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ALTERAÇÕES MICROBIANAS EM ALIMENTOS Prof. Rodrigo Casquero Cunha 11-04-2018 DISCIPLINA DE TPOA INTRODUÇÃO Microrganismos presentes nos alimentos Benéficos Prejudiciais Deteriorantes Patogênicos INTRODUÇÃO Micro-organismos presentes nos alimentos Benéficos Prejudiciais Deteriorantes Patogênicos *Conceito para alimentos INTRODUÇÃO Micro-organismos presentes nos alimentos Benéficos Prejudiciais Deteriorantes Patogênicos INTRODUÇÃO Micro-organismos presentes nos alimentos Benéficos Prejudiciais Deteriorantes Patogênicos DTA ou DVA INTRODUÇÃO • Benéficos • Culturas iniciadoras starters • BAL Bactérias acido láticas • Padronizar produtos • Prejudiciais • Deteriorantes • Crescimento rápido / Alteram o alimento • Patogênicas • Crescimento lento / Não alteram o alimento • DTA INTRODUÇÃO • Benéficos • Culturas iniciadoras starters • BAL Bactérias acido láticas • Padronizar produtos • Prejudiciais • Deteriorantes • Crescimento rápido / Alteram o alimento • Patogênicas • Crescimento lento / Não alteram o alimento • DTA INTRODUÇÃO • Bactérias Patogênicas • Sua presença não é visível • Não causam alterações visíveis Infecção Intoxicação INTRODUÇÃO • Bactérias Patogênicas Infecção Intoxicação Salmonella spp. Listeria ETEC Clostridium botulinum Staphylococcus aureus Bacillus cereus (cepas) INTRODUÇÃO • Bactérias Patogênicas Infecção Intoxicação Salmonella spp. Listeria ETEC Clostridium botulinum Staphylococcus aureus Bacillus cereus (cepas) IMPORTÂNCIA DAS DTA • Saúde pública • EUA: 76 milhões de casos de DTA anualmente: 1/10 habitantes • 62 milhões: agentes desconhecidos • 325.000 hospitalizações e 5.000 mortes IMPORTÂNCIA DAS DTA • Saúde pública • EUA: 76 milhões de casos de DTA anualmente: 1/10 habitantes • 62 milhões: agentes desconhecidos • 325.000 hospitalizações e 5.000 mortes • BRASIL: média de 623 surtos com 12 mil casos de DTA notificados anualmente IMPORTÂNCIA DAS DTA • Saúde pública • EUA: 76 milhões de casos de DTA anualmente: 1/10 habitantes • 62 milhões: agentes desconhecidos • 325.000 hospitalizações e 5.000 mortes • BRASIL: média de 623 surtos com 12 mil casos de DTA notificados anualmente Qual a diferença entre surto e caso? IMPORTÂNCIA DAS DTA • Saúde pública • EUA: 76 milhões de casos de DTA anualmente: 1/10 habitantes • 62 milhões: agentes desconhecidos • 325.000 hospitalizações e 5.000 mortes • BRASIL: média de 623 surtos com 12 mil casos de DTA notificados anualmente Qual a diferença entre surto e caso? Botulismos Notificação obrigatória 1 caso = 1 surto IMPORTÂNCIA IMPORTÂNCIA • 2011 Listeriose mata 21 pessoas em 11 estados norte americano • Ready to eat pronto para o consumo • Todos de risco • Biofilme no lavador • Pisicrotrófica e anaeróbica facultativa IMPORTÂNCIA • 2011 Listeriose mata 21 pessoas em 11 estados norte americano • Ready to eat pronto para o consumo • Todos de risco • Biofilme no lavador • Pisicrotrofica e anaeróbica facultativa • Cruzamento de informações? IMPORTÂNCIA • 2014 mortes por derivados lácteos em diferentes Estados nos EUA • Como associar os casos? • 2014-2015 Listeriose: 35 doentes, 12 estados, 7 mortos • Quem