Questionário Exames Bacteriologicos Questionário Cocos GRAM +, Orofaringe, Hemocultura e LCR 2ª prova

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QUESTÕES EXAMES BACTERIOLÓGICOS
APROFUNDAMENTO PARA O II EXERCÍCIO
(COCOS GRAM POSITIVOS, CULTURA DE OROFARINGE, LCR E HEMOCULTURA)
1. Quais as características gerais do gênero Staphylococcus (família, coloração de Gram, arranjos, motilidade, tamanho, crescimento e cor)?
Cocos gram positivos da família micrococcaeae. Arrajados em cachos ( de uva) ou desordenadamente. Não possui motilidade porque são cocos e não possuem flagelos. Em relação ao tamanho são células pequeninhas mas maiores que os Strep. A cor varia de branco a amarelo-dourado. Crescem em qualquer meio de cultura sem enriquecimento. Anaeróbios facultativos.
2. Qual o teste que determina a sua identificação primária?
Catalase positiva para Staphylococcus
3. Staphylococcus aureus é um micro-organismo presente em várias manifestações clínicas. Determine: Quais as doenças que pode produzir, os sítios de infecção que pode acometer, o seu habitat normal e as principais vias de transmissão?
Doenças: Abscessos, furúnculos,sepse,presente nos processos supurativos,infecção alimentar
Habitat: pele, intestino,garganta,nariz
Transmissão: contato direto ou por vias aéreas
4. Quais as enzimas extracelulares que o Staphylococcus aureus pode possuir? Detalhe cada uma delas.
DNase, catalase e coagulase.
A coagulase é uma proteína, semelhante a protrombina, capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina. Existe a coagulase fixa, que está unida na parede celular bacteriana e a coagulase livre, que é liberada em meios de cultivo. A fixa é feita em lâmina, que pega da cultura, coloca-se na lâmina limpa e algumas gotas de plasma sanguíneo. Havendo a presença de grumos é coagulase positiva.
A catalase é uma enzima que decompõe o peróxido de hidrogênio em oxigênio e água, e a característica do aparecimento do oxigênio é o aparecimento de borbulhas.
A DNase existe em um meio contendo Dna e como o Staphylococcus aureus contém a enzima Dnase, esta vai despolimerizar o DNA do meio e ao adicionar o revelador que é o acido clorídrico ao redor dessa colônia onde houve a despolimerização vai ficar um halo branco, transparente, indicando o resultado positivo.
Temos também duas enzimas que é a estafiloquinase e a hialuronidase. A primeira faz o contrário da coagulase, ela vai destruir o coágulo formado e destrói as fibrinas formadas. A hialuronidase é uma enzima que ativa o plasminogênio em plasmina que vai dissolver a fibrina. Essas enzimas ela aumenta o poder invasivo do microrganismo. Se há um coagulo formado e aquele coagulo é destruído, o microrganismo tem a facilidade de invadir o local
5. Qual a importância das hemolisinas e leucocidinas do Staphylococcus aureus?
As hemolisinas do tipo alfa exercem efeitos letais em vários tipos celulares, incluindo polimorfonucleares – demonstráveis devido sua ação hemolítica em hemácias de coelho. É a mai scomum em amostras de origem humana. As hemolisinas do tipo beta são responsáveis pela hemólise sinérgica observada no teste de CAMP.
Leucocidinas também são toxinas e provocam a lise dos grânulos citoplasmáticos dos leucócitos (neutrófilos) e macrófagos humannos.
6. Qual a principal característica da enterotoxina que provoca intoxicação alimentar estafilocócica?
São termoestáveis; ou seja, resistem ao aquecimento e refrigeração. Provocam sintomas como náuseas, vômitos, diarréia e dores abdominais em apenas 4 horas após sua ingestão.
7. O que é sindrome do choque tóxico? Quais os seus sinais e sintomas?
Doença causada por toxinas bacterianas, pode ocorrer devido ao uso de tampões (principalmente), barreiras contraceptivas (diafragma), mordias, de insetos, queimaduras, piodermites, entre outras. Além de febre, rash cutâneo hipotensão e descamação pode haver o envolvimento de 3 ou mais “sistemas”:
Gastrointestinal: vômitos, diarréia;
Muscular: mialgia severa ( exame: CPK);
“Mucosas”: Hiperemia vaginal, orofaringe e conjuntival;
Renal: nitrogênio e uréia aumentados; piúria sem infecção do trato urinário (UTI);
Hematológico: plaquetopenia;
SNC: desorientação.
8. Quais as doenças que a toxina esfoliativa pode provocar?
Síndrome da pele escaldada: caracterizada por bolhas induzidas por toxinas de S. aureus, pode acometer narinas, nasofaringe, conjuntivas, umbigo e/ou sangue. Além das bolhas, é comum haver febre e eritema cutâneo.
Impetigo Bolhoso: caracterizada por bolhas grandes de parede muito fina que quando se rompem deixam a região afetada inflamada e com aspecto húmido. 
9. Faça a correlação dos fatores de virulência do Staphylococcus aureus e os efeitos patogênicos.
	Fatores de Virulência
	Efeitos Patogênicos
	Coagulase
	Conversão de fibrinogênio em fibrina
	Lipase, desoxibonuclease, hialuronidase, fosfolipase
	Contribuição para virulência
	Proteína A
	Liga-se a fração FC da IgG
	Leucocidina
	Destruição citolítica de fagócitos
	Hemolisina –alfa
	Destruição de membrana
	Hemolisina –beta 
	Destruição de membrana
	Toxinas esfoliativas
	Síndrome de pele escaldada no homem
	Enterotoxinas
	Toxinas termoestáveis, associadas a intoxicação alimentar no homem
	Toxina da Síndrome do Choque Térmico
	Induz produção excessiva de Linfocina, gerando lesão tecidual.
10. Como Staphylococcus aureus é identificado laboratorialmente?
Colocaração Gram: Cocos Gram positivos em cachos.
Cultura de coloração amarelo dourado, hemolisina pode ser positiva para algumas cepas, manitol, DNase, coagulase fixa e livre e teste de aglutinação com látex todos positivos. A catalase positiva é muito importante pois diferencia Staphylococcus de Streptococcus (que são catalase negativos).
11. Como é feito o teste da catalase e qual sua importância?
No teste da catalase, primeiro coloca-se uma colônia da bactéria no centro de uma lâmina. Em seguida, goteja-se sobre a colônia água oxigenada a 3%, de modo que ao observar a formação de bolhas (efervescência), a catalase é positiva. O teste é importante porque diferencia os cocos gram positivos Staphylococcus de Streptococcus.
12. Explique o fundamento do teste do Manitol e da DNAse.
O meio agar manitol é altamente seletivo para isolamento de estafilococos patógenos (aureus) em cultivo misto. As colônias de estafilococos crescem bem no meio, formando um halo amarelo ao seu redor, que indica a produção de ácido a partir do manitol. O Staphylococcus aureus é fermenta manitol, ao contrário do S. epidermidis.
No teste da DNAse, existe um meio contendo DNA, e se a bactéria possuir a DNAse, esta vai despolimerizar o DNA do meio. Adicionando o revelador Ácido Clorídrico ao redor da colônia onde houve despolarização, vai ficar um halo claro, transparente, indicando um resultado positivo. A bactéria Stapylococcus aureus é positiva para DNAse, comparando com as outras do mesmo gênero.
13. São dois tipos de coagulase que o Staphylococcus aureus pode promover. Quais são essas coagulases e como são feitas a sua determinação?
Existe a coagulase fixa, que está unida na parede celular bacteriana e a coagulase livre, que é liberada em meios de cultivo. A fixa é feita em lâmina, que pega da cultura, coloca-se na lâmina limpa e algumas gotas de plasma sanguíneo. Havendo a presença de grumos é coagulase positiva.
14. Qual a identificação laboratorial do Staphylococcus epidermidis?
Cor branca, catalase positiva, coagulase negativa, Dnase negativa, manitol negativo
15. Qual a sua associação como patógeno oportunista?
O Staphylococcus epidermidis habita a pele, microbiota normal. Ele acaba se comportando como patógeno oportunista quando atinge outros locais do organismo, como por exemplo infecções causadas por dispositivos internos como cateter, sonda, dipositivo cardíaco ou até articular.
16. Qual a identificação laboratorial do Staphylococcus saprophyticcus?
Catalase +, coagulase -, cor branca, manitol -, Dnase – e novobiocina resistente a 5 microgramas.
17. Como é realizado e qual a interpretação do teste da Novobiocina?
No teste da novobiocina, semea-se a bactéria em placa de Petri,
em seguida, coloca-se o disco de novobiocina 5 µg e incuba a placa adequadamente. Dessa forma, observa-se a ocorrência de um halo de inibição ao redor do disco. Quando o halo é menor ou igual a 15mm, é resistente e é característico de Staphylococcus saprophyticus. Halo maior ou igual a 16mm é sensível e característico de S. epidermidis.
18. Qual o principal sítio de infeção relacionado com Staphylococcus saprophyticcus?
Habitam a mucosa e o trato urinário
19. Como se comporta o gênero Micrococcus e Staphylococcus frente aos discos de Furazolidona e Bacitracina?
Staphylococcus é resistente a bacitracina e sensível a furazolidona. Micrococcus é sensível a bacitracina e resistente a furazolidona.
20. Cocos gram positivos em tétrade, catalase positiva, oxidase positiva devem ser testados com meio OF (Micrococcus oxidativo e Staphylococcus fermentativo) e disco de bacitracina ou furazolidona para identificar Micrococcus.
21. Quais as características gerais do gênero Streptococcus (família, coloração de Gram, tamanho, cor, crescimento) e sua identificação primária?
Arranjos em cadeia, não possui motilidade porque não possui flagelos, tamanho menor que o staphylo. Crescem e necessitam de meio enriquecido para crescer, são anaeróbios facultativos, catalase negativa,
22. Quais as espécies do gênero Streptococcus de maior importância clínica?
Pyogenes, agalactiae, pneumoniae e os enterococcus.
23.Determine a identificação laboratorial do Streptococcus pyogenes e qual grupo pertence?
É um strepto-B-hemolítico do grupo A. catalase -,colônias incolores translucidas, bacitracina sensível, camping -, hemólise beta e PYR positivo.
24. Determine a identificação laboratorial do Streptococcus agalactiae e qual grupo pertence?
B-hemolítico do grupo B. Catalase -, bacitracina resistente, camping positivo, hidrolise do hipurato, bile esculina negativo.
25. Como é feito o teste da bacitracina? Qual a concentração do disco? Como é feita a sua interpretação?
O teste de sensibilidade a bacitracina é realizado com a adição de um disco impregnado de bacitracina (na concentração de 0,04 unidades por disco) ao meio de cultura inoculado com a bactéria (semeio em área retangular, o disco é adicionado no centro dessa área), incuba-se a 35ºC por 18-24h. Se houver qualquer formação de halo o teste é positivo para sensibilidade a bacitracina,se não houver formação de halo o teste é negativo.
26. Qual o fundamento do teste PYR? Quais os cocos Gram positivos de interesse clínico que são PYR positico?
O teste PYR (L-pirrolidonil-Beta-naftilamida) se baseia na capacidade da bactéria de produzir a enzima L-pirrolidonil-aminopeptidase que irá hidrolisar a amida do substrato formando naftilamida, adiciona-se então o reagente p-dimetilaminocinaldeído que, ao reagir com a naftilamida, forma uma cor vermelho brilhante. Os Streptococcus do grupo A, sendo o principal de importância clínica o S. pyogenes, e os Enterococcus produzem tal enzima e, portanto, são PYR positivos.
27. Quais os sítios de infecção do Streptococcus pyogenes e quais as suas sequelas?
Provocam infecções nas vias aéreas superiores (faringe-amidalites) e na pele a piodermite e erisipela. Habitat: pele e trato respitatório superior
28. Toxina eritrogênica, toxina escarlatínica ou toxina de Rick produzida por amostras de Streptococcus isoloados de casos de escarlatina provoca uma característica na língua conhecida como: língua em framboesa, devido ao aumento das papilas que adquirem um tom vermelho arroxeado nos bordos e na ponta da língua.
29. Faça a distinção entre Estreptolisina S e Estreptolisina O.
A streptolisina S é oxigênio estável, não imunogênica, responsável pelo halo de hemólise( é uma hemolisina) em torno das colônias de S. pyogenes e pela morte de uma parte dos leucócitos que fagocitam a bactéria. A streptolisina O é oxigênio sensível e fortemente antigênica, conduz a formação de antiestreptolisina. A determinação do titulo de anticorpo contra a estreptolisina O é de grande valor diagnóstico na febre reumática onde títulos superiores a 125 unidades são indicadores de infecção estrepcócica recente.
30. Determine o fundamento do teste CAMP.
O teste visa a identificação de cepas de Streptococcus agalactiae (grupo B). Estas cepas produzem o fator CAMP que atua sinergicamente com a β-hemolisina produzida pelo Staphylococcus aureus em ágar sangue. Semear um inóculo de Staphylococcus aureus de um ponto a outro da placa de ágar sangue; Semear perpendicularmente a colônia de Streptococcus β-hemolítico a ser testada, sem que haja o contato com a estria de Staphylococcus aureus,Incubar a 35°C por 48 horas. A formação de uma seta ou meia-lua convergindo para o S.aureus na intersecção do crescimento das duas bactérias indica que o teste é positivo e indicativo de S. agalactiae.
31. Qual a razão da importância do Streptococcus agalactie ser identificado em mulheres grávidas ou em idade reprodutiva?
Deve ser tratado pois provoca meningite ou sepse neonatal. Mulheres grávidas tem que fazer o controle com a cultura de secreção varginal para eliminar esse agalactiae. Tratamento com penicilina, cefalosporina, eritromicina, a maioria das amostras é resistente a cloranfenicol.
32. Qual a identificação laboratorial do Streptococcus grupo viridans? Cite um dos Streptococcus deste grupo que está diretamente relacionado com o processo cariogênico. Qual a principal doença que eles podem provocar?
São streptococcus orais. Pode ser alfa ou beta homoliticos, a maioria é alfa. Os de importância clínica são é o mutans que faz parte do processo cariogênico. 
Catalase -, bile esculina -, PYR -, optoquina resistente e bile solubidade negativa.
33. Determine a identificação laboratorial do Streptococcus pneumoniae.
Catalase-, bile solubilidade +, optoquina sensível que é o que vai identificar o pneumoniae. 
Doenças: pneumonia, otite, meningite e sepse. Transmissão: gotículas aéreas.
34. Quais os seus sítios de infecção e o seu habitat normal? Que hemólise pode provocar?
Pulmão e meninges, trato respiratório (garganta). Alfa-hemolítico.
35. Qual a identificação laboratorial do Enterococcus? A que grupo pertence e quai as hemólises que pode produzir?
Pode ser alfa, beta e gama hemolíticos. Bile solubidade -, bile escullina +, Nacl +, PYR +, catalase -. Colônias puntiformes translucidas.
36. Determine o fundamento da prova de bile esculina.
É utilizada no isolamento e diferenciação de Enterococos e estreptococos grupo D. Baseia-se na capacidade de algumas bactérias hidrolisarem esculina (derivado glicosídico da cumarina) em presença de bílis. A hidrólise da esculina no meio resulta na formação de glicose e esculetina, a esculetina reage com íons férricos (incorporados ao meio pela adição de citrato férrico), formando um complexo negro.
37. Determine o fundamento da prova de tolerância ao NaCl.
Utilizada na verificação da capacidade de alguns microrganismos crescerem na presença deste sal. O crescimento do microrganismo com consequente turvação do meio indica uma reação positiva.
38. Como facilmente é feita a diferenciação dos Grupos A e B dos C, F, G?
Através da utilização de discos de sensibilidade bacteriana impregnados com Sulfanamida-trimetoprim-sulfametoxazol (SXT) onde as do grupo A e B são resistente e as do grupo C, F, G são sensíveis. No caso da diferenciação do grupo A e B utiliza-se discos de Bacitracina, sendo as do grupo A sensíveis e as do grupo B resistentes.
39. Quais os micro-organismos patogênicos que podem ser encontrados no trato respiratório inferior e superior?
SUPERIOR: Streptococcus pyogenes; Neisseria meningitides; Staphylococcus aureus; Corynebacterium difteriae.
INFERIOR: Mycobacterium tuberculosis; Streptococcus pneumoniae; Klebsiella pneumoniae; Haemophilos influenza. 
40. Qual a doença que Corynebacterium difteriae provoca e quais as suas características? Como é feita a sua transmissão e qual o seu período de incubação?
Provoca a difteria. São Bacilos Gram-positivos, agrupados
em letras chinesas, relativamente resistentes, podendo suportar calor, frio e ressecamento, são aeróbios, imóveis, não capsulado, não esporulado, pleomórfico e produtor da toxina diftérica.
O modo de transmissão se dá pelo contágio direto com doentes ou portadores através de secreções de rinofaringe, também por transmissão através de objetos contaminados pelas secreções de orofaringe ou de lesões em outras localidades.
O período de incubação em geral é de 1 a 6 dias, podendo ser mais longo (10 dias).
41. Qual o meio de cultura seletivo utilizado para a sua identificação?
No meio de Löeffler (contem soro bovino) as colônias do Corynebacterium diphtheriae começam a surgir após 8h -10h, sendo estas pequenas, granulosas, com bordas irregulares, na cor creme ou cinza-claro. Entretanto, o meio mais utilizado é o ágar sangue acrescido de Telúrito de Potássio, onde as colônias se apresentam com uma coloração cinza escura ou preta resultado da redução intracelular deste composto. O Telúrito, na concentração empregada, ainda funciona como inibidor de outras bactérias. 
Com este meio ainda é possível diferenciar morfologicamente três tipos de colônias: a gravis (colônias não-hemolíticas, grandes, acinzentadas, irregulares e estriadas) que está associada a forma grave da doença; a mitis (colônias hemolíticas, pequenas, pretas, brilhantes e convexas com umas superfície espessa) que esta associada forma leve; e a “intermedius” (pequenas colônias não-hemolíticas apresentando características situadas entre os dois extremos, colônias cremosas e transparentes), que está associada forma intermediária.
42. Como é feita a coleta de orofaringe?
A coleta deve ser feita de preferencia no turno da manhã e o paciente não pode ter ingerido qualquer alimento, nem ter feito uso de produtos tópicos ou de antibióticos sistêmicos. Para se fazer a coleta o paciente deve abrir bem a boca e, com ajuda de um abaixador de língua, o técnico deve fazer esfregaços nas amigdalas e faringe posterior utilizando um swab estério, evitando tocar na língua. Também deve-se colher o material das áreas hiperemiadas próximos aos locais de supuração ou retirar todo o pus ou placa para colher amostras abaixo da mucosa. É importante evitar outros sítios da cavidade oral que não estejam inflamados.
43. Como uma bactéria viável pode penetrar na corrente sanguínea?
Existem duas formas das bactérias penetrarem na corrente sanguínea: A forma extravascular e a intravascular. Na extravascular, a penetração ocorre a partir de um foco primário de infecção, que passa para os vasos linfáticos e em seguida para a corrente sanguínea, sendo o trato geniturinário e o trato respiratório as portas de entrada mais comuns. Já a forma intravascular consiste na penetração direta da bactéria na corrente sanguínea através de agulhas, cateteres ou outros dispositivos cardiovasculares.
44. Qual a diferença entre bacteriemia e septicemia?
Bacteremia consiste na presença de bactérias na corrente sanguínea devido a penetração direta ou por consequência de processos infecciosos. Já a septicemia além de apresentar bactérias (e as vezes toxinas) na corrente sanguínea, também há um processo inflamatório intenso associado. 
