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Metabolismo Bacteriano Características básicas das bactérias o As bactérias se dividem por fissão binária: uma bactéria se divide em uma, duas em quatro, quatro em oito e etc... o Esse tipo de crescimento faz que tenha um aumento muito rápido da comunidade bacteriana. o 1 bactéria se divide em duas em 20 minutos. Com 10 hora já tem um bilhão de células. o Não são todas as bactérias, algumas demoram mais para crescer. Composição química de uma célula bacteriana São compostas 70% de água, os outros 30% são vários tipos de componentes. Quais são esses componentes? o Proteína 15%; o RNA 6% (importante para produção de proteína); o Íons e pequenas moléculas 4%; o Polissacarídeos 2%; o Fosfolipídios 2% (formam a membrana celular); o DNA 1%. - As células procarióticas são compostas por água, macromoléculas, outros compostos orgânicos e íons. Peso seco é tudo que está presente na bactéria sem água. Dentro desse peso seco (x) Macromoléculas = 96 - Proteínas = 55 - Polissacarídeos = 5 - Lipídeos = 9,1 - DNA = 3.1 - RNA = 20.5 Monômeros totais = 3.5 - Aminoácidos = 0.5 - Açúcares = 2 - Nucleotídeos = 0,5 Íons inorgânicos = 1 Total: 100 Reações Químicas Metabolismo é o conjunto de todas as reações químicas que acontecem dentro de um organismo. - Anabolismo = o conjunto de processos biossintéticos que requerem energia e que forma os componentes celulares a partir de moléculas menores: os nutrientes. - Catabolismo = conjunto de processos de degradação de moléculas e nutrientes que liberam energia. As reações catabólicas fornecem energia para as reações anabólicas ou biossintéticos. ❖ Biossíntese é a formação de algum componente celular. Visão geral do metabolismo celular Quebra dos substratos em produtos menores e a partir dessa quebra tem a formação de energia. Para a bactéria crescer ela precisa de energia, substratos, biossíntese. Reações químicas Anabolismo: acoplamento das reações anabólicas e catabólicas é obtido através do ATP. - Moléculas complexas como o amido, proteínas e lipídeos tem que ser quebradas Nutrição dos microrganismos Os microrganismos necessitam de um ambiente propício com todos os constituintes físicos e químicos necessários para seu crescimento. o As substâncias ou elementos retirados do ambiente são utilizados como blocos para a construção da célula. MICRONUTRIENTES o Nutrientes = MICRONUTRIENTES FATORES DE CRESCIMENTO MACRONUTRIENTES FUNÇÕES Carbono (compostos orgânicos, CO2) Constituintes de carboidratos, lipídeos, proteínas e ácidos nucleico. Oxigênio (O2, H2O, compostos orgânicos) Nitrogênio (NH4, NO3, N2, comp. orgânicos) Hidrogênio (H2, H2O, compostos orgânicos) Fósforo (PO4) Enxofre (SO4, HS, S, compostos orgânicos) Potássio (K+) Atividade enzimática, cofator para várias enzimas. Cálcio (Ca2+) Cofator de enzimas, componente de endósporo. Magnésio (Mg2+) Cofator de enzimas, estabiliza ribossomos e membranas. Ferro (Fe2+/Fe3+) Constituição de citocromos e proteínas ferro enxofre (transportadores de elétrons), cofator de enzimas. O que são macronutrientes: são nutrientes que as bactérias precisam em maior quantidade. Compostos orgânicos: são constituídos por carbono, hidrogênio e oxigênio. CHONPS: carbono, hidrogênio, oxigênio, nitrogênio, fósforo e enxofre = os principais macronutrientes. CHONPS: constituintes de carboidratos, lipídeos, proteínas e ácidos nucleicos, O que é cofator enzimático: eles aceleram a reação metabólica. O que são micronutrientes: nutrientes em que as bactérias necessitam em menor quantidade. Trans carboxilase: enzimas. Micronutrientes: cofatores enzimáticos. MICRONUTRIENTES FUNÇÕES Cobalto (Co) Vitamina B12: transcarboxilase (bactérias propiónicas). Cobre (Cu) Citocromo c oxidase; alguns superóxidos dismutases. Manganês (Mn) Ativador de muitas enzimas; presente em certos superóxidos dismutases. Molibdénio (Mo) Presente em várias enzimas que contém flavina; presente no nitrato redutase, sulfito oxidases e desidrogenases. Níquel (Ni) Presente na maior parte das hidrogenases; presente na urease. Selênio (Se) Presente no aminoácido selenocisteína; presente em algumas hidrogenases. Tungsténio (W) Presente em algumas desidrogenases fórmicas e oxotransferases de hipertermófilas. Vanádio (V) Presente na nitrogenase do vanádio e bromoperoxidase. Zinco (Zn) Presente na anidrase carbônica, álcool desidrogenase, ARN e ADN polimerase e muitas proteínas de ligação ADN. Fatores de crescimento Compostos orgânicos requeridos em pequenas quantidades e somente por algumas bactérias que não podem sintetizá-los. o Muitos microrganismos são capazes de sintetizá-los; o Esses compostos entram na composição das células ou de precursores dos constituintes celulares; o Três grupos principais: Aminoácidos, Purinas e pirimidinas e vitaminas; o Ácidos graxos insaturados, colesterol, poliaminas e colinas. VITAMINA FUNÇÃO MICRORGANISMOS Biotina Função de CO2 Metabolismo do carbono Leuconostoc mesenteroides (B) S. cerevisae (F) Vitamina B12 Rearranjos moleculares Metabolismo do carbono (transporte de grupos metilo) Lactobacilos sp. (B) Euglema gracilis (A) A. castellanii (P) Ácido Fólico Metabolismo do carbono Euterococcus faecalis (B) Ácido pantoténico Percursor de Coenzima A (transporte de grupos acilo) Proteus inorganii (B) Paramecnam sp. (P) Vitamina B Metabolismo aminoácidos (Ex: transaminação) Lactobacilos sp. (B) T. pyriformis (P) Ácido nicotínico Percursor do NAD e NADP (transporta electrões e H+) Brucella abortus (B) Blastoclaudia pringsheimi (F) Vitamina B2 Percursor do FAD e FMN (transporta electrões e H+) Caulobacter vibroides (B) T. pyriformis (P) Vitamina B1 Transferência de grupos aldeído (Ex: descarboxilação do piruvato) Bacilos anthracis (B) Processo de nutrição dos microrganismos a) Gram positiva: sintetizam exoenzimas que são liberadas no meio, clivando os nutrientes, que são captados por proteínas transportadoras. b) Gram negativa: apresentam grande número de porinas associadas à membrana externa que permitem a passagem de moléculas hidrofílicas, de baixa massa molecular. No espaço periplasmático são encontrados proteases, fosfatases, lipases, nucleases e enzimas de degradação. O que são porinas? É uma proteína de membrana para transporte de nutrientes. As gram positivas, por ter uma membrana só, a ação vai ser fora da célula. Fontes de carbono e energia para o crescimento bacteriano Heterotróficos = microrganismos que utilizam composto orgânico como fonte de carbono. Ex: carboidratos. Autotróficos = microrganismos que utilizam composto inorgânico como fonte de carbono. Ex: CO2 Fototróficos = microrganismos que utilizam a luz como fonte de energia. Quimiotróficos = microrganismos que utilizam compostos químicos (orgânicos ou inorgânicos) como fonte de energia. Conceitos básicos: - Glicólise = oxidação da glicose a ácido pirúvico com produção de ATP e energia contida em NADH. - Ciclo de Krebs = oxidação de um derivado do ácido pirúvico (acetilcoenzima) a dióxido de carbono, com produção de ATP, energia contida em NADH e FADH. - Cadeia de transportes de elétrons = NADH e FADH, são oxidados. Cascata de reações de oxirredução envolvendo uma série de transportadores de elétrons. ❖ A energia dessas reações é utilizada para gerar grande quantidade de ATP. ❖ Os elétrons transportados pela cadeia são fornecidos por NADH e FADH, que foram reduzidas durante a glicólise e ciclo de Krebs. ❖ As reações de oxirredução envolvendo uma série de transportadores de elétrons geram energia-síntese de ATP. Respiração - Respiraçãoaeróbia: utiliza O2 - Respiração anaeróbia: não utiliza O2 Respiração anaeróbia: ❖ Processo no qual os compostos orgânicos são completamente degradados, e uma molécula diferente do O2 é o aceptor final dos elétrons. (Carboidratos, sulfato, nitrato e fumarato); ❖ A quantidade de ATP gerada na respiração anaeróbia varia de acordo com o microrganismo e a via; ❖ Tem rendimento energético menor do que a respiração aeróbia; ❖ Aceptor final não é elétron; ❖ Receptor inorgânico diferente do O2. (Ex: SO4, NO3, CO2, S). Respiração aeróbia: ❖ Compostos orgânicos são completamente degradados; ❖ O2 é o aceptor final dos elétrons. Fermentação ❖ Processo no qual os compostos orgânicos são parcialmente