causou? IMPORTÂNCIA • 2014 mortes por derivados lácteos em diferentes Estados nos EUA • Como associar os casos? • 2014-2015 Listeriose: 35 doentes, 12 estados, 7 mortos • Quem causou? Aw? IMPORTÂNCIA IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Recall de alimentos • CDC – 50 relatos de isolamentos de Salmonella Enteritidis por semana • Junho/julho 2010: 200 relatos de isolamento de S. Enteritidis por semana IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Recall de alimentos • CDC – 50 relatos de isolamentos de Salmonella Enteritidis por semana • Junho/julho 2010: 200 relatos de isolamento de S. Enteritidis por semana Em agosto de 2010 uma indústria americana recolheu 380 milhões de ovos IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Recall de alimentos • Brasil: 12 em 5 anos • Muito? IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Recall de alimentos • Brasil: 12 em 5 anos • EUA: 12 em 1 mês (fevereiro) IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Imagem da indústria • 2011 2 mulheres morrem de botulismo em SC IMPORTÂNCIA DAS DTA • Econômica • Imagem da indústria • 2011 Alemanha E. coli O104:H4 • Morte por falência renal • Pepino da Espanha? • Não! IMPORTÂNCIA DAS DTA IMPORTÂNCIA 1 caso notificado 6,2 casos avaliados por médicos, mas não notificados 23 doentes, mas sem necessidade de atenção médica 136 casos de doentes na comunidade Enfermidade branda ou assintomática Nº de surtos notificados X Nº de surtos totais Wleeler et al. (1999) Autolimitantes IMPORTÂNCIA Brasil 1999 – 2009 Fonte: Secretaria de vigilância sanitária Nº de surtos no Brasil por Estado IMPORTÂNCIA IMPORTÂNCIA INTERVALO IMPORTÂNCIA • Principais patógenos causadores de DTA: • E. coli, Salmonella spp., Shigella spp., Listeria monocytogenes, C. perfringens, Vibrio, Campylobacter spp., Chronobacter sakazakii, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Clostridium botulinum PRINCIPAIS PATÓGENOS • Alguns microrganismos preocupam pela frequência de surtos • Salmonella spp. • Staphylococcus aureus • Campylobacter spp. PRINCIPAIS PATÓGENOS • Outros pela severidade dos sintomas e da taxa de letalidade • C. botulinum • L. monocytogenes • EHEC PRINCIPAIS AGENTES ETIOLÓGICOS Total de surtos notificados PRINCIPAIS AGENTES ETIOLÓGICOS Total de surtos notificados Campilobacter? PRINCIPAIS AGENTES ETIOLÓGICOS Total de surtos notificados Técnicas detectam bactérias PRINCIPAIS AGENTES • Quem causou? • Vírus, toxinas... • Amostras mal coletadas • Alimentos mistos MAIORIA CAPACIDADE DE CAUSAR DOENÇA De todos os micro-organismos presentes que contaminam os alimentos, apenas poucas espécies têm a capacidade de causar doença CAPACIDADE DE CAUSAR DOENÇA A capacidade de causar doença depende principalmente de: Presença de fatores de virulência De todos os micro-organismos presentes que contaminam os alimentos, apenas poucas espécies têm a capacidade de causar doença Genes? CAPACIDADE DE CAUSAR DOENÇA A capacidade de causar doença depende principalmente de: Presença de fatores de virulência Ingestão de uma dose infecciosa mínima De todos os micro-organismos presentes que contaminam os alimentos, apenas poucas espécies têm a