Aula 4 - Lipossomos

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2- Lipossomas 
Micro/ Nanoencapsulação 
Profa Dra Maria Bernadete Pierre- Farmacotécnica UFRJ 
VIDEO ESTRUTURA LIPOSSOMOS 
ATÉ 3’ 14 
Componentes estruturais dos lipossomos 
 
• FOSFOLIPIDEOS 
• COLESTEROL 
• ANTI-OXIDANTES 
• ÁGUA OU TAMPÃO 
 
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• 
•Fosfolipídeos naturais ou semi-sintéticos 
 
Lipídeos estruturais 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Ex: fosfatidilcolina- Gema de ovo ou óleo de soja 
FOSFOLIPÍDEOS 
Profa Dra Maria Bernadete Pierre- Farmacotécnica UFRJ 
PARTES DE UM FOSFOLIPÍDEO 
Lipossomos são formados quando fosfolipídeos são dispersos 
em meio aquoso, formando vesículas uni ou multilamelares, 
com diâmetro variando de 0,25 a 5 m. 
 
 
Vesículas semelhantes às membranas biológicas. 
 
 
 
 
 
 
 
Capacidade de encapsular drogas hidrossolúveis, lipossolúveis 
e anfifílicas. 
 
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Arranjo dos fosfolipídeos 
micelas 
bicamadas vesículas 
fosfolipídio 
Profa Dra Maria Bernadete Pierre- Farmacotécnica UFRJ 
VESÍCULA LIPOSSOMAL 
Substância hidrofílica
Substância lipofílica
Substância anfifílica
Profa Dra Maria Bernadete Pierre- Farmacotécnica UFRJ 
BICAMADAS LIPÍDICAS OU LAMELAS DOS LIPOSSOMOS 
Fluidez da bicamada: 
Tc= A temperatura de mudança de gel-fluido é dita temperatura de transição. 
Depende da natureza química dos componentes da bicamada 
Uma bicamada de fosfolipídios pode existir em 2 estados físicos dependendo da 
temperatura: 
- estado gel: 
 
 
 
 
 
 
 
 
-estado fluido ou cristal líquido 
 
 
Tc lipídeo > T meio = membrana lipossomo é 
 
GEL OU RIGIDA 
(movimento restrito dos lipídeos ) 
Ex: Tc= 55ºC- diestearolilfosfatidilcolina 
Tc lipídeo < T meio= membrana lipossomo é 
 
FLUIDA (maior movimento lipídeos) 
Ex: Tc= 23ºC= DMPC 
Tc= 0°C = DOPC 
 
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ESTERÓIS 
• COLESTEROL: presente em 
membranas animais. 
 
- Colesterol se encaixa nos espaços 
vazios entre as moléculas de 
fosfolipídeos, ancorando-as mais 
firmemente na estrutura. 
fluidez 
permeabilidade 
 
 Melhora a estabilidade da membrana nos fluidos biológicos 
 
OUTRAS SUBSTÂNCIAS: Vitamina E (α tocoferol): anti-oxidante. 
Anel esteróide: componente rígido 
 
 
Cauda de HC: componente flexível 
 
COLESTEROL X FLUIDEZ 
Colesterol = 
Ordenamento da bicamada de fosfolipídios; 
Torna- as menos fluidas e menos permeáveis; 
Menor interação com proteínas plasmáticas Menor vazamento 
conteúdo do lipossomo. 
SELEÇÃO DOS COMPONENTES 
• Não existe uma fórmula padrão, depende do uso e tipo de 
lipossomo que se quer obter 
 
 
•Exemplo: Fosfatidilcolina/Colesterol/fosfatidilglicerol 
 
 
 
•Razão molar: 6/3/1, mistura lipídica a 30 mM, 4 mL. 
 
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• A- Quanto ao número de bicamadas (lamelaridade) 
 
LUV- vesículas unilamelares 
MLV- vesículas multilamelares 
CLASSIFICAÇÃO DOS LIPOSSOMOS 
 
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• B-Quanto ao tamanho 
MENORES QUE 100 NM: 
SUV- vesículas pequenas unilamelares (25 nm) 
 
MAIORES QUE 100 NM: 
LUV- vesículas grandes unilamelares (250 nm) 
MLV- vesículas grandes multilamelares (2500 nm) 
 
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Tipo Características 
MLVs Mais que uma bicamada 
Maior encapsulação para drogas lipofílicas 
 
LUVs Simples bicamada com alto volume aquoso 
 Útil para drogas hidrofílicas 
 Alta captura de macromoléculas 
 
SUVs Única bicamada 
 Limitada captura de macromoléculas 
 Baixo volume aquoso 
 Longa meia-vida de circulação 
 
25 nm 
SUV 
100 nm 250 nm 
LUV 
500 nm 1000 nm 2500 nm 
MLV 
C-Quanto ao método de preparação 
 
