ATIVIDADE ESPERMOGRAMA

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1. SINONÍMIA 
 
Análise do sêmen, estudo do líquido seminal, contagem espermática, citologia seminal, estudo da morfologia 
espermática, estudo do líquido do esperma e contagem espermática. 
2. APLICABILIDADE 
Biomédicos, biólogos e médicos 
3. APLICAÇÃO CLÍNICA 
Investigar possíveis causas de infertilidade masculina e suspeitas de infecção bacteriológicas. 
4. PRINCÍPIO DO TESTE 
Analisar propriedades: 
físicas e químicas: Cor, Volume, pH, Tempo de liquefação e Viscosidade 
Quantitativas: Contagem de espermatozoides, Motilidade, Viabilidade e Morfologia 
5. AMOSTRA 
-Para a coleta da amostra é necessário realizar a anamnese do paciente afim de descobri sobre uso de 
alguma medicação, se está realizando alguma terapia e casos de febre recentes. 
-Para realização do exame o paciente deve está em abstinência sexual de no mínimo 2 dias a um 
máximo de 7 dias. 
- A coleta pode ser realizada no laboratório ou em casos muito específicos em casa com o uso de uma 
camisinha sem espermicida ou lubrificante. 
- Antes da coleta do material o paciente deve urinar, lavar as mãos e a glande do pênis com sabão 
neutro. 
-A amostra deve ser coletada por meio de masturbação sem o uso de qualquer tipo de lubrificante 
incluindo saliva e todo o sêmen deve ser coletado em um frasco estéril oferecido pelo laboratório. Em 
caso de perda de volume o laboratório deve ser avisado. 
6. REAGENTES E MATERIAIS 
Matérias usados na coleta e nos procedimentos Frasco de vidro ou plástico graduado com tampa de rosca e 
identificado, caso o recipiente não seja graduado é necessário ter conhecimento do peso do recipiente ou 
preservativo sem a presença de qualquer tipo de lubrificante e/ou espermicida, incubadora com temperatura 
Laboratório 
KD o pai 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO - POP 
RA – POP - 001 Elaborado por: 
Keli Crristina Araujo de Lira 
Deisy Dantas 
Data: 05/04/2020 
ESPERMOGRAMA COMPLETO 
ajustada para 37°C, bastão de vidro, régua, balança analítica, pipeta estéril, ponteira, tiras reagentes, 
microscópio de contraste de fase, lâmina e lamínula, lente ocupar com grade ou câmara para contagem, 
contador, corante eosina-nigrosina, suporte para tubos e/ou microtubos, microscópio óptico de campo claro, 
fixador, câmara de hemocitômetro ou Neubauer. 
7. PROCEDIMENTO/TÉCNICA 
I Exames de aspectos físicos e químicos: 
Cor: avaliar a olho nu. 
Volume: o recipiente de coleta da amostra pode ser graduado ou o peso do mesmo deve ser conhecido para 
que assim que amostra chegue seja feito a diferença entre o peso do recipiente como e sem a amostra e então 
calculado o volume considerando a densidade do sêmen seja de 1 g/ml. 
pH: Tira reagente. 
Tempo de liquefação: Devesse anotar o tempo que o material leva para se liquefazer em temperatura 
ambiente sobre a bancada. 
Viscosidade: Devesse anotar o diâmetro de uma linha fina formada a partir da suspenção da amostra com um 
bastão de vidro após a homogeneização com o mesmo. 
 
II Exames Quantitativos: 
 
A. Contagem de espermatozoides: 
 Examinar uma preparação úmida bem misturada e não diluída de sêmen liquefeito em uma lâmina de 
vidro sob uma lamela, para determinar a diluição apropriada e as câmaras apropriadas a serem usadas. 
 Misturar o sêmen e preparar diluições com fixador. 
 Carregar a câmara do hemocitômetro e deixar os espermatozoides assentarem em uma câmara úmida. 
 Avaliar as amostras dentro de 10 a 15 minutos (após o qual a evaporação tem efeitos perceptíveis na 
posição dos espermatozoides dentro da câmara). 
 Contar pelo menos 200 espermatozoides por replicado. 
 Comparar as contagens replicadas para ver se estão bem próximas. Se assim for, proceder com os 
cálculos; se não, preparar novas diluições. 
 Calcular a concentração em espermatozoides por ml. 
 Calcular o número total de espermatozoides por ejaculação. 
 
B. Análise de Motilidade 
 Prepara uma alíquota usando pipeta estéril e passando para um tubo ou microtúbulo. Antes da 
preparação da alíquota a amostra deve ser aspirada e pipetada cerca de 10 vez evitando ao máximo 
possível a formação de bolhas ou a danificação dos espermatozoides. 
 A amostra pode ser avaliada em temperatura ambiente ou a 37 °C. No segundo caso a amostra deve 
ser conservada em estufa a 37 °C, a lâmina e lamínula usadas no procedimento devem ser previamente 
aquecidas. 
 Deve se pipetar 20 µl de sêmen em uma lâmina de vidro limpa e cobrir com uma lamínula de 22 mm x 
22 mm. 
 A avaliação é feita em microscópio de contraste usando ampliação de x 200 ou x 400 e lentes oculares 
com grades. Devesse procurar espermatozoides em uma área de pelo menos 5 mm da borda da 
lamínula, vasculhar sistematicamente a lâmina para evitar a exibição repetida da mesma área e evitar 
demora na contagem para que não ocorra a superestimação dos resultados. 
 A contagem é feita primeiro para as células com motilidade progressiva, em seguida, para os 
espermatozoides não progressivos e finalmente os espermatozoides imóveis na mesma seção da 
grade. 
 A avaliação deve ser feita em graus classificando quanto ao tipo de progressão podendo ser do tipo 1 
Motilidade progressiva,2 Motilidade não progressiva,3 Imotilidade. O resultado é registrado em 
porcentagem. 
 
