Modificações de proteínas

Prévia do material em texto

1 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Um passo importante pra produção de proteínas é a expressão 
genica, principal controle quando uma célula quer ter uma 
determinada proteína; primeiro o gene sera transcrito, depois 
traduzido; porem essa proteína uma vez pronta no citoplasma da 
célula terá uma meia vida de duração, então primeiro ela deve ser 
corretamente enovelada, adquirindo sua estrutura tridimensional 
pra que exerça sua função e tb terá um tempo de duração então 
tb sera degradada, algumas prot são rapidamente degradadas na 
célula e duram poucos minutos e outras podem durar meses ou 
anos 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Proteínas prontas e agora? 
● Varias proteínas depois de serem liberadas pelo ribossomo precisam de alterações pra que efetivamente elas sejam 
utilizadas na célula ou fora da célula 
● Uma primeira etapa é pensar no enovelamento das proteínas, muitas tem de fazer interações que tem a ver com 
formação de estrutura secundaria, alfa hélice, folha beta pregueada, interações que modelam pra que elas cheguem na 
sua estrutura terciaria e ainda muitas vezes sua associação com outras subunidades ou com cofatores levando a sua 
estrutura quartenaria 
● Muitas proteínas sofrem modificações pos traducionais, então elas vao sofrer ligações covalentes como fosforilação e 
depois de fosforiladas elas podem ser desfosforiladas, isso modula sua atividade; interação com cofatores como ions, 
vitaminas, ... ou com outras subunidades proteicas ai sim ela estará pronta pra exercer sua função 
● O quanto de proteína que é necessário pra uma célula depende de quanto RNA foi expresso pra que ela fosse traduzida, 
quanto tempo é a meia vida desse RNA m, quanto tempo dura ela na célula 
● Um fator importante é o controle da degradação das proteínas em aa e isso então vai regular quanto de proteína de um 
tipo tem numa célula num dado momento, isso pode ser extremamente variável 
● Algumas proteínas têm suas atividades moduladas mt rapidamente, como as enzimas, que podem ser ativadas e 
desativadas, algumas aparecem momentaneamente pq induzem por exemplo a um estado de diferenciação celular e 
rapidamente são degradadas, portanto são vários fatores que interferem na meia vida da proteína 
Enovelamento 
● Muitas proteínas assim que são sintetizadas pelos ribossomos podem ser enoveladas sozinhas e ficarem na sua 
conformação nativa, que é sua conformação natural, correta, ou podem acabar fazendo um enovelamento incorreto, se 
a proteína esta em um enovelamento incorreto ou é incapaz de adquirir seu enovelamento correto uma família de 
proteínas chamadas de chaperonas (proteínas de choque térmico/HSP) auxiliam no enovelamento correto das proteínas 
2 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Algumas HSPs são citosolicas, a gnt tem desse tipo de proteína 
no interior do reticulo endoplasmático, dentro de mitocôndrias e são 
extremamente importantes pra que proteínas adquiram seu 
enovelamento correto 
● Na imagem ao lado mostra a proteína chaperona se juntadno a proteína enovelada incorretamente e a ajudando a adquirir 
seu enovelamento correto e na acima mostra a proteína com enovelamento incorreto entrando em uma prot chaperona 
que se move (que depende de ATP) e ajuda a proteína a adquirir seu enovelamento correto 
● Essas proteínas foram encontradas muito aumentadas em situações de aumento de temperatura em células cultivadas, 
pq o aumento de temperatura gera desnaturação proteica então essas proteínas passarão a ser mais produzidas e mais 
expressas pra socorrer esse estado de desnaturação de boa parte das proteínas, por isso elas foram denominadas HSPs; 
no entanto elas tem o papel importante do 
enovelamento mesmo em temperaturas normais 
● O aumento da expressão dos genes que 
codificam as prots chaperones vem de um 
acumulo de proteínas desnaturadas ou mal 
enoveladas na própria célula 
● Na imagem ao lado é possível perceber a 
região do lumem do ret endop e a face citosolica 
da organela e que se proteínas estão mal 
enoveladas no interior do ret elas sinalizam pra 
proteínas citosolicas que vao ate o nucleo modular 
a expressão genica das chaperonas 
 
 
 