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I- PROCEDIMENTO GERAL 
A) MÉTODO DO FILME 
Evaporação do 
solvente 
Hidratação e agitação 
Filme lipídico 
* 
** 
1-PROCEDIMENTO GERAL 
TÉCNICAS DE PREPARO 
II- DISPERSÃO MECÂNICA: TECNICA COMPLEMENTAR 
 
A- Sonicação e 
B- Extrusão 
 
 
 
OUTRAS TÉCNICAS DE OBTENÇÃO DE LIPOSSOMOS: 
 
III-DISPERSÃO POR SOLVENTE: Injeção 
 
IV- FASE REVERSA 
 
 
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Após obtenção lipossomos pelo Método Geral (Filme): 
TÉCNICAS DE PREPARO 
 
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BANHO GELO
SONDA
N 2
BANHO GELO
SONDA
N 2
II- DISPERSÃO MECÂNICA: TECNICA COMPLEMENTAR 
 
A- Sonicação= Ultra-som 
Extrusão 
TÉCNICAS DE PREPARO 
 
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 Lipossomos grandes são transformados em pequenos e com 
distribuição uniforme pela passagem através de membrana 
de tamanho poro definido (µm) 
N2 
OUTRAS TÉCNICAS DE PREPARO 
 Injeção 
 
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Lipídeos em solvente 
orgânico 
Água ou tampão 
Evaporação de Fase Reversa 
Vídeo preparo 
lipossomos 
• Remoção do fármaco não-encapsulado (ou livre); 
 
•Coluna de Sephadex G-50 (Pharmacia LKB): Método mais 
usado; 
 
•Lipossomos são separados do fármaco encapsulado em 
colunas cromatográficas de acordo com a diferença de 
tamanho= Cromamatografia de Exclusão , processo de 
separação mecânico; 
•F.M= solvente para a eluição da amostra 
•F. E= partículas com forma, tamanho e porosidades 
uniforme; 
 
•Moléculas menores que as partículas da F.E: penetram 
nos poros (retidas) 
 
•Moléculas maiores que as partículas da F.E: são 
excluídas dos poros 
 
•Moléculas de tamanho intermediário: as maiores são 
eluidas antes das menores. 
PURIFICAÇÃO DOS LIPOSSOMOS APÓS PREPARO 
PURIFICAÇÃO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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• Diálise 
 
Remoção do fármaco não-encapsulado. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• Centrifugação 
 
 
Separação por diferença de densidade 
 
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• Problemas: 
 
Oxidação dos lipídeos 
•I nstabilidade física: fusão das vesículas, rompimento das vesículas, 
vazamento do material encapsulado 
 
Proteção contra degradação química 
 
•Usar lipídeos recentemente purificados; 
•Evitar altas temperaturas; 
•Manipular na ausência de oxigênio; 
•Eliminar oxigênio do meio com gás inerte (nitrogênio ou hélio); 
•Adicionar agentes antioxidantes e quelantes; 
•Usar lipídeos saturados. 
Preparações extemporâneas 
• Lipossomos congelados ou liofilizados que sofrem hidratação na hora do 
uso. 
Liofilização 
 Congela-se a amostra em nitrogênio líquido 
 
 Coloca no Liofilizador por 12 horas para que ocorra a sublimação da água 
coletando apenas os lipossomos 
VANTAGENS 
 
•Biocompatíveis e biodegradáveis. 
 
•Versatilidade de aplicação: encapsulamento de substâncias hidrofílicas ou 
lipofílicas. Várias vias de administração. 
 
 
•PROTEÇÃO: contra degradação física e biológica. 
 
 
•AUXÍLIO NA FORMULAÇÃO: reformulação para substâncias tóxicas ou irritantes. 
POR QUE USAR LIPOSSOMOS PARA VEICULAR FÁRMACOS? 
DIRECIONAMENTO: 
PASSIVO: biodistribuição alterada lipossomos após I.V
--- acúmulo em áreas alvo e não naquelas onde efeito 
colateral fármaco é mais prejudicial (coração, rim e 
TGI)------------- 
 
aumenta I.T fármaco. 
 
 
Produto Droga Formulaçã
o 
Empresa Indicação/Alv
o 
País 
Doxil 
antineoplasico 
Doxorubi
cina 
Lipossomos 
(LCL) 
Sequus 
Pharmaceutica
s, Inc,CA. 
 
Ou 
 
Alza 
Sarcoma de 
Kaposi (Aids) 
 
Câncer 
ovariano 
 
Câncer 
múltiplo de 
medula óssea 
USA e 
Europa 
DOXORRUBICINA livre: 
Antibiótico antineoplásico. 
Alta toxicidade cardíaca 
INTRAVENOSO. 
LIPOSSOMAL= não acumula no coração 
Ambisome Anfotericin B 
F. LIVRE causa 
ef. Colaterais 
serios: 
nefrotoxicidade; 
anemias, etc 
Liposomos 
(LCL) 
NeXstar 
Pharmaceutical 
Inc., CO 
ou 
Gilead 
Infecções 
fungais sérias 
Em 24 
países 
Alfotericina livre: 
Nefrotoxica, anemia: limita a dose! 
 