capacidade de causar doença 103 para suscetíveis 108-9 para não suscetíveis CAPACIDADE DE CAUSAR DOENÇA A capacidade de causar doença depende principalmente de: Presença de fatores de virulência Ingestão de uma dose infecciosa mínima Superação de obstáculos no processo infeccioso De todos os micro-organismos presentes que contaminam os alimentos, apenas poucas espécies têm a capacidade de causar doença Quais? CAPACIDADE DE CAUSAR DOENÇA A capacidade de causar doença depende principalmente de: Presença de fatores de virulência Ingestão de uma dose infecciosa mínima Superação de obstáculos no processo infeccioso De todos os micro-organismos presentes que contaminam os alimentos, apenas poucas espécies têm a capacidade de causar doença pH estomacal, microbiota, transito intestinal, sistema imune, inibidores,... CAPACIDADEDE CAUSAR DOENÇA Porcentagem de pessoas doentes (casos) em relação ao número de pessoas expostas (comensais), segundo diversos agentes etiológicos nos surtos de DTA notificados no Estado de São Paulo entre 2000 e 2008 Mayer e Silva,(2009) CAUSAS DE CONTAMINAÇÃO DOS ALIMENTOS Fatores % Recontaminação de alimentos processados 19 Manipuladores de alimentos 12 Contaminação cruzada 11 Alimentos crus contaminados 7 Limpeza inadequada dos equipamentos 7 Alimentos embalados contaminados 2 Fatores relacionados à contaminação Forsythe (2005) Fatores % Estocagem à temperatura ambiente 43 Preparação longe do lugar onde será servido 41 Resfriamento inadequado (Arroz) 32 Produção de alimento em excesso 22 Espera em ambiente e temperatura inadequados 12 Utilização de sobras 5 Descongelamento inadequado e estocagem subsequente inadequada (água morna) 4 Fatores relacionados à multiplicação microbiano CAUSAS DE CONTAMINAÇÃO DOS ALIMENTOS Fatores % Aquecimento impróprio 17 Cozimento inadequado 13 Fatores relacionados à sobrevivência microbiana CAUSAS DE CONTAMINAÇÃO DOS ALIMENTOS 72 °C dentro PRINCIPAIS ALIMENTOS ENVOLVIDOS -BRASIL Alimentos Nº de surtos % Ovo e produtos 928 22,8 Alimentos mistos 666 16,3 Carne vermelha e derivados 478 11,7 Sobremesas 438 10,7 Água 355 8,7 Leite e derivados 293 7,2 Outros 908 22,3 Total 4066 100 Alimentos mais frequentes (1999-2009) PRINCIPAIS ALIMENTOS ENVOLVIDOS -BRASIL Alimentos Nº de surtos % Ovo e produtos 928 22,8 Alimentos mistos 666 16,3 Carne vermelha e derivados 478 11,7 Sobremesas 438 10,7 Água 355 8,7 Leite e derivados 293 7,2 Outros 908 22,3 Total 4066 100 Alimentos mais frequentes (1999-2009) POA LOCAIS DE OCORRÊNCIA - BRASIL Locais Nº de surtos % Residência 2096 45,2 Restaurante 903 19,7 Instituições de ensino 489 10,7 Outros 417 9,1 Refeitórios 338 7,4 Festas 263 5,8 Unidades de saúde 75 1,6 Ambulantes 23 0,5 FATORES DE RISCO Humano ExposiçãoPatógeno Risco de DTA COMO DIMINUIR O RISCO? FATORES DE RISCO Humano ExposiçãoPatogeno Risco de DTA Diminuindo um fator COMO DIMINUIR O RISCO? FATORES DE RISCO Humano ExposiçãoPatogeno Risco de DTA COMO DIMINUIR O RISCO? Diminuindo dois fatores FATORES DE RISCO Humano ExposiçãoPatogeno Risco de DTA COMO DIMINUIR O RISCO? Diminuindo os fatores MULTIPLICAÇÃO MICROBIANA EM ALIMENTOS • A multiplicação depende de: • Fatores intrínsecos • Fatores extrínsecos Do alimento MULTIPLICAÇÃO MICROBIANA EM ALIMENTOS • A multiplicação depende de: • Fatores intrínsecos • Fatores extrínsecos MØ × Ambiente Qual MO se adapta melhor? MULTIPLICAÇÃO MICROBIANA EM ALIMENTOS • Parâmetros intrínsecos • Aa ou aw • pH • Potencial de oxidação-redução • Quantidade de nutrientes • Constituintes anti-microbianos FATORES INTRÍNSECOS • Atividade de água • Aa = P/Po • P pressão de vapor do alimento • Po pressão de vapor da água pura ATIVIDADE DE ÁGUA (aa) BACTÉRIAS X LEVEDURAS X MOFOS (COMPETIÇÃO) Classe de MØ Aw mínima Bactérias 0,91 Leveduras 0,88 Mofos ou bolores 0,80 Bactérias halofílicas 0,75 Mofos xerofílicos 0,65 Leveduras osmolíticas 0,60 vegetais BACTÉRIAS X LEVEDURAS X MOFOS (COMPETIÇÃO) Classe de MØ Aw mínima Bactérias 0,91 Leveduras 0,88 Mofos ou bolores 0,80 Bactérias halofílicas 0,75 Mofos xerofílicos 0,65 Leveduras osmolíticas 0,60 RELAÇÃO ENTRE AW E CONCENTRAÇÃO DE SAL C. perfringens S. aureus VALORES DE AW DE ALGUNS ALIMENTOS pH pH • Bactérias x leveduras e mofos pH • Bactérias x leveduras e mofos • Baixa acidez : pH > 4,5 • Ácidos: pH entre 4,0 e 4,5 • Muito ácidos: pH < 4,0 pH • Bactérias x leveduras e mofos • Baixa acidez : pH > 4,5 • Ácidos: pH entre 4,0 e 4,5 • Muito ácidos: pH < 4,0 C. botulinum pH • Bactérias x leveduras e mofos • Baixa acidez : pH > 4,5 • Ácidos: pH entre 4,0 e 4,5 • Muito ácidos: pH < 4,0 C. botulinum Esporula Anaeróbico estrito Neurotoxina Produz quando germina pH > 4,5 BOTULISMO Paralisia flácida BOTULISMO BOTULISMO • 21 casos de botulismo alimentar e um de botulismo de feridas • 31,8% letalidade • 71,4% causados por alimentos de origem suína: conservas caseiras, patê de fígado, e linguiça curada industrializada • 19,0% palmito BOTULISMO CLÁSSICO • Cinco crianças ingeriram uma quantidade de sardinha enlatada e mortadela em Coruripe. Após a ingestão, os menores passaram mal e foram internados no HGE. A menor Ingrid Maria dos Santos, 6 anos, não resistiu e faleceu, já João Victor dos Santos recebeu alta no dia 25 de abril. Os três irmãos de João Victor seguiram internados. Alimentar = intoxicação BOTULISMO INFANTIL Infecção Esporos pH de alguns alimentos POA pH > 4,5 O que fazer? POTENCIAL DE OXI-REDUÇÃO • Eh • Micro-organismos aeróbios (Eh+) • Micro-organismos anaeróbios (Eh-) • Micro-organismos anaeróbios facultativos (+ ou -) • VELOCIDADE DE CRESCIMENTO ??????? COMPOSIÇÃO QUÍMICA • Disponibilidade de nutrientes do alimento: • Água • Fonte de energia • Fonte de nitrogênio • Vitaminas e sais minerais • Complexo enzimático microbiano FATORES ANTIMICROBIANOS NATURAIS • CONDIMENTOS: • Eugenol: cravo, canela • Aldeído cinâmico: canela • Timol: orégano, sálvia • Alicina: alho • Leite: lactoferrina, aglutininas, sistema lactoperoxidase-tiocianato, lisozima • Ovos: lisozima, pH elevado da clara (9,0) FATORES EXTRÍNSECOS FATORES EXTRÍNSECOS FATORES EXTRÍNSECOS • Atmosfera envolvendo o alimento • O2 • CO2, N2 • Vácuo • Metabolismo • Tempo de geração (Pseudomonas x BAL) • Umidade relativa • Interações microbianas • podem ser desejáveis ou indesejáveis FATORES EXTRÍNSECOS OBRIGADO
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