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Aplicação de Enzimas em Alimentos: Aspectos Tecnológicos e Nutricionais. Ruann Janser Soares de Castro Engenheiro de Alimentos – UFC Mestrando em Ciência de Alimentos - UNICAMP Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aspectos gerais sobre enzimas Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP O que são enzimas? São proteínas que funcionam como catalisadores biológicos; Aceleram reações diversas; São compostas por polímeros de aminoácidos; Função: mecanismo geral - quebra de moléculas complexas (substratos) em moléculas mais simples (produtos) ou síntese de novas moléculas; Importante: toda enzima é uma proteína mas nem toda proteína é uma enzima! 3 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Como ocorrem as reações catalisadas por enzimas? Teoria 1-Emil Fischer (1894): chave-fechadura! Obs.: Teoria não mais aceita atualmente. 4 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Como ocorrem as reações catalisadas por enzimas? Teoria 2-Koshland (1958): encaixe induzido; a enzima e o substrato sofrem modificações conformacionais para que a reação ocorra. 5 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Fatores que influenciam a atividade enzimática Temperatura; pH; Concentração de substrato; Concentração da enzima; Presença de inibidores. 6 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Por que estudar enzimas em alimentos? Melhoramento das condições de processo; Obtenção de atributos sensoriais e estruturais mais atrativos ao consumidor; Aumento da biodisponibilidade de nutrientes; Controle de processos de degradação em alimentos; Eliminação de fatores alergênicos; Obtenção de produtos diferenciados. 7 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Os processos enzimáticos são favorecidos quando... Permite-se a utilização de condições amenas do processo: manutenção de atributos positivos no alimento; Processos químicos geram produtos inaceitáveis; Processo químico é difícil de ser controlado; A designação “natural” quer ser mantida; O alimento ou ingrediente é de valor nobre; Processo químico necessita ser substituído ou expandido; A especificidade da reação é requerida. 8 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Todo processo por melhor que seja, apresenta suas vantagens e desvantagens! 9 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Por que utilizar enzimas em processos industriais? São altamente específicas; Consideradas produtos naturais = agregação de valor; São biodegradáveis; Apresentam alta eficiência na aceleração de reações (108 a 1011 + rápida); Não são tóxicas. 10 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Por que não utilizar enzimas em processos industriais? São sensíveis a variações de temperatura e pH; Em alguns casos, o custo de obtenção é elevado; Recuperação dos produtos de interesse: caro e demorado. 11 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Tecnologia enzimática nas indústrias Agropecuária, alimentos, detergentes, energia, farmacêutica, materiais, química; Principais consumidores de enzimas: indústria de alimentos e rações (47%) e detergentes (32%). 12 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Principais fontes de obtenção de enzimas Origem animal. Ex.: renina extraída do estômago de bezerros; Origem vegetal. Ex.: papaína (mamão) e bromelina (abacaxi); Origem microbiana: bactérias, fungos filamentosos e leveduras. Ex.: proteases, pectinases, amilases... 13 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Mas qual seria a melhor fonte? A escolha de um determinado tipo de enzima vai depender do processo tecnológico e do produto de interesse; Ex.: protease de origem animal (renina) e protease de origem vegetal (bromelina) na produção de queijos. 14 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Micro-organismos são uma boa fonte de enzimas? Atualmente os micro-organismos são bastante utilizados na produção de enzimas: por que? Produzem uma gama muito grande de enzimas: proteases, amilases, pectinases, celulases, lipases... São organismos estáveis geneticamente; As condições de cultivo são bem controladas; São considerados GRAS; Possuem maior produtividade quando comparados a outras fontes. 15 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP O efeito de enzimas sempre serão desejáveis em alimentos? 16 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Principais grupos de enzimas com importância na produção e modificação de alimentos 17 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Classes As enzimas de importância em alimentos são divididas em 4 classes principais: Carboidrases; Proteases; Lipases; Oxidorredutases. 18 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases São enzimas que catalisam reações de degradação de carboidratos, ou seja, hidrolisam ligações glicosídicas entre monossacarídeos formadores de oligossacarídeos e/ou polissacarídeos. 