Proteólise 
● Degradação de proteínas 
● Proteases são enzimas que clivam proteínas em geral e existe um sistema onde muitas proteases estão unidas e formam 
um cilindro em que ocorrera a degradação no interior desse cilindro, esse conjunto de proteases e esse local da célula é 
chamado de proteassomo e esta presente tanto no citosol como no interior do nucleo e os sítios ativos dessas proteases 
3 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
(pontos vermelhos da imagem) ficam internamente pra 
essa câmara e proteínas que entrarem nesse cilindro serão 
degradadas, mas a proteína precisa ser sinalizada pra ser 
degradada via proteassomo 
● Contem um cilindro central formado por proteases 
com seus sítios ativos voltados para a face interna de uma 
câmara 
 
 
 
 
 
 
 
 
● Pra ser degradada nesse sistema de 
proteassomo as proteínas devem ser ligadas 
a varias proteínas pequenas chamadas de 
ubiquitinas (pequenas proteínas transferidas 
por enzimas em proteínas que deverão ser 
degradadas) ; em vermelho na imagem 
acima, na parte superior da figura é possível 
ver 4 ubiquitinas (cadeia de poliubiquitina) que 
se ligam a aa expostos de proteínas que 
devem ser degradadas via proteassomo e ai 
então como ela essa ubiquitinada ou poliubiquitinada essa proteína entra nesse cilindro central onde estão as proteases e 
pra isso ela deve ser esticada/desenovelada, como é possível ver na segunda parte da figura e ai as proteinases entram 
em ação e clivam as ligações peptídicas entre os aa degradando então a proteína em questão, a ubiquitina é reciclada e 
pode ser posteriormente pode ser transferidas pra novas proteínas que serão marcadas pra serem degradadas 
● Então as proteínas que são degradadas por proteassomos são destinadas a terem curta duração, então tem alguns aa 
que as identifica como marcadas pra degradação, então essas proteínas são traduzidas/sintetizadas, adquirem seu 
enovelamento, mas por exporem certos aa elas atraem/tem sítios pra ser ubiquitinada, então são proteínas com meia 
vida curta; além disso proteínas que foram danificadas ou que foram enoveladas incorretamente ou desnaturadas por 
algum motivo também podem ser reconhecidas por enzimas que vao fazer a poliubiquitinação e serão degradadas pelos 
proteassosmos 
 
Endereçamento de proteínas 
● Pra onde as proteínas vao 
● Os ribossomos estão presentes no citoplasma, livres no citosol ou aderidos temporariamente na superfície do reticulo 
endoplasmático rugoso, mas quando a gnt pensa em proteína elas estão em todos os compartimentos celulares e muitas 
delas devem ser secretadas pelas células onde foram produzidas 
● Organelas que é importante lembrar: citosol, mitocôndrias, ret endop, nucleo, golgi, peroxissomos, lisossomos, endossomos 
● Os compartimentos são revestidos de membranas e isolam ambientes aquosos no interior da organela em relação ao 
liquido do citosol, eles acabam sendo divididos em 4 grupos 
● Nucleo e citosol que tem uma comunicação intensa através de grandes poros nucleares complexos 
● Organelas envolvidas em vias secretoras e endociticas, incluem ret endop (liso e rugoso), ap de golgi, os endossomos, os 
lisossomos e vesículas que são transportardas entre essas organelas e os peroxissomos 
4 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Mitocôndrias, especializadas na produção e ATP 
● Plastídios (cloroplasto por ex) SOMENTE PRA PLANTAS!! 
● As proteínas são todas sintetizadas pelo ribossomo no citosol, elas são 
distribuídas para os seus compartimentos específicos da célula por 3 
mecanismos principais: 
1. Através dos poros nucleares, que são poros complexos, que permitem 
que as proteínas entrem no nucleo 
2. Um segundo tipo que envolve cloroplastos, mitocôndrias e 
peroxissomos, as proteínas vao atravessar as membranas de revestimento 
dessas organelas 
3. um terceiro tipo que na vdd pra entrarno reticulo o transporte é feito 
através das membranas como ocorre nas mitocôndrias por exemplo, mas a 
partir do reticulo essas proteínas vao ser transportadas através de vesículas, 
primeiro para o complexo de golgi e depois uma movimentação dessas 
vesículas do golgi pro reticulo, do golgi pra ser lisossomo, do golgi pra 
membrana plasmática ou ate mesmo pra secreção 
 