C. Teste de viabilidade 
 Prepara uma alíquota usando pipeta estéril e passando para um tubo ou microtúbulo. Antes da 
preparação da alíquota a amostra deve ser aspirada e pipetada cerca de 10 vez evitando ao máximo 
possível a formação de bolhas ou a danificação dos espermatozoides. 
 Deve se homogeneizar 50 µl de sêmen com um volume igual de suspenção de eosina-nigrosina e 
aguarda 30 segundos. 
 Misturar novamente a amostra de sêmen antes de remover uma alíquota replicada. 
 Para cada suspensão, fazer um esfregaço em uma lâmina de vidro. 
 Examinar imediatamente após a secagem ou posteriormente após a montagem com um meio de 
montagem não aquoso permanente. 
 Examinar cada lâmina com óptica de campo claro com ampliação × 1000 e imersão em óleo. 
 Registrar o número de células coradas (mortas) ou não coradas (vitais) com o auxílio de um contador 
de laboratório. 
 Avaliar 200 espermatozoides em cada réplica, a fim de obter um erro de amostragem aceitavelmente 
baixo 
 Calcular a média e a diferença das duas porcentagens de células vitais das lâminas replicadas. 
 Determinar a aceitabilidade da diferença(Em cada mostra, a diferença máxima entre duas 
porcentagens que se espera que ocorra em 95% das amostras é devido ao erro de amostragem 
isolado). 
 Se a diferença entre as porcentagens for aceitável, relatar a porcentagem média de espermatozoides 
vitais. Se a diferença for muito alta, fazer duas novas preparações a partir de duas alíquotas frescas da 
amostra de sêmen e repetir a avaliação. 
 Relatar a porcentagem média de espermatozoides vitais para o número inteiro mais próximo. 
 
D. Teste de morfologia 
 Preparar o esfregaço de sêmen em uma lâmina aplicando uma alíquota de 5-10 µl de sêmen, 
dependendo da concentração espermática, até o final da lâmina. Usar uma segunda lâmina para puxar 
a gota de sêmen ao longo da superfície da lâmina e deixar secar ao ar. 
 Corar a lâmina mergulhando-a sobre a seguinte serie: Etanol, Etanol graduado, Água destilada, 
Hematoxilina, água de torneira, Etanol ácido, Água de Scott, Etanol, Orange G e EA-50. 
 Montar a lâmina com uma lamínula, se a lâmina for mantida por um longo período de tempo. 
 Examinar a lâmina com óptica de campo claro na ampliação × 1000 com imersão em óleo. 
 Avaliar cerca de 200 espermatozoides por repetição para uma percentagem de formas normais. 
 Comparar os valores da réplica para ver se eles estão razoavelmente próximos: em caso afirmativo, 
prosseguir com os cálculos; se não, reler as lâminas. 
8. VALORES DE REFERÊNCIA 
Cor: Branco acinzentado 
Volume: 1,5 ml 
pH: 7,2 ~ 8,0 
Tempo de liquefação: De 30 a 60 minutos 
Viscosidade: Até 2 cm 
Contagem de 
espermatozoide:Global ≥ 15,0 
milhões/ml 
No ejaculado ≥39,0 
milhões/ml 
Motilidade Progressivo + não 
progressivo≥ 50% 
Progressivo+ não 
progressivo + 
imóveis ≥ 32%. 
Viabilidade: ≥ 58% 
Morfologia: ≥ 4 % 
 
9. MODELO DE LAUDO 
Espermograma 
Nome do paciente: N° de Cadastro: 
Laboratório: Endereço: 
Data da Coleta: Horário da coleta: 
Nome do Médico: Local da coleta: 
Exane:_________________________Resultado:_________________________Valor de referência: 
Material: esperma 
Propriedades Físicas e químicas: 
Cor: Branco acinzentado 
Volume: 1,5 ml 
pH: 7,2 ~ 8,0 
Tempo de Liquefação: de 30 a 60 minutos 
Viscosidade: até 2 cm 
Exames quantitativos: 
Contagem global de espermatozoides: ≥ 15,0 milhões/ml 
Total de espermatozoide no ejaculado: ≥ 39,0 milhões/ml 
Distribuição de Motilidade: 
Motilidade: (método utilizado: ) 
Motilidade Progressiva: (método utilizado: ) 
Motilidade Não Progressiva: (método utilizado: ) 
Imotilidade: (método utilizado: ) 
Vitalidade (%) 
Formas Vivas: ≥ 58% 
Morfologia de Krugre 
Kruger: > 4% 
_____________________________________ 
Assinatura do responsável pelo laudo + CRBM: 
10. BIBLIOGRAFIA 
Associação Brasileira de Urologia, Rio de Janeiro, Brasil. 
URL: https://portaldaurologia.org.br/faq/como-interpretar-o-espermograma/ 
Acessado em 04 de Abril de 2020. 
Manual de laboratório da OMS para exame e processamento do sêmen humano – 5a ed. 
https://portaldaurologia.org.br/faq/como-interpretar-o-espermograma/