20 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases Enzimas e substratos pertencentes a classe das carboidrases: Amilases: amido; Pectinases: pectina; Celulases: celulose; Lactases: lactose; Invertases: sacarose. 21 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: Amilases São enzimas capazes de hidrolisar ligações glicosídicas presentes no amido, glicogênio e sacarídeos derivados; Entendendo um pouco o substrato: O amido: composto por centenas ou milhares unidades de glicose; Material de reserva de plantas e principal fonte de energia de animais; Composto por unidades de amilose e amilopectina; Propriedades tecnológicas muito apreciadas industrialmente: gelatinização. 22 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: Amilases Os produtos obtidos e os mecanismos de ação das amilases dependem da composição do amido. 23 Amilose Amilopectina Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das amilases Fabricação de bebidas alcoólicas: Processo de sacarificação do amido presente no malte: hidrólise do amido a açúcares mais simples (glicose e maltose) para tornarem-se fermentáveis pelas leveduras. Ex.: Produção de cerveja. 24 AMIDO (NÃO FERMENTÁVEL) APLICAÇÃO DE AMILASES (HIDRÓLISE) AÇÚCARES FERMENTÁVEIS (GLICOSE E MALTOSE) Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das amilases Panificação: Hidrólise do amido para liberação de açúcares fermentáveis; Aumento da vida útil de pães: liberação de dextrina (açúcar) que retarda o endurecimento dos pães; Melhoramento de características como: volume, textura e cor da casca. 25 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das amilases Produção de amido hidrolisado: Obtenção de açúcares com poder adoçante para substituição da sacarose em alimentos; O processo químico era o mais utilizado: amido em pH= 1,5 e temperatura de 140°C; inconveniente: geração de compostos de sabor amargo; O processo enzimático está sendo muito utilizado: produtos finais de melhor qualidade e em condições mais brandas de processo. 26 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das amilases Produção de oligossacarídeos pré-bióticos: Hidrólise controlada do amido para obtenção de xaropes de glicose e maltose; Utilizados na síntese de substâncias pré-bióticas: maltoligossacarídeos; Estudos indicam atividade contra bactérias patogênicas dos maltoligossacarídeos em consumidores de xaropes de maltose: benefícios à saúde! Estimulam o desenvolvimento de bifidobactérias: efeitos benéficos sobre o funcionamento do intestino. 27 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Informação extra: pré-bióticos e pró-bióticos 28 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos presentes no mercado 29 PreB-Floranew: produto obtido por meio de fermentação e rico em oligossacarídeos com função pré-biótica. PreB-Floranew tem funções mantenedora, provedora e ativadora de enzimas, sem as quais o organismo não conseguiria formar os nutrientes necessários para o seu funcionamento, não teria energia suficiente ou poderia utilizá-la e não conseguiria realizar o metabolismo, ou seja, seria impossível efetuar movimentos, pensar, excretar etc. Sem as enzimas não seria possível viver. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos presentes no mercado 30 “Mel” Karo: produto obtido da hidrólise enzimática do amido de milho; é um xarope de glicose. Karo Natural Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos presentes no mercado 31 Maltodextrina: Obtida a partir da hidrólise ácida do amido com o auxílio de enzimas; É um carboidrato complexo formado por dextrina e maltose; Utilizado como suplemento alimentar; Digestão mais lenta, gradual e constante no organismo humano: liberação de glicose de forma controlada; maior eficiência energética para esforços musculares. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: pectinases 32 São enzimas capazes de reconhecer ligações glicosídicas do tipo α- 1,4 entre unidades de ácidos galacturônicos e seu derivado metoxilado; Fontes: vegetais e micro-organismos; Entendendo um pouco o substrato: As substâncias pécticas são carboidratos presentes na parede celular e na lamela média de vegetais; Frutos verdes: responsáveis pela rigidez e proteção do tecido vegetal; Frutos maduros: são degradadas por pectinases endógenas, promovendo o amolecimento dos tecidos. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: pectinases 33 Estrutura da molécula de pectina Albedo de laranjas “parte branca”: rica em pectinas. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das pectinases 34 Na produção de sucos industrializados: a presença ou adição dessas enzimas pode causar efeitos desejáveis ou indesejáveis. Ex.: produção de suco de laranja. Laranja Pectinaesterases Hidrólise da pectina Formação de pectato de cálcio (insolúvel) Separação de fases e difícil reconstituição (indesejável) Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das pectinases 35 Produção de suco de laranja (continuação): será que esse efeito pode ser revertido? Laranja Adição de pectinaesterases ou poligalacturonases Hidrólise da pectina e do pectato de cálcio Oligômeros não sensíveis ao cálcio Viscosidade e dos °Brix (efeito desejável). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das pectinases 36 Clarificação de sucos: aplicação mais antiga das pectinases; promove diminuição da viscosidade dos sucos, provoca precipitação de partículas que causam turvação, facilitando os processos de centrifugação e/ou filtração; melhores características sensoriais (visual mais atrativo). Ex.: sucos de uva e maçã. Nutricionalmente falando, qual o melhor suco? Clarificado (sem pectina) ou o não-clarificado (com pectina)? Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das pectinases 37 Outras aplicações: Extração de sucos: auxilia no processo de prensagem, facilitando o rompimento das paredes e aumentando a extração do suco; Liquefação: hidrólise e solubilização de partes insolúveis da polpa, transformando-as em partes integrantes do suco; Descascamento enzimático: consiste na hidrólise do albedo de frutas cítricas. Após a hidrólise as cascas são retiradas manualmente e os gomos das frutas comercializados como produtos minimamente processados. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: lactases 38 São enzimas capazes de reconhecer ligações glicosídicas do tipo β que envolvem galactoses e arabinoses; Principal substrato: lactose (açúcar do leite); Entendendo um pouco sobre o substrato: A lactose é o carboidrato predominante no leite (5% no bovino e até 7% no humano); Formado por uma unidade de glicose e galactose; Possui baixo poder adoçante; Altamente higroscópico: defeitos em produtos desidratados e concentrados à base de leite. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Carboidrases: lactases 39 Estrutura molecular da lactose Mecanismo geral de atuação de lactases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lactases 40 Principal aplicação: elaboração de produtos com redução parcial ou total da lactose para pessoas com intolerância à esse açúcar; Intolerância à lactose? Baixa ou ausência de produção de enzimas (lactases) que digerem a lactose; Provoca dores abdominais e diarréias; Pode ser um problema congênito ou adquirido ao longo da vida; Problema sério: 25% dos brasileiros apresentam ausência ou deficiência de lactase. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lactases 41 Síntese de galactoligossacarídeos: Produto obtido pela ação de lactases; São considerados pré-bióticos pois não são digeridos no trato digestório; Favorece o crescimento de populações microbianas benéficas; Maiores produtores: Japão e Holanda. Outras aplicações: pré-tratamento de leite para obtenção de produtos derivados (iogurte, produtos de panificação, doce de leite, leite condensado e sorvete). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos presentes no mercado 42 Cápsulas de lactase para ingestão direta por pessoas intolerantes à lactose; Leites tratados enzimaticamente para redução do teor de lactose. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Proteases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Proteases 44 São enzimas que catalisam reações de hidrólise das ligações peptídicas das proteínas; 60% do mercado mundial de enzimas pertence às proteases. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Proteases 45 Classificação das proteases (modo de ação e natureza química do sítio catalítico): Exopeptidases (extremidades da cadeia protéica): aminopeptidases e carboxipeptidases ; Endopeptidases (interior da cadeia protéica): serina-proteases, cisteína-proteases, proteases aspárticas e metalo-proteases. Atenção! Todas as proteases promovem hidrólise de proteínas, mas será que posso utilizar qualquer uma no processamento de um determinado alimento? Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Proteases 46 Não! A escolha de um tipo específico de protease depende: Da natureza do substrato: composição química, tipos de ligações... Do objetivo do processo de hidrólise: obtenção de peptídeos com cadeias protéicas maiores, menores, ou até mesmo, aminoácidos livres; Condições do processo: pH e temperatura. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Proteases 47 Fontes: são produzidas por todos os seres vivos. Proteases vegetais: papaína (mamão), bromelina (abacaxi) e ficina (figo); Proteases animais: renina (estômago de bezerros), pepsina,(estômago, processo de digestão), tripsina, quimiotripsina (pâncreas), catepsinas e calpaínas (músculos ); Proteases microbianas: bactérias e fungos. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 48 Clarificação de cerveja: Durante a maturação da cerveja: baixa temperatura (insolubilização de complexos proteína-fenol, naturalmente presentes no malte e nos cereais utilizados para produção de cerveja); Resultado indesejável: turvação da cerveja; Aplicação de proteases específicas (papaína): hidrolisam as proteínas evitando a insolubilização. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 49 Clarificação de cerveja: controle do processo de hidrólise é indispensável! Função tecnológica da proteína: formação de espuma; Aplicação de proteases sem o controle do processo: altos graus de hidrólise; Cerveja com pouca ou sem espuma? Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 50 Amaciamento de carnes: Processo convencional: maturação à baixas temperaturas de 10 dias até 1 mês = altos custos, perda de peso por ressecamento; A aplicação de proteases acelera esse processo hidrolisando as proteínas da carne e aumentando o grau de maciez (característica altamente desejável); Proteases mais aplicadas: papaína e bromelina. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 51 Coagulação do leite: produção de queijos. A aplicação de proteases provoca a hidrólise de proteínas presentes no leite (k-caseínas), desestabilizando a emulsão = formação de coágulos de proteína; A renina é a protease mais utilizada: alto grau de especificidade pela proteína do leite. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 52 Coagulação do leite: produção de queijos. A hidrólise deve ser limitada ; Altos graus de hidrólise: liberação de peptídeos de sabor amargo, destruição do coágulo e comprometimento da textura = características sensoriais indesejáveis e baixo rendimento; Controle do processo: tempo de hidrólise, concentração da enzima, tipo e grau de especificidade da enzima pelo substrato. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 53 Panificação: importante saber! O trigo possui duas proteínas importantíssimas: gliadina e glutenina; essas proteínas são responsáveis pela formação do famoso glúten; Função tecnológica do glúten: formação de uma rede protéica que permite a expansão da massa pela retenção de gás produzido por micro-organismos durante a fermentação; Confere elasticidade e maciez ao pão! Mas se essa rede protéica for muito forte, o que pode acontecer? Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 54 Formação de glúten com “força” muito elevada = pães com característica emborrachada e sem volume; A força do glúten é determinada em função do seu conteúdo protéico; Proteases são utilizadas para regular a força do glúten: Quebram ligações peptídicas, diminuindo a força do glúten; É necessária uma análise prévia da matéria-prima para saber o nível de glúten; Reduzem até 30% do trabalho mecânico (também utilizado para regular a força do glúten) = redução de tempo de trabalho. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 55 Problema: se eu fosse responsável por um processo de produção de pães e a protease que estou utilizando passasse mais tempo que o indicado ou utilizei uma concentração maior que a necessária, o que aconteceria com a minha massa? Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 56 Mais uma vez: controle dos parâmetros de processo é indispensável! Maior concentração da enzima, tempo de reação elevado, enzima inespecífica = alto grau de hidrólise do glúten = perda de força, elasticidade e maciez. Na produção de biscoitos, é um efeito desejável: diminuição do teor de glúten (massa mais compacta e crocante). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 57 Aspectos positivos da aplicação de proteases em farinhas com alto teor de proteína: Permite a elaboração de produtos diversos com alto valor nutricional: farinha com baixo teor de proteína x farinha com alto teor de proteína hidrolisada; Evita perdas por deformação em biscoitos e bolos; Minimiza a utilização de substâncias químicas: metabissulfito de sódio (também utilizado para regular a força do glúten); Economia de tempo e dinheiro: diminuição do trabalho mecânico. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 58 Obtenção de hidrolisados protéicos: podem ser utilizados como ingredientes em vários alimentos para conferir: Sabor característico; Alterar textura; Emulsificar; Produzir espuma; Aumentar o valor nutricional. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das proteases 59 Elaboração de hidrolisados protéicos: Carne bovina e peixe: flavorizantes em temperos, caldos, sopas e molhos; Soja: hidrólise aumenta a funcionalidade da proteína; Leite: utilizados na elaboração de produtos para pessoas com alergia à proteína do leite; mantem o valor nutricional; Ovo: utilizados como emulsificantes em misturas pré-prontas (mistura para bolo, pudim, mingau...); Estudos recentes: atividade antioxidante, antiadipogênica, antibacteriana, anti-inflamatória e antihipertensiva. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos disponíveis no mercado 60 Fórmulas lácteas especiais: “Para as crianças com intolerâncias e alergias alimentares mais importantes ainda dispomos das fórmulas hidrolisadas, semielementares e elementares, que são fórmulas à base de hidrolisados protéicos ou aminoácidos puros, que raramente são intolerados”. (Nestlé) Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos disponíveis no mercado 61 Suplementos para praticantes de atividade física: “Os hidrolisados protéicos têm sido amplamente utilizados devido às suas propriedades funcionais e tecnológicas em diversos produtos alimentícios para melhorar características físicas, químicas e funcionais dos alimentos, sem prejudicar o seu valor nutritivo. Além disso, é o suplemento mais bem sucedido atualmente para os praticantes de atividade física.” (SNC - Sports Nutrition Center ). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos disponíveis no mercado 62 Amaciantes de carne: “Tempera e amacia qualquer tipo de carne. É feito com papaína, extrato de mamão e uma combinação de vários temperos, sem alterar o sabor das carnes e mantendo suas características nutricionais.” (Nestlé). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Lipases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Lipases 64 São enzimas que catalisam hidrólise de óleos e gorduras, liberando ácidos graxos livres, diacilgliceróis, monoacilgliceróis e glicerol; Funções metabólicas de extrema importância: enzimas digestivas, participação em reações de deposição e mobilização do tecido adiposo. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Lipases 65 Fontes: Animais: a mais estudada e aplicada industrialmente é a lipase pancreática (extraída de suínos); Vegetais: abundantes em sementes oleaginosas (participam de processos de germinação); Microbianas: está ganhando grande atenção depesquisadores (grande número de micro-organismos, produção em maior escala, possibilidade de manipulação genética). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Lipases 66 Importância em alimentos: rancidez hidrolítica! Hidrólise de triglicerídeos presentes nos alimentos: liberação de ácidos graxos voláteis e de odor desagradável; Rejeição dos produtos pelo consumidor; Alimentos envolvidos: leite, grãos, farinhas, farelos (as lipases estão naturalmente presentes); inativação térmica = solução! Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lipases 67 Maturação acelerada de queijos: São aplicadas enzimas lipolíticas de origem microbiana ou animais; Atuam hidrolisando as moléculas de gordura do leite, liberando ácidos graxos: aroma e sabor característicos; Redução do tempo de maturação de meses para algumas semanas = diminuição de custos, melhores características sensoriais. Ex.: Queijo roquefort (Micro-organismo: Penicillium roquefortii) Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lipases 68 Panificação: Hidrólise de triglicerídeos: formação de mono e diglicerídeos com propriedades emulsificantes; Maior capacidade de retenção de ar = melhor textura; Maior capacidade de retenção de água = maior vida de prateleira; Fabricação de pães light: a aplicação de lipases dispensa o uso de gordura para incrementar a maciez do produto; Lipídeos da massa: não hidrolisados = sem propriedades emulsificantes; Lipídeos da massa: hidrolisados = com propriedades emulsificantes. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lipases 69 Elaboração de óleos e gorduras estruturados: São óleos modificados ou sintetizados quimicamente e enzimaticamente compostos por ácidos graxos de cadeia curta, média e longa com a finalidade de melhorar aspectos nutricionais e tecnológicos. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lipases 70 Elaboração de óleos e gorduras estruturados: uso nutricional Ácidos graxos de cadeia longa = mais difíceis de serem digeridos; Ácidos graxos hidrolisados de cadeias curta e média: moléculas menores prontamente absorvidas pelo organismo; Essa tecnologia é utilizada para elaboração de óleos terapêuticos = maior absorção pelo organismo; Importante no tratamento de pessoas com dificuldades de digestão e absorção de lipídeos. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Aplicações industriais das lipases 71 Elaboração de óleos e gorduras estruturados: uso tecnológico Elaboração de substituintes da manteiga de cacau; Manteiga de cacau: ácido oléico, palmítico e esteárico = ponto de fusão específico (derrete na boca a 37°C; propriedade rara em gorduras); Fornecimento de manteiga de cacau: instável e preços variáveis! A modificação com lipases específicas pode levar a formação de óleos com essas características. Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Produtos disponíveis no mercado 72 A empresa Unilever comercializa um sucedâneo dos lipídeos do leite humano com o nome comercial BETAPOL, que foi o primeiro lipídeo estruturado comercial obtido por via enzimática; utilizado na alimentação de recém-nascidos (reforça o sistema imunológico, aumenta a absorção de cálcio e ácidos graxos). Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases São enzimas que realizam reações de oxirredução; Muitas vezes indesejadas em alimentos: mudanças de coloração, rancidez, perda de aroma e de valor nutricional em produtos de origem vegetal. 74 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases Principais enzimas do grupo das oxirredutases: Polifenol-oxidases; Peroxidases; Lipoxigenases; Catalases; Glicose-oxidases; Xantina-oxidases; Ascorbato-oxidases. 