Hidrólise do Amido: Testes de Benedict e Iodo

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ISCTEM
MEDICINA GERAL
BIOQUÍMICA II
Tema: Hidrólise do amido 
Introdução 
O amido figura como reserva glicídica dos vegetais. Os produtos vegetais por sua vez são fonte de amido 
na alimentação humana e animal. Este é armazenado dentro das células na forma de grãos bastante 
compactos e por isso pouco acessível à degradação pela α-amilase no trato gastrointestinal dos animais. 
Durante a fervura dos alimentos, as paredes celulares incham-se e solubilizam-se, processo que facilita e 
acelera a digestão do amido no intestino delgado. A α-amilase salivar actua dentro de faixas de pH e 
temperatura, fora dos quais ela se torna inactiva. Nesta aula pretende-se verificar o efeito de alguns 
factores na actividade da α-amilase salivar. 
Determinação do amido pelo iodo
Moléculas de iodo intercalam-se nas hélices do amido. O iodo captado apresenta coloração azul 
característica que desaparece durante a degradação do amido pela α-amilase. Durante a acção da α-
amilase sobre o amido, formam-se vários intermediários dentre os quais encontramos as dextrinas que em 
dependência do seu tamanho dão uma cor castanha ou violeta a solução do iodo. Os produtos da digestão 
do amido pela α-amilase, maltose e maltotriose, não apresentam coloração. 
Determinação de açúcares redutores segundo Benedict 
Para provar a presença de açúcares redutores numa amostra usa-se reagentes como o de Benedict que 
contém iões de cobre num meio alcalino. O princípio da reacção é o seguinte: 
Açúcar oxidado Açúcar reduzido 
2Cu2+ (cor azul) 
2Cu+ 
H2O 
2OH- 
Cu2O (precipitado vermelho tijolo) 
A reacção ocorre em meio com alta temperatura. Depois do arrefecimento correlaciona-se a cor com 
a concentração de açúcar as amostras. 
Perguntas de controle 
1. Que teste se usa para evidenciar a degradação do amido pela amilase nesta experiência?
2. Como se prova a presença dos produtos da degradação do amido?
3. Porque é que se fervem os vegetais ricos em amido na alimentação humana?
Tabela 1. Relação entre a cor da solução e a concentração de açúcares redutores
Cor Concentração
Azul 0
Verde +
Amarelo laranja ++
Vermelho +++
G. Salomé
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Parte experimental 
Material e reagentes 
11 tubos de ensaio e suporte 
Proveta de 50 ml e copo de precipitação de 100 ml 
Pipetas 
Funil, papel de filtro 
Banho-Maria a 0oC, 37ºC e a 100ºC 
Reagente de Benedict 
Solução J (amido a 1%:1g em 100ml de tampão fosfato pH =7,0 contendo 5mM de NaCl) 
Solução M (amido a 1% em água destilada) 
Ácido clorídrico a 0,1M 
Procedimento 
1. Utilizando uma proveta meça 50 ml de água destilada e coloque num copo descartável de 100 ml.
Sorva esta água em pequenos goles e bocheche durante um minuto de modo a obter uma solução de
saliva suficientemente concentrada. Depois filtre esta solução utilizando a mesma proveta para recolher o
filtrado.
2. Marque os 11 tubos de ensaio do seguinte modo: 1, 2, 3, A, A1, B, B1, C, C1, D, e D1. Pipetam-se 10ml
da solução J no tubo 1 e 10ml da suspensão M no tubo 2.
3. Coloque 1ml do filtrado de saliva nos tubos B e D. De seguida coloca-se o tubo D no banho a zero
graus onde fica até ao fim d experiência.
4. Preprare no tubo 3 uma mistura de 2ml de filtrado de saliva e 1ml de ácido clorídrico a 0,1M. Pipete
1ml desta mistura e no tubo C.
5. Ferva o conteúdo dos tubos 1, 2 e B no banho-Maria até que a suspensão fique clara. Retire do banho e
deixe arrefecer.
6. Meta os tubos A, B, e C no Banho-Maria a 37ºC onde ficam até ao final da experiência.
7. De seguida pipete 3ml da solução do tubo 1 para o tubo A, 3ml para o tubo B e 3ml para o tubo D que
deve permanencer no banho-Maria a zero graus até ao fim da experiência.
8. Adicione 1 ml do filtrado de saliva no tubo A. Pipete 3ml da solução do tubo 2 já arrefecido no
tubo C. Misture os conteúdos dos quatro tubos por inversão e deixe incubar durante 15 minutos.
9. Enquanto decorre a incubação pipete 1 ml de solução de Benedict nos tubos A1, B1, C1 e D1 e
reserve.
10. Depois da incubação transfira 2 ml da mistura presente em cada um dos tubos A, B, C e D para os
respectivos tubos índice 1 e fervem-se os 4 tubos em Banho-Maria a 100ºC durante 2 minutos.
Depois do arrefecimento avalia-se a cor presente no tubo de ensaio.
11. Adicione 4 gotas de solução de Iodo em cada um dos tubos A, B, C e D. Agite levemente e anote os
resultados.
G. Salomé
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Resultados 
Teste de Benedict Teste de Iodo 
Pontos para a discussão 
• Existe uma estequiometria entre a quantidade de amido hidrolisado e a dos açúcares formados nos
tubos A, B e C?
• Quais são as causas dos diferentes resultados nestes 4 tubos?
Cor da solução
Tubo A
Tubo B
Tubo C
Tubo D
G. Salomé