LIPOSSOMAL: 
AmBisome (amphotericin b): injetável estéril, 
apirogenica, liofilizada, para infusão intravenosa. 
Cada frasco contém: 
50 mg of amphotericin B, em lipossomos 
consistindo de 213 mg PC soja hiodrogenada; 52 
mg colesterol, 84 mg distearoilfosfatidilglicerol; 
0.64 mg alfa tocoferol; and 27 mg succinato 
dissódico hidratado como tampão. 
Após reconstituição com água estéril para injeção, 
a suspensão resultante tem pH entre 5-6. 
• LUVs 
• < 100 nm 
http://www.rxlist.com/ambisome-drug.htm 
Amphocil Anfotericina 
B 
Complexo 
lipídico 
Sequus 
Pharmaceutical
, Inc., CA 
Infecções 
fungais 
sistêmicas; 
aspergilose 
invasiva(Asper
gillus, candida 
e criptococus) 
Asia e 
Europa 
http://www.amphocil.com/ 
•INFUSÃO INTRAVENOSA 
 
•RECONSITUIÇÃO ANTES DO USO 
TRATAMENTO DA LEISHMANIOSE CUTANEA E VISCERAL 
 
Doença parasitária causada por protozoários flagelados os quais são fagocitados 
por macrófagos, no interior dos quais estes se tornam amastigotas (formas que 
se multiplicam livremente) 
 
Após administração IV dos lipossomos : 
 
Opsonização pelas proteínas do plasma (opsoninas= Imunoglobulinas IGG e 
IGM) levando ao reconhecimento pelas células do SRE (macrófagos do baço e 
fígado). 
 
Ex: se o alvo é o parasita de macrófago (Leishmaniose) a administração IV de 
lipossomos contendo antimoniais leva ao DIRECIONAMENTO PASSIVO deste 
para o alvo! 
 
EX: Se alvo são os tumores baço e fígado (macrófagos destes órgãos 
opsonizarão os lipossomos e assim leva ao DIRECIONAMENTO PASSIVO deste 
para tais órgãos! 
Direcionamento ATIVO: imunolipossomos 
 
 por meio de anticorpos ou outros ligantes na superfície 
do lipossomo. 
A: anticorpo ligado a 
lipossomo convencional. 
B: anticorpo ligado a LLC 
(estabilizado 
estericamente). 
C: anticorpo ligado ao 
final distal da molécula de 
PEG. 
 
•DURAÇÃO DA AÇÃO: liberação lenta obtendo um aumento da duração 
da ação e uma diminuição na freqüência da administração. 
 
Objetivo principal do sistema lipossômico é concentrar a ação do 
fármaco no local desejado, para maximizar a ação terapêutica e 
minimizar a toxicidade. 
 
O tamanho, a composição lipídica e a carga elétrica dos lipossomos: 
 
Influenciam a sua distribuição no organismo e sua deposição. 
 
USOS DOS LIPOSSOMOS NA TERAPÊUTICA HUMANA 
 LIBERAÇÃO DE GENES- TERAPIA GENÉTICA: doenças geneticas 
 
Lipossomos catiônicos 
Leuvectin: câncer de próstata. 
DERMATOLOGIA: 
 
• superfície da pele 
• penetrar na pele (500 nm) 
Fig. 3. Possible mechanisms of action of liposomes as skin drug delivery systems. (A) 
is the free drug mechanism, (B) is the penetration enhancing process of liposome 
components, (C) indicates vesicle adsorption to and/or fusion with the stratum 
corneum (SC) and (D) illustrates intact vesicle penetration into or into and through the 
intact skin (not to scale) (modified from El Maghraby et al., 2006). 
DOENÇAS INFECCIOSAS: 
 
- Infecções parasitárias (Leishmaniose): LC 
- Antibióticos 
- Antituberculostáticos (rifampicina e isoniazida) 
 
 
•VACINAS: lipossomos são usados para promover a resposta imune pela 
incorporação de antígenos ou seqüência de DNA. 
 
- Epaxal (hepatite A) 
- outras vacinas: gripe, hepatite B, tatano, E. Coli, etc. 
 
OUTRAS APLICAÇÕES TERAPÊUTICAS 
VIAS DE ADMINISTRAÇÃO PARA LIPOSSOMOS 
Local 
•Intramuscular: 
 Efeito sustentado no local de aplicação 
Minimiza os efeitos de medicamentos tóxicos como dicoflenaco de sódio. 
 
 
 
 
•Tópica: 
•Maior penetração cutânea do fármaco na pele 
•Retenção do lipossomo na pele, onde ele age como um depósito para a 
liberação sustentada. 
•Diminuição da absorção percutânea do fármaco, diminuindo portanto a 
toxicidade para órgãos não alvo. 
 
 
 
• ORAL 
Condições fisiológicas do trato GI não mantém estáveis vesículas lipídicas. 
Estudos futuros: insulina, Fator VIII (hemofilia)