degradados; ❖ Libera energia de açúcares (2 ATP) ou moléculas orgânicas; ❖ Não requer oxigênio (mas pode ocorrer na presença deste); ❖ Não requer uso do ciclo de Krebs ou cadeia de transporte de elétrons; ❖ Utiliza uma molécula orgânica como aceptor final de elétrons. Produtos finais de várias fermentações microbianas a partir do piruvato Organismo Produtos finais da fermentação Streptococcus, Lactobacillus, Bacillus Ácido láctico Saccharomyces Etanol e CO2 Propionibacterium Ác. propiônico, ác. acético, CO2, H2 Clostridium Ác. butírico, butanol, acetona, álcool isopropílico e CO2 Escherichia, Salmonella Etanol, ác. láctico, ác succínico, ác. acético, CO2, H2 Enterobacter Etanol, ácido láctico, ácido fórmico, butanodiol, acetoína, CO2, H2 RESPIRAÇÃO FERMENTAÇÃO Lenta Rápida Mais eficiente – produz 36ATP Eficiente – 2ATP Os compostos são totalmente degradados Os compostos são parcialmente degradados Aceptor final = aeróbia 02 anaeróbia inorgânica ≠ 02 Aceptor final = molécula orgânica Não tem formação de produto final Não usa oxigênio, mas pode acontecer na presença deste Crescimento microbiano - Refere-se ao aumento do número e não do tamanho das células; - Os microrganismos em crescimento estão na verdade, aumentando o seu número e se acumulando em colônias. - COLÔNIAS => grupos de células => visualização sem utilização de microscópio. Condições básicas para o crescimento microbiano Químicos Físico-químicos (ambientais) Água Temperatura Macronutrientes pH Micronutrientes Oxigênio Fatores de crescimento Pressão osmótica Temperatura Efeito da temperatura no crescimento microbiano: ❖ Cada tipo de bactéria apresenta uma temperatura ótima de crescimento; ❖ Acima do limite, ocorre desnaturação proteica e consequente morte celular; ❖ Temperaturas inferiores levam a uma desaceleração das atividades metabólicas. Grupos bacterianos Mesófilas: crescem em temperatura ambiente, de animais de sangue quente. Fazem acidificação do leite. o Entre 8º e 48ºC Psicrotróficas: são bactérias que crescem em temperaturas de 4º a 5º C. Não degradam lactose. o Geralmente em leites Termófilas: crescem acima da temperatura ambiente. o Entre 40º a 70º Hipertermófilas: crescem em temperaturas super altas. De 60º a 106º o São as que crescem dentro de vulcões. pH A maioria das bactérias cresce melhor dentro de variações pequenas de pH, sempre perto da neutralidade, entre pH 6,5 e 7,5. o Quanto maior é o pH, menor é a quantidade de hidrogênio; o Quanto menor o pH, menor quantidade de hidrogênio. Acidófilas: as que tem crescimento ótimo na acidez; Neutrófilas: bactérias que tem crescimento ótimo entre 5,4 e 8,5 em ambiente neutro; Alcalinófilas: as que tem crescimento básico na alcalino-básico. Oxigênio Componente universal das células. Aeróbios estritos: só crescem/sobrevivem em ambientes com oxigênio. Anaeróbios estritos: só crescem se não tiver oxigênio. Aeróbio facultativo: cresce tanto com oxigênio, quanto sem. Micro aerófilo: só consegue sobreviver se houver pouco oxigênio. Se houver mais, ele morre. Anaeróbio aerotolerante: a quantidade de oxigênio para eles sobreviverem é de 2-8%, em pequena quantidade. Não toleram as pressões normais de oxigênio atmosférico. Grupo Relação ao O2 Tipo de metabolismo Aeróbios Utilizam O2 Obrigatórios Requerido Respiração aeróbica Facultativos Não-requerido, mas o crescimento é melhor na presença de O2 Respirações aeróbica e anaeróbica e fermentação. Microaerófilos Requerido, mas a níveis mais baixos que o atmosférico Respiração aeróbica Anaeróbios Não utilizam O2 Aerotolerantes Não-requerido (crescimento não influenciado pela presença de O2) Fermentação Obrigatórios Perigoso ou letal Fermentação ou respiração anaeróbica Bactérias e aeróbias e facultativas Ação das enzimas superóxido dismutase, calatase e peroxidase. Estas enzimas eliminam radicais toxicos do O2 que são inevitavelmente gerados em sistemas vivos na presença de O2. A distribuição destas enzimas nas células determina a capaciade destas celulas existentes na presença de O2. Aeróbias e facultativas Anaeróbias estritas
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