Genética clínica

Prévia do material em texto

Ácidos nucleicos transportam as informações genéticas: 
DNA e RNA 
A maior parte da informação genética é armazenada 
no DNA NUCLEAR, e uma pequena parte no DNA 
MITOCONDRIAL. 
Nucleotídeos: unidade básica dos ácidos nucleicos 
(fosfato + açúcar(pentose) + base nitrogenada) 
Polinucleotídeo: ligação por fosfodiéster de 
nucleotídeos 
 
O DOGMA CENTRAL 
(1) Duplicação do DNA: faz uma cópia de si mesmo 
(2) Transcrição: síntese de RNA a partir de informações 
contidas no DNA *Transcrição reversa: síntese de DNA 
(3) Tradução: síntese de proteínas a partir de RNA 
 Expressão dos genes = informação do DNA 
disponível para as células através das proteínas. 
 
 
 
 
 
 
 
GENÉTICA CLÍNICA 
Nem tudo que é genético, é 
hereditário 
Doença genética NÃO TEM CURA, 
tem tratamento, prevenção, controle. 
 
Anomalias cromossômicas: 
Distúrbios Monogênicos: 
Distúrbios Multifatoriais: má formação congênita 
Distúrbios Multifatoriais: doenças do adulto 
Distúrbios Mitocondriais: 
Doenças genéticas 
História Familiar 
Riscos genéticos 
Diagnóstico Molecular 
Tratamento e controle de doenças 
BIOLOGIA MOLECULAR DO GENE 
H: desoxirribose = hidrogênio 
OH: ribose = hidroxila 
BASES NITROGENADAS 
PURINAS: Adenina e Guanina 
PIRIMIDINAS: Citosina, Timina e Uracila 
 
DNA Timina, Adenina, Citosina e Guanina: 
RNA: Uracila, Adenina, Citosina e Guanina. 
DNA -> pra ser hereditário, tem que ser replicável -> A fita de 
DNA se divide -> e cada fita vai servir de molde para a nova fita 
que será sintetizada -> o DNA ta no núcleo, e para a proteína 
ser expressa ela precisa sair-> e aí que o RNA atua -> vai levar 
para o citoplasma através do RNAm pelo processo de -> 
TRANSCRIÇÃO -> nesse processo vai ser formado o RNAm a 
partir da fita de DNA -> RNA mensageiro já formado sai do núcleo 
para o citoplasma, para levar aos ribossomos para o processo de 
TRADUÇÃO -> que é a síntese de proteína -> a cada trinca de 
base (códon) de RNA é um aminoácido -> forma uma proteína. 
 
 
 
Todas as células têm os mesmos genes, mas se 
expressam de formas diferentes. 
Códon: uma trinca de bases 
 
GENOMA E GENE 
GENE: sequência de bases nitrogenadas no DNA, são 
individualizados, entre um e outro há o dna intergênico 
GENOMA: conjunto de genes 
 *Cada gene expressa uma proteína 
 *A informação genética ta na sequência de bases 
nitrogenadas (genes). 
 genes sequências informações 
 
ESTRUTURA DO GENE 
 
 
 
 
 
 
Expressão Diferencial dos genes: genes em vários 
tecidos, mas só expressa onde há maior necessidade 
(comando genético) 
 *EX: gene a insulina tem nos neurônios, mas só 
expressa no pâncreas. 
 
Promotor: é uma sequência de BN reconhecida pela 
RNA polimeraze para a transcrição., não é transcrita, e 
reconhecida. 
Sequência Codificante: são interrompidas por genes 
descontínuos: éxons e íntrons 
Éxons: são os codificante 
Splicing processo de “filtração” para RNA já maduro 
(só com éxons), retirada dos íntrons. 
 
 
 
CÓDIGO GENÉTICO 
“Código genético degenerado” = códons diferentes com 
aminoácidos iguais = 64 códons e 20 aminoácidos. 
Códon NÃO EXPRESSA, ele determina e codifica. 
 
STOP CÓDON: UAA, UAG, UGA 
START CÓDON: AUG 
 *toda proteína tem metionina como 
primeiro aminoácido, a metionina só 
codifica com AUG, não segue o 
princípio do código degenerado 
 *AUG pode aparecer no meio da 
sequencia só para codificar metionina. 
 *triptofano só codifica com UGG 
PROMOTOR FINALIZADOR 
SEQUÊNCIA CODIFICANTE 
E NÃO CODIFICANTE 
(Sequências codificadoras
 
 
 
Mutação Gênica: alteração na sequência de bases de 
um gene, variando de um único nucleotídeo até vários 
nucleotídeos (arbitrário) 
Polimorfismo Genético: fonte de variação genética 
maior que 1% na população 
Mutação Espontânea: sem influência externa, por 
erros na replicação do DNA ou por erros nos 
processos de reparo do DNA, pareamento errado. 
TIPOS DE MUTAÇÕES EM GENES 
• Mutação de Ponto: Substitui uma base e altera 
só um códon, não altera o número de bases 
-Transição: purina purina pirimidina pirimidina 
-Transversão: purina pirimidina 
 
• Mutação de Inserção: Bases são adicionadas, 
modificando a ordem da leitura da molécula 
 
• Mutação de Deleção: Bases são retiradas, 
modificando a ordem da leitura da molécula. 
INDEL: Alteram a matriz de leitura e podem mudar 
muitos códons. 
• Mutação de Repetições Expandidas de 
Trinucleotídeos: o número de cópias de 
trinucleotídeos aumenta em número. 
 
