Determinação desacarose e glicose e vitamina c (2)

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BROMATOLOGIA
Profa: Elizonete Peres de Farias
Determinação de Glicose, Sacarose e Vitamina C em Alimentos.
Determinação de glicose
Preparo do Licor de Fehling 
Em um erlenmeyer de 250 mL colocar 10 mL do licor de Fehling A e 10 mL do licor de Fehling B
Acrescentar 2 mL de NaOH entre 30-33% (funciona como corante);
Acrescentar 40 mL de água destilada;
Acrescentar umas 5 pérolas de vidro com cuidado pelas paredes
Preparo da Amostra
Em um balão volumétrico de 100 mL com rolha esmerilhada colocar 10 mL de refrigerante;
Acrescentar uma pitada de carvão ativo (se o refrigerante for colorido);
Completar o volume com água destilada;
Fechar o balão e homogeneizar;
Filtrar em papel de filtro;
Passar o filtrado para a bureta.
Dosagem da Glicose
Aquecer o licor contido no erlenmeyer em um fogareiro;
Quando estiver fervente, fazer gotejar a bureta sobre o erlenmeyer sem agitar;
Aquecer novamente até fervura.
Acrescentar mais filtrado presente na bureta até o licor se descore, o metal (cobre) precipite e o sobrenadante fique amarelado. O precipitado é vermelho tijolo (Cu2O) que vai ficando suspenso na solução;
Anotar a quantidade gasta e fazer os cálculos.
Cálculo: G = 100 x B x a / V x A,
Sendo:
G = no de gramas de glicídios redutores em glicose, por 100 mL,
A = no de mL da amostra ou o peso da amostra);
B = no de mL em que foi dissolvida a amostra,
 a = no de gramas de glicose, correspondente a 10 mL das soluções de Felhing 0,05 )
 V = no de mL da solução de amostra gasta na titulação
Dosagem de Sacarose
Em um balão volumétrico de 100 mL com rolha esmerilhada colocar 10 mL de refrigerante e50 mL de água destilada;
Acrescentar 0,5 mL de HCl concentrado e uma pitada de carvão ativo ( se o refrigerante for colorido)
Levar ao banho-maria durante 25 min, tendo o cuidado para a temperatura não ultrapassar 85o C. 
Esfriar o balão sobre jato de água fria e neutralizar com NaOH;
Completar o volume com água destilada;
Fechar o balão e homogeneizar;
Filtrar em papel de filtro;
E passar a solução para a bureta;
Preparar o licor de Fehling e colocar em erlenmeyer de 250 mL;
Colocar 2 mL de NaOH a 30-33 % e 40 mL de água destilada;
Aquecer o erlenmeyer com Licor e gotejar a solução de açúcar invertido da bureta;
Anotar o volume gasto.
A técnica de dosagem e cálculo é semelhante ao da glicose, com a diferença de que o resultado final deve ser multiplicado por 0,95 para se obter a sacarose.
Esse fator se consegue da seguinte forma:
Massa molecular da sacarose antes da inversão...342.
Massa molecular da sacarose depois da inversão...360.
Portanto, se 360 equivalentes a 342 de sacarose, 1 equivalerá a “x” de sacarose, donde:
Cálculos: S = (100 x B x a / V x A - C) x 0,95
S = no de gramas de glicídios não redutores em sacarose, por 100 mL
B = no de mL em que foi dissolvida a amostra
A = no de mL da amostra usada na inversão ( ou o peso da amostra)
V = no de mL de solução da amostra, gasto na titulação
C = no de gramas de glicose por 100 mL, obtido em glicídios redutores em glicose (quantidade de glicose)
A = no de gramas de glicose correspondente a 10 mL da solução de Fehling (0,05)
DETERMINAÇÃO DE VITAMINA C 
FUNDAMENTO: 
O teor de ácido Ascórbico pode ser determinado pelo método de Tillmans que é um método titulométrico. Este método baseia-se na redução do indicador 2,6 Diclorofenol Indofenol (DCFI) pelo ácido Ascórbico. O DCFI em meio básico ou neutro é azul, em meio ácido é rosa, e sua forma reduzida é incolor. O ponto final da titulação é detectado pela viragem da solução de incolor para rosa, quando a primeira gota de solução de DCFI é introduzida no sistema, com todo o ácido ascórbico já consumido. Os resultados são expressos em mg de ácido Ascórbico por 100mL de amostra. 
ESCOPO: 
Este método é usado para amostras com baixo teor de vitamina C, por exemplo, sucos de frutas. Baseia-se na redução do corante sal sódico de 2,6 Diclorofenol Indofenol por uma solução ácida de vitamina C. 
EQUIPAMENTOS UTILIZADOS: 
Agitador Magnético
Balança Analítica 
MATERIAS DE LABORATÓRIO UTILIZADOS 
Balão Volumétrico de 50 e 200 mL 
Bureta de 25 mL 
Béquer de 200 mL 
Erlenmeyer de 125 mL 
Espátula 
Funil 
Papel Alumínio
Papel de Filtro 
Pipetas de 5 e 10 mL 
REAGENTES UTILIZADOS: 
Ácido Ascórbico – C6H8O6 
Ácido Oxálico – C2H2O4 
Celite 545 
2,6 Diclorofenol Indofenol – C12H6Cl2NNaO2.XH2O 
PROCEDIMENTO: 
PREPARO DA AMOSTA: 
Transferir, com o auxílio de uma pipetar, 5,0 mL da amostra para balão volumétrico de 50 mL e; 
Completar o volume do balão com uma solução de ácido Oxálico 2%; 
Homogeneizar bem;
Adicionar uma “ponta” de espátula de Celite 545 (com a finalidade de diminuir cor e turbidez) em papel de filtro; 
Filtrar neste papel filtro o conteúdo do balão, recolhendo o filtrado em um Becker de 200 mL de capacidade; 
Após filtrar, com o auxílio de uma proveta, lavar o papel de filtro com 10 mL da solução de ácido Oxálico 2%; 
Tampar o Becker com papel alumínio e manter em escuro por 15 minutos. 
 
TITULAÇÃO DA AMOSTRA: 
Transferir, com o auxílio de uma pipeta, 10 mL do extrato da amostra obtida para Erlenmeyer de 125 mL; 
Completar o volume da bureta com a solução de 2,6 Diclofenol Indofenol a 0,02%; 
Colocar o Erlenmeyer com a amostra sobre o agitador magnético e colocar um imã dentro deste; 
Agitar vagarosamente; 
Titular com a solução de 2,6 Diclofenol Indofenol a 0,02%; contido na bureta, até viragem para coloração rósea clara; 
Anotar o volume gasto na bureta. 
TITULAÇÃO DA SOLUÇÃO PADRÃO: 
Transferir, com o auxílio de uma pipeta, 10 mL da solução padrão de ácido Ascórbico para Erlenmeyer de 125 mL; 
Completar o volume da bureta com a solução de 2,6 Diclofenol Indofenol a 0,02%; 
Colocar o Erlenmeyer com a amostra sobre o agitador magnético e colocar um imã dentro deste; 
Agitar vagarosamente; 
Titular com a solução de 2,6 Diclofenol Indofenol a 0,02%; contido na bureta, até viragem para coloração rósea clara; 
Anotar o volume gasto na bureta. 
CÁLCULOS: 
SOLUÇÃO PADRÃO: 
 
% ÁCIDO ASCÓRBICO: