03 Lipídios

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL
DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE ALiMENTOS E SAUDE PUBLICA
DISCIPLINA DE BROMATOLOGIA I - CURSO de FARMAclA
ROTEIRO DE AULA PRATICA
L1PiOIOS
1.1 - Introdw;ao
Na determinagao de Iipldios emalimentos.oreslduoobtidonaoecorl.st.tufdo
unicamente por gorduras, mas por todos os compostos que, nas condigoes da determinaqao,
possam ser extraidos por esse metodo. Geralmente sac ester6is, fosfatidios, vitaminas A e D,
caroten6ides, 61eos essenciais, etc., mas em quantidades relativamente pequenas, nao
chegam a representar uma diferenga significativa na determinag80. Nos produtos8m que
estas concentrag6e~ se tornam maiores a determinagao tera a denominagao mais adequada
de Extrato Etereo. E utilizado para esta determinag80, 0 eter etilico que deve ser anidro ou
eter sulfurico ou eter de petr6leo. A extragao e feita num extrator intermitente, sendo mais
usado 0 aparelho de Soxhlet. Este aparelho evita a indesejavel elevag80 da temperatura que
afetaria 0 produto a ser extratado. 0 material ao ser colocado no cartucho deve ser finarnente
triturado e dessecado, facilitando a penetragao do eter e evitando a dissolug80 de substancias
soluveis em agua, bem como 0 arrastamento da pr6pria agua, 0 que provocaria erros.
Quando 0 material for Ilquido, este deve ser colocado com fibra de anlianto
recentemente calcinada e resfriada, sendo a seguir dessecada e levada ao cartud:o de
Soxhlet. Materias que se aglomeram facilmente devem ser manipuladas com areia e
seca antes de serem levadas ao aparelho.o tempo de extrag80 e variaveldependendo da substancia. Verifica-se que a extragao
esta terminada quando uma gota do destilado nao forma mancha no papel de filtro.
Ao terminG da extiag80 deve-se recuperar a maior parte do eter por destilagao.
1.2 - Material e reagentes
Balanga anal [tica;
Estufa regulada a 105°C ± 1°C;
Dessecador com cloreto de calcio anidro ou silica gel com indicador;
Extrator de Soxhlet completo, com cartucho;
Bequer de 500ml;
Funil de separagao de 500ml;
Vidro de rel6gio;
Proveta de 100 ml;
I?edagos de ,ceramica; .
Eter de petroleo p.a. 40-60°C;
SOlUg80de nitrate de prata a 0,1N;
$01ug80 de acido clondrico (2:1) 8N;
Agua destilada;
La de vidro;
Papel de filtro SS-589m au equivalente.
1.3.1- Metodo de extrac;ao direta
Pesar uma quantidade conhecida de material desseeado e transferir quantitativarnente
para 0 cartucho de Soxhlet. Cobrir a amostra no cartucho com um pedac;o de aigodao
desengordurado. Extrair em aparelho de Soxhlet cujo balao foi previamente aquecido par 1
hora, em estufa a 105°C, resfriado em desseeador ata a temperatura ambiente e pesada. A
extraC;80 a feita com eter etflico ou eter de petroleo por 3 - 6 horas. Evaporar 0 solvente e
colocar 0 balao com 0 reslduo em estufa a 105°C. Resfriar em dessecador ate a temperatura
ambiente. Pesar. Repetir as operac;oes de aquecimento (30' na estufa) e resfriamento ate peso
constante.Calcular para 100g de substancia dessecada e para 100 9 de substancia integral.
1.3.2- Metodo de hidr6lise acida
Este metoda e usado para produtos contendo cacau, ingredientes lacteos e produtos
preparados por aqueci mento e secagem.
Pesar, com precisao de 0,1mg, 5g da amostra e transferir para um bequer de 500m/.
Adicionar, sob agitac;ao, 2Q.m1 de a~ua destilada fervente.
Adicionar 2,Qm1 de seido clondrico 8N (2:1) e alguns pedac;os de ceramica.
Cobrir 0 bequer com vidro de relogio. Aquecer e ferver suavemente por 15 minutos.
Lavar 0 vidro de relogio com 100 ml de agua destilada, recolhendo as aguas de favagem no
pr6prio bequer. Fiftrar 0 digerido atraves de papel de fillro 88-589 ou similar, lavando 0 bequer
3 vezes com pequenas porc;oes de agua. Lavar 0 material retido no filtro ate ausencia de
cloreto.
Para isto, recolher 1 gota dotiltrado e adicionar 1 gota de nitrate de prata 0,1N. A
turvaC;80 indica presen98 de doreto. Transferir 0 papel de filtro com 0 material retirado para
um cartucho de extrac;ao, cobrir com la de vidro e fixar a la com p.edac;ode papel de fiitro.
Coloear 0 cartucho no baquer utilizado para digestao, e seear a 105°C por no mmimo, 6 horas.
Transferir 0 filtrado para um funil de separac;ao de 500ml eextrair 3 vezes com porc;oes
de 50ml de eter de petroleo. Guardar as porc;6es combinadas do extrato etereo no proprio
balao, contendo pedac;os de ceramica, a ser utilizado no extrator Soxhlet, ja seco a 105°C e
tarado.
Transferir 0 eartucho, com 0 reslduo, para 0 extrator Soxhret. Conectar 0 balao com 0
extrato etereo. Lavar 0 bequer de seeagem com 3 porc;oes de 50 ml de ater de petroleo
transferindo-as para 0 extrator Soxhlet. Extrair durante 4 horas.
Ap6s a extrac;ao, remover 0 frasco e destilar 0 solvente para uso posterior. Completar a
evaporac;ao do solvente em um banho Maria em ebulic;ao. .,
Seear 0 frasco por 1 hora em estuta a 105°C ± 1°C. Esfriar 0 trascoem dessecador ate
temperatura ambiente e pesar. Repetir a operaC;80 de aquecimento e esfriamento ate que a
diferenc;a entre duas pesadas sucessivas seja menor que 0,05%.
1.4 - Resultados
Lipldios em gl100g = P2 - P1 X 100
Po
Po= quantidade de amostra em gramas
P1 = Peso de balao desseeado, expresso em gramas.
P2::: Peso do balao e tipidios apos seeagem, expresso em gramas
o metodo de Gerber e 0 mais empregado para a determinagao de Iipfdios no leite.
Fundamenta-se na quebra de emulsao do leite pela adigao de acido sulfurico e alcool amBico,
centrifugagao e posterior determinagao de gordura. 0 acido sulfurico digere os compohentes
nao graxos e 0 alcool amHico facilita a solubilizag80 da gordura.
Lactobutfrometro de Gerber,
Pipeta volumetrica de 11,10 e 1 ml,
Termometro graduado de 0 a 100°C,
Centrifuga de Gerber,
Pera de borracha.
Acido sulfurico (0= 1,820 - 1,825)
Alcool amflico (0= 0,815) isento de gordura.
Transferir 10 ml de acido sulfurico para um butirometro de Gerber, adidonar lentamente
11 ml da amostra (sem morhar inteiramente 0 gargalo do butirometro) e 1 ml de alcool amilico.
Arrolhar e agitar, por inversao, ate a completa dissolugao (envolver 0 butirometro com teeido, a
reagao e fortemente exotermica). Centrifugar a 1.200 r.p.m., durante 10 minutos. Levar para
um banho de agua a 65 - 70°C por 5 a 10 minutos, com rolha para baixo. Retirar 0 butir6metro,
mantendo a posigao vertical e manejando a rolha, coloear a camada amarela-dara,
transparente (lipfdios) dentro da haste graduada do butirometro.
o numero de ml ocupado pera camada oreosa corresponde diretamente a porcentagem
de lipfdios (a leitura deve ser feita no menisco inferior).
INSTITUTO AOOLFO LUTZ - Normas analiticas do Instituto Adolfo Lutz.- Metodos
quimicos e fisicos para amUises de alimentos. 3a ed. Sao Paulo, 1985.533 p.v.1.
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods of analysis.
14.ed., Washington, 1984.