• Mutação Silenciosa (sinônima): Há mudança em 
um códon, mas não altera o aminoácido, não 
tem prejuízos. 
 
• Mutação Neutra: Há mudança no códon, com 
alteração de aminoácido, porém não altera a 
função da proteína. (amn tem propriedades 
físico-quiímicas semelhantes ao original, ou a 
substituição foi em uma região não 
importante), não tem doença 
 
• Mutação de Sentido Trocado: Muda o códon 
e o aminoácido, que vai ter propriedades 
fisicoquímicas diferentes do original., tem 
doença 
• Mutação Sem Sentido: : Troca de um códon 
que codifica um aminoácido por um stop 
códon (UAG, UAA, UGA)., é muito grave 
 
 
 
MUTAÇÕES NO PROMOTOR 
Ativo complexo de iniciação. O produto gênico será 
normal, porém em quantidades erradas ou até 
inexistente, ou produzido no tecido errado. Podem 
suprimir, reduzir ou aumentar a transcrição de um 
gene. NÃO ACARRETA DISFUNÇÃO CELULAR 
Teste: Transfecção transitória 
 
MUTAÇÕES EM SEQUÊNCIAS 
CODIFICADORAS 
Os elementos reguladores podem estar localizados em 
qualquer direção da sequencia codificadora. Podem 
afetar a função da proteínas e expressão de um gene. 
 
ORIGEM DAS MUTAÇÕES 
GENÔMICAS: má segregação de um par 
cromossômico durante a meiose, produzindo 
aneuploidia cromossômica, são as mutações mais 
comuns, e comuns em células cancerosas. 
CROMOSSÔMICAS: ocorrem com menos frequência 
que as genômicas. 
GÊNICAS: substituições de pares de bases, inserções, 
deleções, originárias por erro na replicação do DNA, ou 
por falha na correção de danos. 
 
 
MUTAÇÕES 
Mutação Somática: ocorrem por acaso em um subgrupo de 
células de apenas alguns tecidos resultando em mosaicismo 
somático, não são transmitidas para a geração seguinte., base do 
câncer 
Mutação Germinativa: mutações no DNA de células que irão 
popular a linhagem germinativa, é uma mutação herdável que 
pode ser passada adiante., importante hereditariedade 
Mutágeno: agente físicos ou químicos que aumentam a 
frequência de mutações.: mutação induzida 
 
 
NOMECLATURA DAS MUTAÇÕES 
• c.DNA: mutação na sequência codificante 
(éxons) 
• c.G1444>A: na posição 1444 G foi substituída 
por A 
• c.351delAT: na posição 351 a base AT foi 
deletada 
• p. F508: na posição 508 da proteína, houve 
deleção do amino F 
• c.1277-127insTATC: a seq. TATC foi inserida 
• c.106insT: houve inserção de T na posição 106 
• GLU6VAL(E6V): glutamato foi trocado pela 
valina na posição 6 da proteína *mutação de 
sentido trocado 
• GLN39C (Q39X): na posição 39 a glutamina foi 
trocada por um stop códon, ficando então 38 
amino *mutação sem sentido 
 
MÉTODOS DIAGNÓSTICOS 
Tudo começa com a PCR, e sempre precisa-se de pelo 
menos 2 métodos diagnósticos. 
 
SONDAS NUCLEOTÍDEOAS: indicada para mutações 
conhecidas, faz-se com o produto da PCR. Detecta 
mutações pontuais e pequenas deleções e inserções, 
existe uma sonda para cada mutação. 
 - Se a sonda sem mutação reconhece: não tem 
mutação 
 - Se a sonda sem mutação não reconhece: tem 
mutação 
 - Se a sonda mutante reconhece: tem mutação 
 - Se a sonda mutante não reconhece: não tem 
mutação 
 
PCR/RFLP: é para mutações conhecidas e pontuais, 
são múltiplas cópias de uma sequência, o gene alvo é 
ampliado via PCR e clivado com enzimas de 
restrição(ECO-R1), essas enzimas “cortam” o DNA em 
certas sequências de base que elas reconhecem, 
reconheceuo sítio: corta, ai se tem 2 fragmentos de 
DNA do PCR. 
 
 
 
 - Quando o fragmento não é cortado: não reconheceu 
o sítio porque: tem mutação 
 
SEQUENCIAMENTO: compara a sequência do paciente 
com uma sequência de referência, através do 
alinhamento dessas sequências, a técnica baseia-se em 
fluorescência de bases nitrogenadas: eletroferograma, 
é uma validação ouro, serve para todos os tipos de 
mutações.