 
 
 
 
 
 
Transporte controlado por poros 
● Na foto da esquerda é possível ver 
um complexo de poro nuclear que 
comunica o citosol com o interior do 
nucleo e tb as duas membranas que 
compõe, junto de proteínas do 
citoesqueleto o envelope nuclear 
● Na foto da direita é possível ver a 
estrutura de cada poro e é através desses poros que ocorre o trânsito de moléculas do nucleo pro citosol e vice versa 
● RNAs vao sair, ribossomos parcialmente montados vao sair e varias proteínas devem entrar 
 
Translocação de proteínas através de membrana 
● Também tem duas membranas, uma 
externa e uma interna, que formam as 
cristas mitocondriais 
● A proteína vai ser translocada através 
de proteínas translocadoras de membrana 
que permitem a passagem da proteína 
pro interior da mitocôndria, porem a 
proteína tem de ser desenovelada para 
conseguir ser internalizada pela organela 
de destino 
 
5 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
Transporte vesicular 
● Vesículas/esferas levam conteúdo de um compartimento pra outro 
● Na figura esta representado o ret endop com varias proteínas tanto na sua superfície 
como proteínas solúveis no interior da organela e através do brotamento de vesículas e o 
desprendimento delas no citoplasma carregando então determinado conteúdo essa vesícula 
é capaz de se fundir em um alvo, assim seu conteúdo e superfície passam a fazer parte da 
organela de destino 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Como a proteína sabe que tem que ir pra tal lugar? 
● Proteínas no interior do reticulo sempre tem uma certa 
sequencia de aa (representado em vermelho na imagem 
ao lado) em comum 
● A imagem ao lado representa um experimento na qual 
por meio de engenharia genética tiraram a sequencia sinal 
da proteína azul que fica no re e colocaram ela em uma 
proteína citosolica (verde) e ai viram que a verde e a azul 
mudaram de lugar, percebendo que essa sequencia de aa 
esta relacionada ao local de onde a proteína deve ir 
● A sequencia sinal é a responsável por direcionar a 
proteína pro seu compartimento adequado, se a proteína 
não tiver é uma proteína citosolica e ficara no citosol; cada 
compartimento possui uma sequencia sinal especifica 
● Na parte superior da figura em verde ribossomos livres 
e esse filamento azul é uma RNA m codificando proteínas 
que não exibem sequencia sinal pro retículo 
endoplasmático, portanto esses ribossomos farão varias 
moléculas de proteínas e essas proteínas como não tem 
peptídeo sinal pra reticulo ficarão no citosol, mas se a célula 
expressar um RNA m que no inicio normalmente da sua 
síntese proteica do processo de tradução do RNA, os aa 
comporem uma sequencia sinal que a gnt ve na figura de 
baixo em vermelho isso da uma pausa do processo de 
tradução e o ribossomo migra pra superfície do retículo 
endoplasmático, pq existe na membrana do reticulo uma 
proteína que esta em azul na figura ao lado que é 
translocadora que tem afinidade por reconhecer a 
sequência sinal, ai então a síntese proteica continua na 
superfície do retículo endoplasmático pelo ribossomo 
6 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Quando o ribossomo esta fazendo a tradução na 
superfície do retículo endoplasmatico, a translocação da 
proteína para o interior desse compartimento é 
cotraducional, então ela ta sendo translocada pro reticulo 
enquanto esta sendo traduzida, não tinha finalizado a 
tradução, a tradução ta ocorrendo enquanto ela ta sendo 
translocada 
● Na figura da direita a translocação é pos traducional, ou 
seja o ribossomo livre fez a síntese proteica, mas o 
peptídeo sinal é diferente, embora seja pro retículo 
endoplasmatico, essa proteína vai, após a tradução ter 
acabado, vai ser translocada para o reticulo; dessa mesma 
forma é o endereçamento das proteínas para mitocôndrias 
e tb boa parte das proteínas que vao pros peroxissomos 
Resumindo 
● As proteínas podem mover-se entre compartimentos por diferentes maneiras 
● A síntese de TODAS as proteínas começa em ribossomos no citosol e depois são translocadas, tem uma exceção, que 
alguns genes, que são genes do DNA mitocondrial, são expressos no interior da mitocôndria, então transcritos e traduzidos 
pelos ribossomos no interior das mitocôndrias, mas o DNA mitocondrial contem pouquíssimos genes 
● As proteínas que são produzidas pelo citosol tem o destino marcado pela sua sequencia de aa, de acordo com a sua 
sequencia de aa, existem sinais de endereçamento que vao fazer com que essa proteína chegue ao seu local especifico; 
se as proteínas não exibem sinal de endereçamento pra local nenhum elas são proteínas citosolicas 
● Se elas forem pro reticulo, depois do retículo elas serão dirigidas pra outros lugares através de vesículas pra outros 
compartimentos ou ate pro meio extracelular, ou ficar no próprio reticulo 
● Os sinais de endereçamento tb vao orientar o transporte de proteínas do reticulo a outros destinos 
● A sequencia sinal pode estar em qualquer lugar de sequencia de aa da proteína 
Reconhecimento do peptídeo sinal e entrada no compartimento 
 Nucleo 
● Tem grandes poros, então um complexo de proteínas chamadas nucleoporinas, formam 
uma estrutura em forma de cesta (marrom na figura), tem varias fibrilas, estrutura bem 
complexa e grande pra permitir que proteínas enoveladas consigam passar do citosol para 
o nucleo 
● Uma futura proteína nuclear (em verde) tem uma sequencia sinal (verde escuro), so que 
ela não consegue atravessar o poro sozinha, ela precisa se ligar num receptor de 
importação (proteína em azul) e agora esse complexo consegue atravessar a estrutura 
complexa do poro e ai sim a proteína verde chega no interior do nucleo, a proteína azul 
retorna pro citoplasma pra fazer um novo transporte 
 
