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Microbiologia II Contagem de Microrganismos Totais na Saliva Técnicas de diluição: Diminui a concentração de amostras com microrganismos incontáveis, possibilitando, assim, a observação de colônias. Exemplo de exame laboratorial com técnicas de diluição: Urinocultura Passo-a-passo da técnica: A cada diluição nos passos 2, 3, 4, 5, 6 e 7 deve ocorrer a troca da pipeta e a homogeneização do material no tubo; Nas semeaduras, nos passos 8, 9 e 10, foi feita a técnica de espalhamento “spread plate”, que consiste na semeadura com a alça de Drigarki, formando uma monocamada. Nas placas de petri, para a semeadura, foi utilizado um ágar nutriente, que possui o mínimo de nutrientes para o crescimento de bactérias em aerobiose. Em cada placa, numerada com “ -6, -5 e -4 ”, foram utilizados 0,1 ml das soluções dos tubos 10-6, 10-5 e 10-4, nessa ordem. Cálculo: UFC (Unidade formadora de colônia) = nº de colônias x FC (fator de correção) 1. Coleta de Saliva 1 ml 2. Diluição à 10-1 9 ml de solução salina 3. Diluição à 10-2 9 ml de solução salina 4. Diluição à 10-3 9 ml de solução salina 7. Diluição à 10-6 9 ml de solução salina 6. Diluição à 10-5 9 ml de solução salina 5. Diluição à 10-4 9 ml de solução salina 8. Semeadura por espalhamento 10-4 0,1 ml 9. Semeadura por espalhamento 10-5 0,1 ml 10. Semeadura por espalhamento 10-6 0,1 ml Diluição O fator de correção é um valor que, multiplicando pela quantidade de caldo semeada, dará 1 ml. Ex: 10-4 0,1ml 450 colônias 10-6 0,1 ml 5 colônias 10-5 0,1 ml 45 colônias Cálculo: UFC = 450 x 10 / 10-4 UFC = 4500 x 10+4 = 45 x 10+6 UFC/ml Cálculo: UFC = 5 x 10 / 10-6 UFC = 50 x 10+6 = 50 x 10=6 UFC/ml Cálculo: UFC = 45 x 10 / 10-5 UFC = 450 x 10+5 = 45 x 10+6 UFC/ml
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