45. Em que situações o médico deve solicitar uma hemocultura?
Normalmente o médico solicita a hemocultura quando há suspeita de endocardite, sepse, infecções hospitalares ou quando o paciente apresenta febre de origem desconhecida. O exame também é solicitado para pacientes imunodeprimidos com sinais de infecção ou para aqueles com meningite, peneumonia grave ou bacteremia.
46. Como podem ser classificadas as bacteriemias?
As bacteremias são classificadas de acordo com o tempo em que as bactérias permanecem na corrente sanguínea. Desta forma, há três classificações: transitória, intermitente e persistente. Na forma transitória a bacteremia persiste na corrente sanguínea por minutos ou horas. Isto ocorre quando, por exemplo, quando o indivíduo manipulou algum tecido infectado (furúnculo), fez algum procedimento cirúrgico envolvendo tecidos contaminados ou mesmo escovou os dentes com muito vigor. Na forma intermitente a bacteremia ocorre sempre com o mesmo organismo em períodos variados de tempo, sendo comum em pacientes com abcessos intra-abdominais e pélvicos. Em relação a forma persistente, a bacteremia não sessa podendo ser um sintoma de endocardite infecciosa ou ouras infecções intravasculares.
47. Quais os micro-organismos frequentemente envolvidos?
S. aureus, K. Pneumoniae, P. Aeruginosa, E.coli, E.faecalis, S. Cogulase negativa, Serratia marcensces, Strep. grupo viridans, A. calcoaceticus, Streptococcus pyogenes, E. cloacae, Salmonela sp.
48. Quais os fatores que contribuem para o início de uma infecção da corrente circulatória?
Agentes imunossupressores, uso de antibiótico de largo espectro, procedimentos invasivos, procedimentos cirúrgicos extensivos e prolongada sobrevida de pacientes severamente doentes.
49. Como deve ser feita a antissepsia da pele para a coleta de sangue para hemocultura?
Primeiramente a pele do paciente deve ser tratada com Iodo à 2% ou Polivinil Pirrolidina Iodo (PVPI) à 10%. Em seguida, o excesso de iodo ou de PVPI deve ser retido utilizando álcool 70%. O mesmo procedimento serve para a esterilização das tampas dos meios de hemocultura.
50. Qual a relação sangue meio de cultura? Qual o anticoagulante utilizado e o porquê desta utilização?
Para pacientes que não fazem uso de antibiótico a relação sangue/meio de cultura deve ser 1:10. Mas caso o paciente faça uso deste tipo de medicamento a relação para melhor recuperação dos microrganismos deve ser 1:5 sangue/caldo. Na coleta, o anticoagulante utilizado é o Polianetol Sulfonato de Sódio (PSP). Este é o anticoagulante de escolha, pois tem ação inibidora para lisozimas, inibe certas concentrações de aminoglicosídeos e polimixinas, inibe algumas frações do complemento e inibe parcialmente a fagocitose. Vale ressaltar que nuca se deve utilizar a heparina, pois ela inibe o crescimento de algumas bactérias.
51. Quais os meios utilizados para a realização dos sub-cultivos?
Agar Sangue, EMB e Agar Chocolate enriquecido. Agar thayer-Martin é utilizado para cultura e isolamento de Neisseria.
52. O que é o LCR? Qual a característica do LCR normal e do LCR patológico?
É um fluido transparente, incolor e límpido produzido nos ventrículos cerebrais do SNC que se localiza no cérebro e medula espinhal. O LCR normal deve ter aspecto aquoso e transparente e apresentar-se estéril. O LCR patológico possui tonalidade variável, desde levemente opalescente até turvo; suas composições química e citológica alteram-se com inflamações cerebrais ou de meninge (meningite, encefalite).