 
 
 
 
Mitocôndria 
● No começo da figura a proteína em verde apresenta um peptídeo sinal em vermelho que vai fazer com que ela seja 
dirigida a mitocôndria, porem essa proteína tem que estar desenovelada, ai tem varias proteínas menores em verde claro 
que sai chaperonas HSP70 citosolicas que vai desenovelar, mantendo ela esticada e ai o peptídeo sinal é reconhecido por 
7 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
um complexo como uma 
proteína receptora em amarelo e 
essa proteína receptora junto do 
translocador, que é quem ta do 
lado dela, complexo TOM 
permite que a proteína verde 
passe através da membrana 
externa, passe pelo espaço 
periplasmatico, seja reconhecida pela proteína laranja chamada de TIM e ai sim ela vai ser internalizada para a matriz 
mitocondrial, nesse processo, onde esta o numero 3, foi clivado o peptídeo sinal, além disso existe uma HSP 70 mitocondrial 
em azul que agr então vai fazer parte de um processo de manter a proteína esticada e depois de ajudar essa proteína 
adquirir seu enovelamento, na vdd o enovelamento vai ser garantido pela HSP 60 
Reticulo endoplasmatico rugoso 
● O importe pro reticulo 
endoplasmatico rugoso, na grande maioria 
das vezes, é cotraducional 
● O ribossomo ta livre no citosol, o RNA 
m em azul começa a ser traduzido e nos aa 
iniciais já expõe o peptídeo sinal de 
importação para reticulo endoplasmatico, 
então existe uma proteína marrom de 
reconhecimento desse sinal que 
transloca/leva todo esse aparato, ribossomo, 
RNA m, cadeia polipeptídica crescente pra 
superfície do retículo endoplasmatico, onde 
ali haverá um receptor pra essa proteína de 
reconhecimento de sinal (azul escuro) e isso 
acopla e transloca/desloca no nível da membrana do reticulo (esta em cinza) ate o peptídeo sinal se encaixa num 
translocador, que é como se fosse um pequeno poro e agora o pep sinal fica preso e a síntese proteica pode continuar● Os aa estão sendo adicionado um a um pelo ribossomo e a proteína que esta sendo sintetizada (em verde) vai crescendo 
em direção ao lumen do reticulo 
● Existem varias formas das proteínas ficarem 
no reticulo endoplasmatico rugoso: 
● Nesse caso o pep sinal ta em vermelho, a 
proteína que esta sendo feita em verde e que nesse 
caso a proteína foi feita completamente pro interior do 
reticulo, pro lumem do reticulo e uma peptidase clivou 
o pep sinal; essa é uma forma de fazer proteínas que 
fiquem solúveis no lumen do reticulo e essa proteína 
pode ser enovelada corretamente através de HSPs de 
reticulo endoplasmatico 
 
