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UFRGS - ICBS - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA PROF TUISKON DICK CBS01 031 – BIOQUÍMICA I – ESTUDO DIRIGIDO DE ENZIMAS 1. O sabor doce do milho recém-colhido deve-se a um alto conteúdo de açúcar no grão. O milho comprado em mercados (vários dias depois de colhido) não é tão doce porque 50% do açúcar livre é convertido em amido no primeiro dia após a colheita. Para manter o sabor doce do milho fresco depois de debulhado, o milho pode ser imerso em água fervente por alguns minutos e então resfriado com água fria. O milho processado dessa maneira e mantido congelado mantém a doçura. Qual é a base bioquímica desse processo? 2. As prostaglandinas pertencem a uma classe de eicosanoides (derivados de ácidos graxos com uma diversidade de ações extremamente potentes sobre os tecidos de vertebrados). São responsáveis pela produção de febre, inflamação e dores associadas. As prostaglandinas são derivadas do ácido araquidônico, um ácido graxo de 20 carbonos, por uma reação catalisada pela enzima prostaglandina-endoperóxido-sintase. Essa enzima, uma ciclo-oxigenase, utiliza oxigênio para converter ácido araquidônico em PGG2, o precursor direto de muitas prostaglandinas diferentes (a síntese das prostaglandinas está descrita no Capítulo 21 do Lehninger). (a) Os dados cinéticos abaixo são de uma reação catalisada pela prostaglandina-endoperóxido-sintase. Focando nas primeiras duas colunas, determine Vmáx e Km da enzima. 3. O soro humano contém uma classe de enzimas conhecidas como fosfatases ácidas. Elas hidrolisam ésteres de fosfato biológicos sob condições levemente ácidas (pH 5,0) As fosfatases ácidas são produzidas por eritrócitos, pelo fígado, pelos rins, pelo baço e pela glândula da próstata. A enzima da próstata tem importância clínica porque um aumento da sua atividade no sangue pode ser um indicativo de câncer de próstata. A fosfatase da próstata é inibida fortemente pelo íon tartarato, enquanto as fosfatases dos outros tecidos não. Como essa informação pode ser usada para desenvolver uma metodologia para medir a atividade da fosfatase ácida prostática no sangue? 4. A anidrase carbônica é fortemente inibida pelo fármaco acetazolamida, utilizado como diurético (i.e., para aumentar a produção de urina) e para diminuir a pressão excessivamente alta no olho (devido ao acúmulo de fluido intraocular) no glaucoma. A anidrase carbônica tem um papel importante nesse e em outros processos de secreção, pois participa na regulação do pH e do conteúdo de bicarbonato de vários fluidos corporais. A curva experimental da velocidade inicial (como porcentagem de Vmáx) dessa reação da anidrase carbônica versus [S] está ilustrada abaixo (curva superior). Quando o experimento é repetido na presença de acetazolamida,é obtida a curva inferior. A partir da inspeção das curvas e do seu conhecimento das propriedades cinéticas de inibidores competitivos e mistos, determine a natureza da inibição por acetazolamida. Explique o raciocínio usado.
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