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Biotecnologia e Prod. Alimentos Bruno M. Siqueira Nutricionista - CRN9:13734 Estrutura de ácidos nucléicos. • Estrutura do DNA: corresponde a uma molécula polimérica formada por unidades fundamentais de nucleotídeos. • Sua composição química: um açúcar, ácido fosfórico e uma base nitrogenada, responsável pela variabilidade da molécula de DNA. Estrutura de ácidos nucléicos. • Existem quatro bases nitrogenadas na molécula de DNA: ❖Duas purinas: adenina (A) e guanina (G) ❖Duas pirimidinas: timina (T) e citosina (C) Estrutura de ácidos nucléicos. • A ligação entre os nucleotídeos para formar a molécula de DNA acontece através dos grupamentos fosfato: ligação fosfodiéster. • Não existe um limite da quantidade de nucleotídeos que podem se ligar e formar a molécula de DNA, muito menos para a ordem de ligação, podendo ser encontrados os grupos nitrogenados A, G, C ou T em qualquer posição da cadeia. Estrutura de ácidos nucléicos. • Uma cadeia de DNA formada a partir da ligação de 10 nucleotídeos, avaliando as possíveis combinações das quatro bases nitrogenadas que compõem a molécula, temos: 410 = 1048576. • Nas células vivas, as fitas de DNA se organizam em pares, a partir da ligação de uma A com T e G com C, por meio de duas e três pontes de hidrogênio, respectivamente. Estrutura de ácidos nucléicos. • A molécula adquire uma estrutura tridimensional a partir de giros para a direita, conhecida como dupla hélice, onde as bases nitrogenadas encontram-se empilhadas no interior da hélice • O pareamento das bases é uma das características mais importantes da estrutura do DNA, pois fornece a sequência da molécula que é copiada durante a multiplicação celular. Estrutura de ácidos nucléicos. • Nas células eucariontes, o material genético encontra-se distribuído em poucos cromossomos, formados por uma longa molécula de DNA, que deve conter grande quantidade de genes, variando de milhares a milhões, dependendo da espécie. Estrutura de ácidos nucléicos. • Nos organismos procariontes são unicelulares, com ausência de organelas e material genético não delimitado por uma membrana em um núcleo, normalmente apresentam um único cromossomo, assim, novamente uma grande quantidade de genes está presente em uma única molécula de DNA. Estrutura de ácidos nucléicos. • Os óperons são característicos das bactérias e codificam uma série de proteínas diferentes que trabalham juntas em uma via metabólica integrada. Estrutura de ácidos nucléicos. • As famílias multigênicas: genes correlacionados, porém, genes distintos possuem sequências de nucleotídeos idênticas ou similares. • São classificados em: ❖ Famílias multigênicas simples: nas quais todos os genes são exatamente idênticos, e isso é preciso quando a proteína que ele codifica é requerida em grandes quantidades pela célula; ❖ Famílias multigênicas complexas: formadas por genes semelhantes, mas não iguais. Estrutura de ácidos nucléicos. • Na replicação do material genético, cada nucleotídeo da fita dupla de DNA atua como molde para a confecção de uma nova fita, gerando assim dois conjuntos de fitas complementares (A=T e C=G). Replicação do DNA • A replicação do DNA acontece em regiões limitadas da molécula que apresenta bases não pareadas, tendo início em uma posição denominada origem de replicação, e progride gradativamente ao longo da molécula. • A enzima DNA polimerase atua nesses segmentos sintetizando o novo polinucleotídeo, na região agora denominada forquilha de replicação. Replicação do DNA • O processo de replicação do DNA, pode ser divido em três etapas: 1. Separação da dupla hélice parental: os giros da dupla hélice são desfeitos pela ação de um conjunto de enzimas denominado DNA topoisomerases (tipo I-5’, tipo I-3’ e tipo II). A quebra das pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas ocorre pela ação da enzima DNAB helicase, e os filamentos são mantidos separados através das proteínas de ligação unifilamentar (SSBs). Como resultado tem-se a forquilha de replicação que fornece os moldes para a DNA polimerase III. Replicação do DNA 2. Filamentos de replicação contínua (leading) e descontínua (lagging): como visto, a DNA polimerase só atua no sentido 5’ > 3’, o que significa que os filamentos molde precisam ser lidos no sentido 3’ > 5’. Para uma das fitas, esse fato não constitui problema e a leitura é feita de forma contínua. Na outra fita, a cópia não pode ser feita de forma contínua e a replicação é feita em pedaços. Esses são denominados fragmentos de Okazaki e apresentam entre 100 e 1000 nucleotídeos de comprimento. Replicação do DNA 3. Iniciação e união dos fragmentos e Okazaki: a DNA polimerase III começa a agir a partir de uma pequena estrutura iniciadora de ribonucleicos colocados no início do segmento contínuo ou descontínuo por uma RNA polimerase. No filamento descontínuo, a DNA polimerase III pode sintetizar DNA apenas por determinada distância, até atingir o RNA iniciador da extremidade 5’. Nesse ponto, a enzima para e entra em ação uma DNA polimerase I, que continua o processo de replicação e ainda tem a capacidade de remover os filamentos iniciadores de ribonucleotídeos do fragmento adjacente, substituindo-o por desoxirribonucleotídeos. A união dos vários filamentos de Okazaki originados ocorre por ligação fosfodiéster catalisada pela DNA ligase. Replicação do DNA Replicação do DNA • Video Replicação do DNA: https://www.youtube.com/watch?v=T3RK7w0nfOc • Video 2: https://www.youtube.com/watch?v=TNKWgcFPHqw • Video 3: https://www.youtube.com/watch?v=34Jr2U7KwOE https://www.youtube.com/watch?v=T3RK7w0nfOc https://www.youtube.com/watch?v=TNKWgcFPHqw https://www.youtube.com/watch?v=34Jr2U7KwOE Replicação do DNA • A replicação é concluída com a revisão dos filamentos formados pelas próprias DNA polimerases, a fim de substituir um nucleotídeo incorreto, porém alguns erros podem persistir. Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas • Os principais são: rRNA ou ribossomal, tRNA ou transportador e mRNA, também denominado mensageiro. Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas • A síntese dessas moléculas é catalisada por uma enzima chamada RNA polimerase, que usa a fita de DNA como molde em um processo denominado transcrição. • A molécula de DNA abre-se em regiões específicas dos genes que contêm informação para a síntese desses polinucleotídeos. • O mRNA contém o código genético, ou seja, a informação para a síntese de proteínas Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas • As informações contidas nessa molécula são lidas dos ribossomos, grandes estruturas moleculares formadas pelo rRNA e cadeias polipeptídicas, em que o tRNA – que recebe esse nome por transportar os aminoácidos até os ribossomos, permitindo que eles se unam formando as proteínas – participa do processo conhecido como tradução. Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas • Ao códon AUG de um mRNA encaixa-se o anticódon UAC de um tRNA, que transporta o aminoácido metionina a ser adicionado à cadeia proteica. • Existem códons iniciadores, normalmente a primeira trinca AUG que o ribossomo escaneia, e finalizadores (UAA, UAG ou UGA), que o tRNA interpreta como pontos inicial e final para a síntese de proteínas. Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas Síntese de RNA, código genético e síntese de proteínas • Vídeo Síntese Proteica: https://www.youtube.com/watch?v=6nxRxoGME_I https://www.youtube.com/watch?v=6nxRxoGME_I Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • Algumas proteínas são requisitadas a todo tempo para manutenção e funcionamento das células, por isso seus genes são ativos ou expressos e passam por processo de transcrição e tradução continuamente, sendo chamados de genes de manutenção. Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • Muitos outros traduzem proteínas especializadas que são necessárias somentesob circunstâncias especiais e, por isso, não são produzidas de forma contínua. O fato de determinados genes se expressarem a todo tempo nas células, e outros não, faz parte de uma complexa organização celular denominada controle da expressão gênica, que, em outras palavras, significa controlar quando esses genes permanecem “ligados” e “desligados”. Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • O controle da expressão gênica ocorre de forma semelhante em procariotos e eucariotos e pode ser dependente de estímulos do meio, os quais fazem com que a célula altere suas capacidades bioquímicas. • Os estágios de desenvolvimento do organismo também influenciam na expressão de alguns genes, tendo na produção da enzima lactase um ótimo exemplo, por ser produzida nos recém-nascidos de mamíferos e apresentar redução da expressão com o desenvolvimento do organismo, em outras palavras, pela menor necessidade da ingestão de leite, podendo desenvolver, inclusive, a intolerância adquirida à lactose. Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • Isso pode acontecer por meio de alterações na transcrição, que podem ocorrer diretamente na identificação das regiões promotoras pela RNA polimerase, já que, com menos moléculas transcritas, haverá menos produtos gênicos, e o inverso também é verdadeiro. • A taxa de degradação do mRNA também parece ser alvo de controle, influenciando a expressão gênica de forma semelhante à quantidade de transcritos. Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • Além disso, alterações na estrutura dessa molécula levam à sua indisponibilidade para a tradução. • Um controle direto na tradução, sobre a quantidade de ribossomos disponíveis para traduzir os mRNA, também é mecanismo de controle adotado pela célula para regular a expressão gênica Controle da expressão gênica em procariotos e eucariotos • Com a conclusão do Projeto Genoma Humano e a identificação das regiões intergênicas (íntrons) sem função aparente nas células, acreditava-se que eram genes que perderam sua função no organismo no decorrer da evolução. • Hoje, sabe-se que essas regiões podem ser as responsáveis pelo controle da expressão gênica, como o gene I sobre o óperon Lac, principalmente porque contêm sítios de ligação para reconhecimento indireto das condições ambientais e, assim, podem ligar e desligar a maquinaria de produção de proteínas. Fixação! • O que é o DNA? • O que são Bases Nitrogenadas? • Como acontece a replicação do DNA? • O que é RNA? Site os principais. • O que é síntese Proteica? Obrigado! Bruno M. Siqueira Nutricionista - CRN9:13734
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