75 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: polifenol-oxidases São enzimas que possuem a capacidade de oxidar compostos fenólicos na presença de O2; Levam à formação de quinonas: altamente reativas; Reações de condensação entre quinonas e outros componentes do alimento: compostos de cor escura (melaninas); Fontes: animais, vegetais, bactérias e fungos; Funções biológicas de grande importância em vegetais: mecanismos de defesa contra micro-organismos e insetos. 76 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: polifenol-oxidases 77 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: polifenol-oxidases Implicações do escurecimento enzimático em alimentos: Rejeição pelo consumidor: associação da cor escura com alimento estragado; Formação de odores indesejáveis; Perda de valor nutricional: destruição de aminoácidos (fenilalanina e tirosina); Muitos efeitos indesejáveis! 78 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: polifenol-oxidases Como fazer pra prevenir o acontecimento dessas reações? Supressão de O2: a enzima é dependente da presença de O2 para agir; Redução do pH: são inativadas em valores de pH abaixo de 3,0; Branqueamento: tratamento térmico (70°C/3min) inativa a enzima; Adição de inibidores químicos: sulfitos. Todos os métodos apresentam vantagens e desvantagens! 79 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: polifenol-oxidases O escurecimento enzimático nem sempre é indesejável: responsável pela formação de cor característica de diversos produtos. 80 Ameixa Cacau Café Uva passa Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: peroxidases São enzimas capazes de oxidar diferentes compostos , na presença de peróxidos, gerando radicais livres; São encontradas em vegetais, animais e micro-organismos; Função biológica em vegetais: síntese de fitohormônios, amadurecimento, mecanismos de defesa; Altamente estável à temperatura; Possui a capacidade de regenerar-se: tratamento térmico eficiente, essa capacidade diminui. 81 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: peroxidases Importância em alimentos: Desaparecimento de aroma característico e aparecimento de aromas estranhos: vegetais congelados; Alteração da cor; Diminuição do valor nutritivo: oxidação da vitamina C e de aminoácidos; São utilizadas como controle para tratamentos térmicos: termoresistência. 82 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: lipoxigenases São enzimas que catalisam a oxidação de ácidos graxos poli- insaturados contendo uma ligação específica (sistema cis-1;4- pentadieno); Dependente da presença de O2; Levam à formação de compostos de baixo peso molecular: aldeídos e cetonas responsáveis pelo odor de ranço; Produzidas por plantas (de maior interesse), animais e micro- organismos. 83 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: lipoxigenases Importância em alimentos: aspectos indesejáveis Formação de compostos e aroma desagradável; Alterações de textura; Comprometimento do valor nutricional: têm afinidade pelos ácidos linoléico e linolênico (destruição de ácidos graxos essenciais); Destruição de pigmentos e vitaminas; Alimentos envolvidos: óleos vegetais, grãos (milho, ervilha, soja), farinhas e farelos. 84 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: lipoxigenases Importância em alimentos: aspectos desejáveis Panificação: promovem o branqueamento de farinhas de trigo (destruiçãode carotenóides que podem conferir cor indesejável em alguns produtos); melhoram a textura; aumento do volume e da resistência da massa durante o trabalho mecânico. 85 Lipoxigenases Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: catalases Grande importância no metabolismo celular dos seres vivos: destruição de produtos tóxicos (peróxido de hidrogênio); Pode ser considerada uma enzima protetora com capacidade antioxidante; Fontes: animais, vegetais e micro-organismos. 86 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Oxirredutases: catalases Importância em alimentos: tecnologia do leite. Adulteração de leite: adição de água oxigenada para preservação do leite; A catalase, naturalmente presente no leite, degrada a água oxigenada: a enzima é consumida; A enzima é utilizada como parâmetro de qualidade na indústria do leite: leite com catalase (qualidade assegurada), leite sem catalase ou com pequena quantidade (indício de fraude!); Leite com H2O2: 87 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Considerações finais A tecnologia enzimática aplicada à alimentos sempre será uma aliada na obtenção de produtos de melhor qualidade: tecnológica, sensorial e nutricional; Todo processo depende de controle para que os alimentos oferecidos aos consumidores apresente um alto padrão; Nosso papel como estudantes, pesquisadores, professores e profissionais da área de alimentos é utilizar a tecnologia a nosso favor, permitindo a produção de alimentos cada vez mais atrativos, saudáveis e nutritivos. 88 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP 89 Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP Obrigado pela atenção! 90 Contato: ruann05@fea.unicamp.br Ruann Janser Soares de Castro - FEA - UNICAMP
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