica. 
 
Materiais 
Becker 
Tubo de ensaio 
Proveta 
Pipeta 
Luvas 
Banho maria 
Espectrofotômetro 
Tubo Falcon 
Bastão de vidro 
Ponteiras 
3g Levedura 
10g Sacarose 
Água destilada 
Reagente 
Seliwanaff 
 
Procedimentos 
 Preparação de uma solução de levedura, dissolvendo 3g de fermento 
biológico em 60mL de H2O. 
 
 Preparação de uma solução com 10% de concentração de sacarose: 
10g de Sacarose diluída em 90mL de H2O. – Solução sacarose 10%. 
 
 Redução da concentração de sacarose para 1% em uma nova solução: 
30mL da solução sacarose 10% adicionada a 270mL de água. – Solução 
sacarose 1%. 
 
 Redução da concentração de sacarose para 0,1% em uma nova 
solução: 10mL da solução sacarose 1% adicionada a 90mL de água. – 
Solução sacarose 0,1%. 
 
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 Separação de 80mL da solução sacarose 1% em um Becker e posto em 
banho maria a 40ºC. 
 
 
 Em dois tubos Falcon, ocorreu a adição (em cada um dos tubos) de 5mL 
da solução sacarose 10% e 10mL da solução de levedura. Os tubos 
foram completados com água destilada e quando fechados foram 
homogeneizados. 
 
 O tubo Falcon sem furo na tampa foi colocado no becker em banho 
maria virado para cima. O tubo Falcon com furo na tampa foi colocado 
no mesmo becker em banho maria virado para baixo, mergulhado na 
solução sacarose 1%. 
 
 Iniciou-se a contagem (iniciou do zero), marcando o volume do CO2 no 
tubo 2. O volume do CO2 continuou sendo marcada a cada 30 minutos, 
durante horas e também a cada 30 minutos, durante horas, foi retirada 
uma alíquota de 2mL do tubo 1. Obtenção de 4 alíquotas. 
 
 Cada alíquota retirada do tubo 1 de fermentação foi fervida em banho 
maria durante 10 minutos e reservadas. – 0F; 1F; 2F; 3F; 
 
 Foi feita a curva de calibração. Em 11 tubos numerados de 1 a 11, foi 
adicionado à solução sacarose 1% e H2O, nas seguintes medidas: 
 
Tubos Solução de sacarose 
0,1% (ml) 
H2O 
1 0 1,0 
2 0,1 0,9 
3 0,2 0,8 
4 0,3 0,7 
5 0,4 0,6 
6 0,5 0,5 
7 0,6 0,4 
8 0,7 0,3 
9 0,8 0,2 
10 0,9 0,1 
11 1,0 0 
 
 
 Em seguida, em outros 11 tubos, numerados de 1’ a 11’ foi adicionado a 
solução dos tubos 1 a 11 e reativo de selivaneff, nas seguintes medidas: 
 
 
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Tubos Solução de 
sacarose 0,01% (mL) 
Reativo de 
Seliwanoff 
1’ 0,5 2,0 
2’ 0,5 2,0 
3’ 0,5 2,0 
4’ 0,5 2,0 
5’ 0,5 2,0 
6’ 0,5 2,0 
7’ 0,5 2,0 
8’ 0,5 2,0 
9’ 0,5 2,0 
10’ 0,5 2,0 
11’ 0,5 2,0 
 
 Os tubos de 1’ a 11’ foram fervidos em banho maria por 20 minutos. 
 
 Os tubos 0F, 1F, 2F e 3F foi retirada, de cada, uma alíquota de 0,5mL e 
adicionada a 5,5mL de H2O em novos tubos – 0F’; 1F’; 2F’; 3F’; 
 
 Foi retirada uma alíquota de 0,5mL de cada um dos tubos 0F’, 1F’, 2F’ e 
3F’, e adicionado 2mL de reativo de seliwanoff em novos tubos – 0F’’; 
1F’’; 2F’’; 3F’’. Estes foram fervidos em banho maria durante 20 minutos 
e após fervidos, suas respectivas absorvâncias foram medidas no 
espectrofotômetro a 520nm. 
 
Resultados 
[FOLHA MILÍMETRADA]