 
 
 
 
8 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Uma segunda forma da proteína estar no 
reticulo é ela estar inserida na bicamada lipídica que 
forma a superfície do reticulo; o reticulo tem uma 
membrana formada de bicamada lipídica e proteínas e 
certas proteínas quando são sintetizadas ficam 
transmembranares, nesse caso a gnt ve a proteína 
sendo sintetizada, seu peptídeo sinal na extremidade foi 
reconhecido, mas essa proteína no meio da cadeia 
apresenta em amarelo uma região hidrofóbica e essa 
região hidrofóbica faz com que esse trecho/região fique 
parada no meio da bicamada lipídica e a síntese proteica 
continua no meio do citosol 
 
 
● Nessa terceira maneira a proteína não tem 
seu peptídeo sinal no inicio, mas aparece um 
peptídeo sinal vermelhinho que é hidrofóbico e fica 
preso no translocador e depois um segundo domínio 
hidrofóbico laranja, pra que fique parada a 
região/esse domínio da proteína no meio da 
bicamada lipídica; tanto o n terminal como o carboxi 
terminal dessa proteína tao voltados pro citosol e 
existe uma alça voltada pro interior do reticulo 
● Todas as proteínas que foram sintetizadas 
pelo ribossomo na superfície do reticulo 
endoplasmatico que então são proteínas solúveis, 
proteínas transmembranares, de uma única 
passagem através da membrana ou de duas/múltiplas passagens podem: 
● Permanecer dentro do próprio retículo 
● Ser transportadas para o complexo de golgi e retornar pro retículo onde exercerão suas funções 
● Saem e vao ser transportadas pro complexo de golgi, portanto saem através de vesiculas 
● Pode permanecer no complexo de golg 
● Podem brotar vesículas a partir do complexo de golgi que vao ser futuramente lisossomos 
● Do golgi saírem vesículas pra compor a membrana plasmática 
● Ainda serem proteínas que passam pelo golgi, são empacotadas em vesículas secretoras que se fundirão na membrana 
plasmática liberando seu conteúdo pro meio extracelular 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
9 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● Embaixo tem o retículo rugoso e ribossomos fazendo a 
síntese proteica no interior do reticulo, seguindo a seta, tem 
uma vesícula revestida de azul que brota do reticulo e através 
dos microtubulos se deslocando com o auxilio de proteínas 
motoras chegam no complexo de golgi, onde se fundem e, 
seguindo a seta, brotam, fundem, brotam, fundem e a hora 
que brota, do lado direito da figura ela brota revestida por 
uma capa avermelhada que futuramente essa vesícula sera o 
lisossomo pq nesse interior da vesícula revestido de vermelho 
tem as enzimas lisossomais, as hidrolases acidas, o lisossomo 
so chama lisossomo quando, olhando de cima, brota uma 
vesícula revestida de vermelho que se fundem com outra, 
formando um endossomo tardio, que junto das enzimas 
lisossomais vao formar o lisossomo, onde ele faz o processo 
de degradação, mas na parte esquerda do transgolgi, brotam 
vesículas que se fundem na membrana plasmática, então o 
conteúdo dessa vesícula sera um conteúdo secretado, 
exocitado pelas cels; agr voltando com as setas a partir do 
cis golgi tb revestido por um revestimento azul tb tenho 
vesículas que retornam pro retículo endoplasmatico, então 
todas as vesículas que brotem e fundem, compõe com o 
endossomo, lisossomos, complexo de golgi e retículo 
endoplasmatico um sistema de endomembranas, esses 
revestimentos são diferentes e auxiliam pra onde a vesícula 
tem que ir, lembrando que as vesículas tem conteúdos 
específicos que foram selecionados pra brotar do reticulo e 
que vao sendo modificados dentro do próprio reticulo e ao longo da passagem do golgi por enzimas, subunidades.... 
● As vesículas que brotam do retículo endoplasmatico em direção ao golgi recebem um revestimento proteico de COP II, 
quando brotam do golgi e vao ser lisossomos futuramente brotam com revestimento de clatrina, quando são endocitadas 
a partir da membrana plasmática tb são revestidas de clatrina e quando vem da região do golgi retornando pro retículo 
endoplasmatico são revestidas por COP I 
Complexo de golgi 
● São pilhas de sacos membranosos, essas regiões, esses espaços internos entre os sacos são chamados de cisternas e as 
cisternas recebem vesículas que estão vindo com moléculas dos compartimentos próximos e ate mesmo do retículo 
endoplasmatico e tb tao levando vesículas pra serem lisossomos ou pra membrana plasmática 
● A região mais perto do retículo endoplasmatico é denominada cis golgi; no meio a gnt chama de cisternas mediais e a 
parte mais distante, ou seja, mais próxima da membrana plasmática a gnt chama de trans golgi 
● As vesículas que vem do retículo endoplasmatico entram com seus conteúdos por fusão através do cis golgi, vao em 
direção a medial e depois saem por vesículas a partir do trans golgi 
Endocitose- vesícula clatrina 
10 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
● 
● Moléculas em vermelho extracelulares vao ser endocitadas mediadas por receptores e então essas proteínas verdes 
claras as adaptinas permitem a ligação da clatrina ai a vesícula vai se projetando pro interior da célula, depois vem uma 
