Coloração de Gram.

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Centro Universitário Estácio do Ceará
Enfermagem
COLORAÇÃO DE GRAM COM LACTOBACILOS
Andressa Lima Alves
Leidiane Alves Macedo
Wicky Saiane Gomes
Fortaleza – CE
Setembro/2014
Centro Universitário Estácio do Ceará
Enfermagem
COLORAÇÃO DE GRAM COM LACTOBACILOS
Andressa Lima Alves
Leidiane Alves Macedo
Wicky Saiane Gomes
Trabalho apresentado a Professora
Patrícia Quirino como parte da
Disciplina de Microbiologia básica.
Fortaleza – CE
Setembro/2014
Sumario
Introdução................................................................................................2
Objetivos..................................................................................................3
Objetivo geral..... ................................................... .................... 3
Objetivo específico................................................... .................. 3
Metodologia..............................................................................................4
Material utilizado............................................................................4
Procedimento.................................................................................5
Conclusão.................................................................................................6
Referências bibliográficas............................... ....................... .............. 7
Introdução
 Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microrganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. A técnica recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram. (Disponível em: http://www.infoescola.com/bioquimica/coloracao-de-gram/).
 Em 1884, Gram observou que as bactérias adquiriram cores diferentes, quando tratadas com diferentes corantes. Isso permitiu classificá-las em dois grupos distintos: as que ficavam roxas, que foram chamadas de Gram-positivas, e as que ficavam vermelhas, chamadas de Gram-negativas. Após descrição do método, inúmeras propostas de modificação foram feitas. (Disponível em: http://www.biomedicinabrasil.com/2011/06/coloracao-de-gram.html).
Os lactobacilos são bactérias do gênero facultativas gram-positiva, que convertem lactose e outros açúcares simples em ácido láctico. Lactobacilos são geralmente benignos - e até necessários - ao corpo humano. A produção de ácido láctico faz com que o ambiente fique ácido, o que inibe o crescimento de outras bactérias nocivas. Algumas espécies de lactobacilos são usadas industrialmente na produção de iogurte, chucrute, picles e outros alimentos fermentados. (Disponível em: http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAKf8AD/microbiologia).
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Objetivos
 Objetivo geral: 
 Saber a diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas.
Objetivos específicos:
 - Realizar a técnica de Coloração de Gram.
 - Aprender o fundamento do método de coloração de Gram.
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Metodologia
Materiais a serem utilizados:
 - Yakult
 - Lâminas
 - Luvas
 - Papel toalha
 - Alça de platina pequena
 - Corantes fúcsias
 - Lugol
 - Álcool
 - Bico de Bunsen
 - Óleo imersão
 - Suporte
 - Lâmina
Lâminas - mergulhadas em solução alcoólica, ficam aptas a serem utilizadas a qualquer momento, evitando paralelamente que sejam arranhadas. Placa de Petri - facilita o isolamento de microrganismos devido à grande superfície de crescimento que apresenta, possibilitando o aparecimento de colônias separadas. Lugol Este produto se emprega frequentemente como desinfetante e anti-séptico, e para a desinfecção de água em emergências2 e como conservante3, embora nestas aplicações, mais e mais as soluções do tipo lugol de iodo-iodeto em água são abandonadas, por apresentarem baixa quantidade de iodo livre, que é realmente o agente microbicida. Nestas aplicações, são substituídas por tinturas de iodo e soluções de iodopovidona. É utilizado para cobrir deficiências de iodo4 5 6. Em microbiologia, é empregado na coloração de Gram para reter o colorante violeta cristal. O I2 entra nas células e forma um complexo insolúvel em solução aquosa com o violeta cristal. Algodão bruto- serve para proteger o material esterilizado, do contato com o ar ambiente. Alça de transferência é um instrumento de uso em laboratórios de microbiologia composto de um fio metálico, de platina (quando é chamada também de alça de platina), ou aço inoxidável, preso a um cabo de vidro, um bastão de vidro, ou plástico de comprimento adequado. São atualmente também fabricadas alças de transferência totalmente em plástico, descartáveis. 1 São usadas para transferir materiais contendo microorganismos, como bactérias ou leveduras, de um meio de cultura ou material em análise para outro meio. As alças de transferência metálicas são flambadas constantemente em bico de Bunsen ou lamparina a álcool, durante seu uso, 
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propiciando esterilização e com isso evitando a contaminação indesejada dos meios em trabalho. Álcool O álcool é uma classe de compostos orgânicos que possui, na sua estrutura, um ou mais grupos de hidroxilas ("-OH") ligados a carbonos saturados. 1 É, comumente, utilizado como combustível, esterilizante e solvente. É o componente principal das bebidas alcoólicas. Bico de Bunsen O bico de Bunsen é um dispositivo usado para efetuar aquecimento de soluções em laboratório. Este queimador, muito usado no laboratório, é formado por um tubo com orifícios laterais, na base, por onde entra o ar, o qual se vai misturar com o gás que entra através do tubo de borracha.
Óleo de Imersão: Um óleo especial usado em microscópios.
Procedimento:
Colocar uma colher de Yakult na lâmina, espalhar o Yakult na lâmina, fixar com calor o Yakult na lâmina, depois cobrir o Yakult corante cristal violeta e deixar por um minuto, lavar com lugol e deixar por um minuto, lavar a lâmina com água corrente, discorra com álcool e depois lave a lâmina com água corrente, depois cubra a lâmina com corante fucsina e deixe agir por trinta segundos.
Então observaremos a lâmina no microscópio.
Neste procedimento a cor obtida foi azul violeta nesse caso o Gram foi positivo. 
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Conclusão
 Coloração de Gram é um método de coloração simples, onde as bactérias são tratadas com corantes diferentes e as positivas e negativas assumem colorações diferentes, sendo as bactérias de Gram – positivo roxo e as bactérias de Gram – negativo rosa/vermelho. 
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Referências bibliográficas
 Disponível em: http://www.infoescola.com/bioquimica/coloracao-de-gram/. Acessado em: 14/09/2014.
 Disponível em: http://www.biomedicinabrasil.com/2011/06/coloracao-de-gram.html. Acessado em: 14/09/2014.
 Disponível em: http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAKf8AD/microbiologia. Acessado em: 
 Disponível em: http://www.ebah.com.br/content/ABAAABeMgAA/microbiologia-manual-laboratorio. Acessado em: 14/09/2014.
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