53. Quais os principais agentes etiológicos das meningites agudas e a sua relação com a idade?
Recém nascidos e < 2 meses: Escherichia coli, Streptococcus agalactiae, Listeria monocytogenes
< 10 anos: Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis
Jovens Adultos: Neisseria meningitidis
Adultos: Neisseria meningitidis e Streptococcus pneumoniae
Idosos: Streptococcus pneumoniae, Listeria monocytogenes e Bacilos gram negativos
Imunodeprimidos: Cryptococcus neoformans
54. Como deve ser feita a punção para obtenção do LCR? Quais os cuidados especiais para esta coleta?
Não há preparo específico para o exame, porém o paciente não pode estar fazendo uso de medicação anticoagulante. Na execução o paciente é deitado e colocado de lado, com o pescoço dobrado para baixo e as pernas encolhidas ( posição fetal) ou sentado com a cabeça abaixada. Depois de introduzida a agulha, é preciso deixar que o líquido saia naturalmente, gota a gota, para o recipiente próprio. Pode haver redução da pressão intra-craniana.
Cuidados especiais incluem: coleta em local rigorosamente asséptico; o LCR deve ser enviado ao laboraório imediatamente após a colheita e mantido à temperatura ambiente ( ou estufa a 35 graus), não podendo
ser refrigerado antes do processamento a menos que seja para pesquisa de virus – no caso, a refrigeração ou congelamento são permitidos.
55. Como deve ser feita a coloração de Gram do LCR?
O LCR é centrifugado em tubo estéril, seu sedimento é misturado completamente e coletado por uma alça que colocará o material em uma lâmina nova e desengordurada. Um segunda alçada é aplicada sobre a primeira já seca, com o intuito de aumentar a concentração do líquor. O material não deve ser espalhado sobre a superfície da lâmina, já que tal procedimento dificulta a visualização de microorganismos em pequenos números.
56. Determine os testes de identificação de Neisseria meningitidis.
O Gram é muito típico se tivermos a sorte de encontrar, num produto normalmente estéril, neutrófilos com cocos Gram- dentro dos próprios neutrófilos, é quase diagnóstico de meningite por Neisseria meningitidis.
Para identificação da Neisseria meningitidis faz o teste da oxidase, onde ela é positiva; degradação da glicose e maltose em meio CTA (onde ela acidifica, cor amarela); cresce bem em ágar sangue mas por precaução deve-se semear em ágar chocolate (onde apresentam colônias maiores que da N. gonorrhoeae);
57. Determine os testes de identificação de Haemophylus influenzae.
Para identificação do Haemophilus influenzae o melhor meio de cultura é o ágar chocolate com sangue de cavalo; motilidade negativa; oxidase positiva; requerem os fatores V e X; catalase positiva; não crescem em EMB e McConkey e pouco crescimento em ágar sangue.
58. Qual micro-organismo é identificado pela prova do satelitismo? Qual o fundamento desta prova?
A prova do satelitismo é utilizada para identificação presuntiva de Haemophillus spp. Deve-se semear com swab uma suspensão em cerca de 1 a 2 da escala MacFarland no centro de uma placa com sangue de carneiro e uma única estria com Staphylococcus aureus é feita na superfície transpassando o meio de cultura. O Haemophillus influenzae cresce em pequenas colônias ao redor do alo de hemólise do S. aureus.
59. Determine os testes de identificação de Listeria monocytogenes.
Para identificação de Listeria monocytogenes deve-se semear em ágar sangue de carneiro, coelho ou cavalo, com base TSA, embora cresça também com outras bases (Mueller Hinton, Columbia, Brucella, BHI etc.). Produzem reação positiva no teste da catalase e negativa nos testes da oxidase, ureia, gelatina, indol e H2S; ácido a partir de glicose; hemólise beta em ágar sangue de carneiro e CAMP-positivo. A mobilidade é observada em temperaturas de 25°C a 28°C, porém e negativa a 37°C. Além dos resultados positivos nos testes de hidrolise da esculina e crescimento em 6,5% NaCl e observada reação rápida na prova da esculina.
60. Quais os meios de cultura utilizados para semeio do LCR?
Ágar chocolate enriquecido e ágar sangue.