proteína e estrangula esse brotamento em amarelo e pra isso ela gasta gtp e então a vesícula brota, um pouco depois 
de brotar a capa de clatrina e junto de adaptina é desprendida e a vesícula ta nua, mas ta cheia de proteínas na membrana 
e vai se fundir com o seu destino alvo 
● Pra cada vesícula que brota saiba pra onde ela 
vai e exatamente que ponto da membrana alvo 
ela vai se fundir existem outras proteínas presas 
na superfície da membrana que vai, existem 
outras proteínas presas na superfície da 
membrana das vesículas chamadas de vsnare que 
vao se ligar na membrana alvo onde vai ter um t 
snare e essa interação entre os snare permite 
com que haja essa aproximação da vesícula que 
brotou de um certo ponto com a sua vesícula de 
destino alvo para que haja primeiro uma 
ancoragem da vesícula com o alvo e 
posteriormente a fusão, então a vsnare da 
vesícula se liga ao tsnare do alvo para que a fusão 
ocorra num ponto especifico entre essas membranas 
● Então basicamente vai ter o reticulo endoplasmatico de onde vai brotar vesículas que se dirigem pros compartimentos, 
as cisternas, do complexo de golgi e que do golgi pela rede trans brotam vesículas transportadoras permitindo o processo 
de secreção/exocitose ou para serem vesículas contendo lisossomos que se juntarão aos endossomos primários 
formando tardios e lisossomos propriamente ditos; então todo esse transito envolve o tipo de conteúdo dentro da vesícula, 
11 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
proteínas da superfície da membrana, snares, 
proteínas de revestimento, ou seja, são processos 
complexos para que cada proteína esteja em seu 
devido lugar e exerça seu papel adequadamente 
Insulina 
● O complexo de golgi, o reticulo 
endoplasmatico são organelas extremamente 
importantes em modificações pos traducionais de 
proteínas; a insulina é um exemplo que passou por 
essas organelas, ou seja foi sintetizado pelo retículo 
na superfície pq tinha peptídeo sinal, sofreu 
modificações ate que ela esteja concentrada numa 
vesícula esperando o aumento da glicemia pra que 
ocorra a secreção 
● Na imagem a 
esquerda em roxo ela 
tem um peptídeo sinal 
que faz com que ela seja 
importada e sua síntese 
seja feita na superfície do 
reticulo endoplasmatico, 
mas que ela fosse umaproteína solúvel, que ela 
ficasse solta no lumem do 
reticulo, então o pep sinal 
foi clivado no interior do 
reticulo logo em seguida 
da sua síntese; antes de 
ser clivado o pep sinal é 
chamado de pre pro 
insulina, ai quando é clivado vira pro insulina e essa pro insulina vai sofrer modificações no retículo endoplasmatico chamada 
de ponte de sulfeto e após isso a pro insulina vai pro ap de golgi onde ela vai sofrer clivagens, então a parte c vai ser 
clivada e vai ter unidas a cadeia a e b e ai sim é chamado de insulina, que fica armazenada no comp de golgi e dali brota 
em vesículas com alta concentração desse peptídeo e fica armazenado no citosol esperando um sinal pra ser secretado 
Glicosilação de proteínas 
● Adição de um oligossacarídeo numa cadeia de aa/proteína para que essa glicoproteína exerça uma função 
n-glicosilação 
● A n-glicosilação ocorre junto da síntese proteica, na parte da esquerda um RNA m esta sendo lido e traduzido pelo 
ribossomo, laranja, e a cadeia polipeptídica, bolinhas azuis, vai internalizando através do translocador pro interior do reticulo 
endoplasmatico e em algum lugar dessa cadeia aparece um aa asparagina (asn) e este é o sitio de glicosilação de n-
glicosilação, e o oligossacarídeo esta presente ligado no lipídeo da face interna da membrana do reticulo endoplasmatico 
denominado dolicol fosfato, então nesse dolicol fosfato em n-acetilglicosaminas, manoses e glicoses formando um 
oligossacarídeo que já esta montado, na hora que há asparagina num grupo de aa ao redor ocorre a clivagem desse 
12 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
oligossacarídeo do dolicol fosfato e a ligação dele no 
resíduo, no aa asparagina da proteína e essa cadeia 
se liga no nitrogênio do aa asparagina 
● Quando uma glicoproteína n-ligada chega no 
golgi esse oligossacarídeo é modificado, existem 
varias glicosidases que vao clivar certos monômeros 
desse oligossacarídeo e colocar outros 
● A n-glicosilação começa no retículo 
endoplasmatico, mas o oligossacarídeo é modificado 
no complexo de golgi, então existe a participação 
dessas duas organelas na n-glicosilação 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
o-glicosilação 
● Processo de glicosilação que começa no complexo de golgi, nesse caso, a síntese de 
proteína já acabou no reticulo endoplasmatico e a proteína vem através de vesícula pro 
interior do golgi e no golgi uma serina ou uma treonina, presente nessa proteína num certo 
consenso atrai/funcionam como sítios de glicosilação; so que essa glicosilação do tipo o é 
feita um a um, a adição dos monômeros é feita um a um, primeiro o n-acetilgalactosamina, 
depois a galactose e depois o acido sialico 
● Chama o-glicosilação pq um oligossacarídeo é ligado tanto na serina como na trionina 
numa hidroxila 
 
 
 
 
 
 
Glicoproteínas 
● Do golgi brotam vesículas contendo glicoproteínas, os carboidratos estão internos no reticulo, internos no golgi e internos 
na vesícula e se essa vesícula vai compor a membrana plasmática, por exemplo, levando proteínas da superfície externa 
da membrana que vao compor o glicocalice 
● Quando essa vesícula tem em sua composição proteínas transmembranares (pontos pretos), cujos pontinhos pinks são 
os carboidratos, os oligossacarídeos dessas glicoproteinas, quando a vesícula se funde na superfície da MP (memb plasm) 
13 
Biomol 
Modificações de proteínas 
 
aquilo que estava interno a vesícula agora esta voltado 
pra face externa da célula e aquilo que tava voltado pra 
face do citosol continua voltado pra face do citsol la da 
MP 
● Portanto a forma que a proteína é posicionada no 
retículo interfere na forma que ela vai ser glicosilada, na 
forma que ela vai ser transportada pra que ela fique na 
posição correta no seu destino final (MP) 
● NÃO É ALEATORIA A DISTRIBUIÇÃO DE PROTEÍNAS 
EM NENHUM LUGAR DA CELULA!!!!!!1 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
● Mostra em azul proteínas que devem 
ser secretadas continuamente pela célula, 
ou seja brotam do transgolgi e 
continuamente essas vesículas se fundem 
na MP liberando seu conteúdo, mas a 
mesma vesícula tb contem essas proteínas 
pretas que são da MP e poderiam por ex 
as glicoprot da figura anterior cuja posição 
é importante, ou um receptor acoplado a 
prot g que tem que chegar na MP 
● Em rosa a vesícula fica armazenada 
esperando um sinal, pode ser por exemplo 
a insulina